组织处理试剂制造技术

本发明专利技术提供了一种方法，所述方法包括用包括缩醛溶剂的组合物处理取自身体的生物样品。本发明专利技术提供了一种方法，所述方法包括使取自身体的组织与包括缩醛溶剂的组合物接触作为固定、脱水、透明化以及浸润处理中的至少一个。

【技术实现步骤摘要】
组织处理试剂
本专利技术涉及组织处理。
技术介绍
用于诊断疾病过程的取自身体的组织常常在组织学实验室中被处理以产生薄的组织切片，所述组织切片可以被封固在载片上并且在显微镜下由病理学家观察以进行分析。这些分析前处理按顺序一般包括肉眼检查固定、脱水、透明化、石蜡浸润以及包埋。所述程序用于处理组织，包括活检标本、在手术时取出的更大的标本、或来自尸检的组织。肉眼检查一般由以下步骤组成：描述宏观标本以及将它的全部或所选择的部分放入到当所述组织被处理成石蜡块时容纳所述组织的小的塑料盒中。最初，将所述盒放入到固定剂中。在肉眼检查后，将组织固定。固定的目的在于通过改变蛋白质的结构以使得不发生由自溶引起的降解而将组织永久地保存在尽可能如活组织的状态。多种固定剂可供使用，这取决于存在的组织类型以及待展现的特征。根据作用机制分类的主要固定剂组包括醛、汞剂、醇、氧化剂以及苦味酸盐。福尔马林固定最好是在约中性pH值，例如在6-8范围之内进行。组织缺氧倾向于降低pH值，因此固定剂应当有缓冲能力以防止过度的酸性。常见的缓冲剂包括磷酸盐、碳酸氢盐、苹果酸盐、卡可基酸盐、以及佛罗那(veronal)。市售的福尔马林例如可以用pH7的磷酸盐缓冲。组织的渗透取决于每一种单独的固定剂的扩散性。一种提高固定剂的渗透的方式是薄地获得(切割)组织(2至3毫米(mm))。向薄组织切片中渗透将比向厚切片渗透更快地发生。固定剂的体积一般是重要的，固定剂与通常针对的组织的比为10:1或更大。在固定剂中搅拌标本也常常将增强固定。一旦组织已经被固着或固定，所述组织就需要被处理成如下的形式，其中它可以被制成薄切片以进行显微镜检查。这样做的通常的方式是使用石蜡。将组织包埋于石蜡中，所述石蜡为组织提供固体支持基质，从而允许它以约2微米至20微米的厚度被切片。将固定的组织放入石蜡中以进行切片被称作组织处理，在这一处理中主要的步骤是脱水、透明化、浸润以及包埋。在水溶液中固定的组织不能用石蜡直接浸润。首先，必须通过脱水去除组织中的水。这可以用一系列不同浓度(例如70％至95％至100％)的醇来进行。或者，用福尔马林和醇的混合物进行脱水。还可以使用其它脱水剂，如丙酮或不同溶剂的混合物。在脱水后，将组织透明化。“透明化”由用与包埋介质(例如石蜡)可混溶的物质去除脱水剂和一些脂质组成。最常见的透明剂是二甲苯。一旦被透明化，就用诸如石蜡的包埋剂浸润组织。最后，将处于盒中的组织或从它的盒中取出的组织放入熔融的石蜡中，然后将石蜡冷却以形成包埋或包封组织的凝固块以使得它可以被切片。或者，组织可以在可切片的盒中被处理，连同所述盒一起被包埋于石蜡中并且被切片。一旦组织已经被包埋于固体石蜡块中，就可以将所述组织切割成可以被放在载片上的切片。这个步骤用切片机进行。一旦切下切片，就将它们漂浮在温水浴上，所述温水浴有助于去除任何褶皱。然后将处于石蜡中的组织切片从水浴中取出并且放在玻璃显微镜载片上。
技术实现思路
在一个实施方案中，公开了一种组合物，所述组合物包括缩醛溶剂，所述组合物可操作或适用于处理取自身体的生物样品。用于诊断或研究的取自身体的生物样品如组织，包括但不限于，活检标本、在手术时取出的标本和/或来自尸检的组织。还公开了一种方法，所述方法包括用包括缩醛的组合物处理取自身体的用于诊断的生物样品。在这方面，在一个实施方案中，处理生物样品关注于所述生物样品的分析前处理，如固定、透明化和/或包埋以进行后续的检查/诊断。适用于用于处理生物样品的组合物的代表性缩醛包括甲缩醛、乙缩醛、丁缩醛、二氧戊环、甘油缩甲醛、乙醛缩二乙醇以及其混合物。二氧戊环是一种特别优选的缩醛溶剂。如本文所述的二氧戊环包括1,3-二氧戊环以及它的加合物和其混合物。这样的加合物包括但不限于2-甲基-1,3-二氧戊环；4-甲基-1,3-二氧戊环；2,2-二甲基-1,3-二氧戊环；2-甲基-1,3-二氧戊环；4-甲基-2-苯基-1,3-二氧戊环(苯甲醛丙二醇)、1,2-二氧戊环以及其加合物。1,3-二氧戊环是一种特别优选的二氧戊环，这是因为它具有有利的毒性特征和商业可得性。在一个实施方案中，包括二氧戊环的组合物用于组织学实验室中的处理以产生可以在显微镜下观察以进行分析的显微镜载片。在一个实施方案中，包括二氧戊环的组合物可以单独或与例如醇、丙酮、二甲苯或二醇组合(单独或作为混合物)用作脱水剂。在另一个实施方案中，包括二氧戊环的组合物可以在固定处理之后单独或与醇组合(单独或作为混合物)用作脱水剂。更进一步，包括二氧戊环的组合物可以与例如添加剂如石蜡一起用于浸润处理中以提高石蜡在组织中的浸润。作为透明剂，包括二氧戊环的组合物可以100％浓度(例如100％二氧戊环组合物)使用或可以更低的组成与另外的一种或多种透明剂如烃透明剂(例如二甲苯、己烷、矿物油)、具有基于氧的官能团的烃透明剂(例如醇(例如乙醇)、乙酸盐、醚、缩醛等)或透明剂的混合物(例如70％至85％二氧戊环，其余部分是另外的一种或多种透明剂)组合。以下是在分析前处理中包括二氧戊环的组合物用于处理取自身体的组织以进行诊断的示例性用途。1.使用脱水试剂，如乙醇、甲醇、异丙醇、丙酮等或这些试剂的组合以实现组织的脱水，随后以独立试剂的形式或以与诸如乙醇、二甲苯等其它试剂的混合物的形式使用二氧戊环以进行透明化。具体实例包括：a)使用95％至100％乙醇进行脱水，随后使用1,3-二氧戊环进行透明化；b)使用乙醇-异丙醇混合物(70:30v/v)进行脱水，随后使用1,3-二氧戊环进行透明化；c)使用丙酮-异丙醇-乙二醇混合物进行脱水，随后使用1,3-二氧戊环进行透明化；d)使用70％试剂乙醇(用1％至10％异丙醇和甲醇变性的纯乙醇)进行脱水，随后使用1,3-二氧戊环进行透明化；以及e)使用含有多达2％乙酸的95％至100％试剂乙醇，随后使用1,3-二氧戊环进行透明化。2.使用1,3-二氧戊环-试剂乙醇混合物(例如80:20、85:15、90:10、95:5v/v)进行透明化。3.使用二氧戊环作为脱水混合物的一部分以实现组织脱水并且再次使用二氧戊环作为单独的透明化试剂或作为透明化混合物(如上列的那些)的一部分实现透明化。用于脱水的代表性混合物包括试剂乙醇(例如乙醇)-1,3-二氧戊环混合物(70:30；50:50以及30:70v/v)。4.使用二氧戊环作为石蜡中的添加剂(例如石蜡中多达20％的二氧戊环)以有助于蜡浸润到组织中。用于脱水、透明化或浸润处理的包括二氧戊环的组合物可以在常规的组织处理器上用于一般是几小时长的常规处理方案或用于更短时间(例如60分钟或更短)的短方案。包括二氧戊环的组合物还可以在常规的组织处理器上的这样的处理中用于在高达70℃的试剂处理温度的高温下执行的处理方案。举例来说，用于组织脱水的包括二氧戊环的组合物连同试剂醇以及用于透明化的包括二氧戊环的组合物单独或作为混合物的一部分可以在无需额外加热所述处理的操作温度下或在60℃的升高的试剂温度下进行。对于浸润处理，包括二氧戊环的组合物可以与约65℃-70℃温度的石蜡组合。用作脱水剂、透明剂或浸润剂的包括二氧戊环的组合物还适于与微波辅助的组织处理一起用于对于常规尺寸的组织约60分钟、对于更小的组织(活检、核心等)更短时间段的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种方法，包括：用包含缩醛溶剂的组合物处理取自身体的生物样品。

【技术特征摘要】
2015.12.30 US 14/984,946;2016.12.07 US 15/371,5881.一种方法，包括：用包含缩醛溶剂的组合物处理取自身体的生物样品。2.如权利要求1所述的方法，其中所述缩醛溶剂包括二氧戊环。3.如权利要求1或2所述的方法，其中处理所述生物样品包括固定所述生物样品。4.如权利要求3所述的方法，其中所述缩醛溶剂是二氧戊环并且固定所述生物样品包括使所述生物样品与包含所述二氧戊环、催化剂以及水的混合物接触。5.如权利要求1所述的方法，其中在用所述组合物处理所述生物样品之前，所述方法包括固定所述生物样品。6.如权利要求5所述的方法，其中在固定所述生物样品之后，所述方法包括使所述生物样品脱水和透明化，并且用所述组合物处理所述生物样品包括作为至少一次脱水和透明化的至少一部分进行处理。7.如权利要求6所述的方法，其中在用所述组合物处理所述生物样品之前，所述方法包括使固定的生物样品脱水。8.如权利要求7所述的方法，其中脱水包括用包含醇的脱水组合物处理所述固定的生物样品。9.如权利要求7所述的方法，其中所述脱水组合物包含丙酮和乙二醇中的至少一种。10.如权利要求6所述的方法，其中脱水包括用包含所述组合物的脱水组合物处理所述固定的生物样品。11.如权利要求5所述的方法，其中在固定所述生物样品之后，所述方法包括使所述生物样品脱水、透明...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·D·沙阿，
申请(专利权)人：美国樱花检验仪器株式会社，
类型：发明
国别省市：美国,US