一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法技术

本发明专利技术是一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法，具体步骤为：(1)材料采集与消毒：于6月份剪取田间生长旺盛的甘薯苗顶芽，切去叶片，自来水冲洗，用无菌滤纸吸干水分，置于超净工作台上消毒备用；(2)茎尖剥离与培养：在双目解剖镜下，将消毒后的甘薯顶芽用注射器针尖剥去外层叶片，将茎尖接种在初代培养基上进行培养，得到组培苗；(3)组培苗病毒检测：采用指示植物针刺汁液沾接法进行病毒检测，根据检测结果淘汰带毒苗，保留脱毒苗。本发明专利技术提供了一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法，甘薯脱毒成功率提高，病毒检测准确度高，对防治甘薯病毒病提供了一种有效的检测手段。

Method for in vitro culture of stem tip of sweet potato and virus detection of tissue culture seedling

The invention is a kind of sweet potato stem tips from in vitro culture and Plantlet virus detection method, which comprises the following steps: (1) the material collection and sterilization: in June their field vigorous growth of sweet potato seedlings bud, cut off the leaves, rinse with tap water, sterile filter paper absorb water, placed on the worktable and sterilized (; 2) and culture of Shoot Tip: in a binocular dissecting microscope, the sterilized syringe needle strip the outer bud of sweet potato leaves, the stem tip inoculation in primary culture medium, obtained plantlets; (3) virus detection: using indicator plant tissue culture seedling juice adhering method of acupuncture and virus detection according to the test results out of infected seedlings, retention of virus-free seedlings. The present invention provides a kind of sweet potato stem tip from in vitro culture and Plantlet virus detection method, improve the success rate of virus-free sweet potato virus detection, high accuracy, provides an effective means of detection of sweet potato virus disease prevention.

【技术实现步骤摘要】
一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法
本专利技术涉及甘薯组培苗病毒检测领域，尤其涉及一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法。
技术介绍
甘薯是无性繁殖作物，大田种植容易受羽状斑驳病毒(SPFMV)、花椰菜花叶状病毒(SPCLV)、潜隐病毒(SPLV)和烟草花叶病毒(TMV)的侵染，导致种性退化，抗性降低，产量和品质下降。我国多数种植区的田间植株病毒感染率为60％-70％，有的甚至达90％，每年导致甘薯减产幅度达29％。目前尚无对病毒完全抗性的品种和彻底免疫的方法，也无特效药剂，采用茎尖脱毒技术仍然是防治甘薯病毒病、恢复优良种性、提高产量和品质的根本方法。因此对甘薯茎尖进行离体培养以及对组培苗的病毒检测成为防治甘薯病毒的研究重点。
技术实现思路
本专利技术旨在解决现有技术的不足，而提供一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法。本专利技术为实现上述目的，采用以下技术方案：一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法，具体步骤为：(1)材料采集与消毒于6月份剪取田间生长旺盛的甘薯苗顶芽，切去叶片，自来水冲洗40-50min，用无菌滤纸吸干水分，置于超净工作台上用75％酒精浸洗25s，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法，其特征在于，具体步骤为：(1)材料采集与消毒于6月份剪取田间生长旺盛的甘薯苗顶芽，切去叶片，自来水冲洗40‑50min，用无菌滤纸吸干水分，置于超净工作台上用75％酒精浸洗25s，再用0.1％升汞消毒5min，最后用无菌水冲洗7‑8次，备用；(2)茎尖剥离与培养在双目解剖镜下，将消毒后的甘薯顶芽用注射器针尖剥去外层叶片，仅留1‑2个叶原基，将5‑6个大小为0.1‑0.2mm的茎尖接种在初代培养基上进行培养，培养基中蔗糖为30g/L，琼脂为6.0g/L，pH为5.8，培养温度为25℃，光照强度2000‑3000lx，光照时间12h/d，培养40天，得到...

【技术特征摘要】
1.一种甘薯茎尖离体培养及组培苗病毒检测的方法，其特征在于，具体步骤为：(1)材料采集与消毒于6月份剪取田间生长旺盛的甘薯苗顶芽，切去叶片，自来水冲洗40-50min，用无菌滤纸吸干水分，置于超净工作台上用75％酒精浸洗25s，再用0.1％升汞消毒5min，最后用无菌水冲洗7-8次，备用；(2)茎尖剥离与培养在双目解剖镜下，将消毒后的甘薯顶芽用注射器针尖剥去外层叶片，仅留1-2个叶原基，将5-6个大小为0.1-0.2mm的茎尖接种在初代培养基上进行培养，培养基中蔗糖为30g/L，琼脂为6.0g/L，pH为5.8，培养温度为25℃，光照强度2000-3000lx，光照时间12h/d，培养40天，得到组培苗；(3)组培苗病毒检测采用指示植物针刺汁液沾接法进行病毒检测：在巴西牵...

【专利技术属性】
技术研发人员：王立国，王刚，李燕，李建军，高翔，张嘉，
申请(专利权)人：天津丰华裕隆农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12