一种基于定量PCR技术的GSTM1分型检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于定量PCR技术的GSTM1分型检测方法，采用GSTM1基因特异性的引物SEQ1和SEQ2扩增GSTM1基因片段，同时在GSTM1基因特异性的引物界定的扩增区域内设计GSTM1基因特异性TAQman探针SEQ3‑Fam；采用ALbumin特异性的PCR引物SEQ4和SEQ5扩增ALbumin基因片段，同时在ALbumin基因特异性的引物界定的扩增区域内设计ALbumin基因特异性TAQman探针SEQ6‑Vic。可以有效预防PCR产物污染，避免有毒DNA染色剂污染，可以大大简化检测与结果分析过程，提高检测通量。

【技术实现步骤摘要】
一种基于定量PCR技术的GSTM1分型检测方法
本专利技术涉及基因检测
，具体是一种基于定量PCR技术的GSTM1分型检测方法。
技术介绍
GSTM1为一种重要的代谢酶，参与对内生和外源性物质的转化和代谢，赋予代谢物新的生物学特性。在人类GSTM1具有多态性，GSTM1缺失为一种常见的基因型。不同GSTM1基因型的个体地物质的转化功能存在差异。GSTM1基因分型用于多种生物学性状的研究。传统的，由于GSTM1缺失多态性可以通过普通PCR检测，多采用常规基因特异性PCR，琼脂糖电泳检测方式确认GSTM1基因型。虽然简便，但是由于电泳操作必须开管加样和电泳，容易造成实验室污染，难于在高通量下确保实验可靠性。同时常规PCR电泳分析法也难于发现杂合子基因型，影响基因性状分析的准确定。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种避免有毒DNA染色剂污染、提高检测通量的基于定量PCR技术的GSTM1分型检测方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种基于定量PCR技术的GSTM1分型检测方法，具体步骤如下：（1）采用二代测序验证的人GSTM1正常纯合子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于定量PCR技术的GSTM1分型检测方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）采用二代测序验证的人GSTM1正常纯合子、杂合子和缺失纯合子基因组DNA作为相应对照物；（2）采用GSTM1基因特异性的引物SEQ1和SEQ2扩增GSTM1基因片段，同时在GSTM1基因特异性的引物界定的扩增区域内设计GSTM1基因特异性TAQman探针SEQ3‑Fam；若存在GSTM1基因，则GSTM1基因特异性TAQman探针SEQ3‑Fam释放FAM荧光信号而被定量PCR仪器检到；若没有GSTM1片段，则无GSTM1扩增，无FAM荧光信号释放；（3）采用ALbumin特异性的PCR引物SEQ4和SEQ5扩增A...

【技术特征摘要】
1.一种基于定量PCR技术的GSTM1分型检测方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）采用二代测序验证的人GSTM1正常纯合子、杂合子和缺失纯合子基因组DNA作为相应对照物；（2）采用GSTM1基因特异性的引物SEQ1和SEQ2扩增GSTM1基因片段，同时在GSTM1基因特异性的引物界定的扩增区域内设计GSTM1基因特异性TAQman探针SEQ3-Fam；若存在GSTM1基因，则GSTM1基因特异性TAQman探针SEQ3-Fam释放FAM荧光信号而被定量PCR仪器检到；若没有GSTM1片段，则无GSTM1扩增，无FAM荧光信号释放；（3）采用ALbumin特异性的PCR引物SEQ4和SEQ5扩增ALbumin基因片段，同时在ALbumin基因特异性的引物界定的扩增区域内设计ALbumin基因特异性TAQman探针SEQ6-Vic；若存在合格样本，则有ALbumin扩增，释放Vic荧光信号，定量PCR仪器检测到Vic荧光信号；若样本不合格，则样本无ALbumin扩增，无Vic荧光信号释放；（...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨随娟，杨燕燕，刘虎，
申请(专利权)人：上海龙鼎医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31