一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法技术

本发明专利技术涉及一种注射针的制备方法，尤其是涉及一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法，为将外径为1mm的薄玻璃管，首先用Sutter P‑1000拉针仪拉制成内径为1‑3um的注射针，再用MF‑900煅针仪将针尖在5um处切断，用EG‑400磨针仪磨制针尖角度为30度，最后用MF‑900煅针仪将斜面拉尖即可；该方法简单、独特，而且用本方法制成的注射针非常容易插入睾丸输出管，样品渗漏少，提高注射效率，还能减少输出管的损伤，提高制备转基因动物的成功率、减少或避免动物死亡。

Method for preparing injection needle for injection of testis output tube

The invention relates to a needle preparation method, especially relates to a preparation method for needle injection testicular output tube, for the diameter of thin glass tubes 1mm, the first Sutter P 1000 pull needle instrument drawn from the inner diameter of needle 1 3um, then MF 900 calcined needle instrument will cut off the tip at 5um, with EG 400 grinding apparatus for grinding tip angle of 30 degrees, the inclined pull tip can use MF 900 calcined needle instrument; the method is simple, unique, and with a needle made by this method is very easy to insert the testicular output tube, sample leakage, increase the injection shooting efficiency, but also reduce the output pipe damage, improve the success rate of preparation of transgenic animal, reduce or avoid the death of the animal.

【技术实现步骤摘要】
一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法
本专利技术涉及一种注射针的制备方法，尤其是涉及一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法。
技术介绍
转基因小鼠已是医学和生命科学研究重要的研究工具。原核显微注射法制备转基因小鼠是传统经典方法，但是其操作比较繁琐，技术要求高。精子介导法制备转基因小鼠是一种新思路，该方法成本低、操作简便、周期短。睾丸注射是精子介导制备转基因小鼠的重要方法。目前，利用该方法已成功制备了小鼠、大鼠及兔等实验动物。通过睾丸注射法，可以有效地解决当前制备转基因小鼠操作复杂、成本高和效率低等问题，将会推动转基因动物在人类疾病建模的应用。另外，睾丸注射也是曲细精管内干细胞移植的重要方法，为研究精子发生过程和男性不育发治疗提供了新思路。睾丸输出管注射是睾丸注射的重要方法。该注射方法是将外源基因通过游离的、韧性强的输出小管注射到睾丸曲细精管内，进而转染生精细胞建立转基因精子。该注射方法操作简便可靠，而且不需要昂贵的仪器就能完成，只需要玻璃针就可以完成注射。注射针的质量对注射效率影响非常大。好的注射针不但能提高注射效率，还能减少输出管的损伤，提高制备转基因动物的成功率。所以，注射针的制备非常重要，但是目前还没有成熟的制备睾丸输出管注射针的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种制备方法简单、独特，而且用本方法制成的注射针非常容易插入睾丸输出管，样品渗漏少，提高注射效率，还能减少输出管的损伤，提高制备转基因动物的成功率、减少或避免动物死亡的一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法。本专利技术通过如下方式实现：一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法，其特征在于：该方法为将外径为1mm的薄玻璃管，首先用SutterP-1000拉针仪拉制成内径为1-3um的注射针，再用MF-900煅针仪将针尖在5um处切断，用EG-400磨针仪磨制针尖角度为30度，最后用MF-900煅针仪将斜面拉尖即可；所述薄玻璃管是外径为1mm，内径为0.58mm，长10cm，内径含玻璃丝的玻璃管；所述拉针仪具体参数如下：Heat：Ramp+30；Pull：10；Velocit：120；Time：0；Pressure：200；所述针尖的磨制为将针内径5μm部位与玻璃珠刚好接触，踩下脚控开关加热，当看到玻璃针与玻璃珠刚好粘在一起时，松开脚控开关，玻璃珠即可断开玻璃管的尖端，得到内径在5μm的平口针，将得到的平口针再用EG-400磨针仪将针尖磨制成30度的斜面，将注射针固定在持针器上，并调整持针器与磨石的夹角为30度，磨削速度选择为1000r/min，显微镜下仔细观察，直到磨制出30度斜面，且边缘整齐；所述针尖的拉尖为用MF-900将注射针头的斜面做成1-2μm的尖头，将上述注射针安装在煅针仪上，调节针尖位于玻璃珠上方，踩下脚控开关，当发现针尖端有粘在玻璃珠的迹象时，快速拉开玻璃针，并松开脚控开关。本专利技术具有如下效果：1)方法简单独特：本专利技术提供的方法为该方法为将外径为1mm的薄玻璃管，首先用SutterP-1000拉针仪拉制成内径为1-3um的注射针，再用MF-900煅针仪将针尖在5um处切断，用EG-400磨针仪磨制针尖角度为30度，最后用MF-900煅针仪将斜面拉尖即可。2)提高注射成功率高，进而减少或避免动物的死亡：动物的睾丸输出管有一定的韧性和游离性，普通注射针需要反复穿刺才能刺入睾丸输出管，对输出管造成严重损伤，导致样品渗漏，严重时会导致注射失败和动物死亡。本申请提供的方法将针尖磨制成30度的斜面，并将斜面拉尖，可以一次性刺入睾丸输出管，大大减少对输出管的损伤和样品渗漏，提高注射成功率高，进而减少或避免动物的死亡。3)制备方法简单、成本低，有利于商业化生产：目前，国内外还未见有同类产品的生产制造。本方法不需要特殊材料，而且原材料玻璃管来源方便，只需要几分钱，成本低。另外，本方法使用仪器制备注射针，并提供了仪器的所有制备参数，保证了制备针的一致性，有利于商业化生产。具体实施方式一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法，该方法为如下步骤：a.玻璃管的选择：选择外径为1mm，内径为0.58mm，长10cm的薄玻璃管，玻璃管内径应含细玻璃丝，可以通过毛吸作用使液体充满注射针管。玻璃管应注意防尘，避免用手直接触摸玻璃管，也不要用带有滑石粉的手套操作玻璃管。b.玻璃管的拉制：用SutterP-1000拉针仪将上述玻璃管拉制成内径为1-3um的注射针。拉针仪具体参数如下：Heat：Ramp+30；Pull：10；Velocit：120；Time：0；Pressure：200。c.针尖的磨制：先用MF-900煅针仪将针尖在5um处切断。将针内径5μm部位与玻璃珠刚好接触。踩下脚控开关加热，当看到玻璃针与玻璃珠刚好粘在一起时，松开脚控开光，玻璃珠即可断开玻璃管的尖端，得到内径在5μm的平口针。将得到的平口针再用EG-400磨针仪将针尖磨制成30度的斜面。将注射针固定在持针器上，并调整持针器与磨石的夹角为30度。磨削速度选择为1000r/min,太快或太慢均不利于针的制备。显微镜下仔细观察，直到磨制出30度斜面，且边缘整齐。d.针尖的拉尖：用MF-900将注射针头的斜面做成1-2μm的尖头。将上述注射针安装在煅针仪上，调节针尖位于玻璃珠上方，踩下脚控开关，当发现针尖端有粘在玻璃珠的迹象时，快速拉开玻璃针，并松开脚控开关。拉尖的针非常锋利，有利于刺入游离的输出管。本专利技术提供的注射针应为一次产品，而且注射针如果有玻璃碎片，应淘汰。在睾丸输出管注射时，应平行进针，缓慢增加注射压力，使注射样品逐渐充满曲精细管。用本方法制成的注射针非常容易插入睾丸输出管，样品渗漏少，注射成功率高，而且可以大大减少对输出管的损失，减少或避免动物的死亡。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法，其特征在于：该方法为将外径为1mm的薄玻璃管，首先用Sutter P‑1000拉针仪拉制成内径为1‑3um的注射针，再用MF‑900煅针仪将针尖在5um处切断，用EG‑400磨针仪磨制针尖角度为30度，最后用MF‑900煅针仪将斜面拉尖即可。

【技术特征摘要】
1.一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法，其特征在于：该方法为将外径为1mm的薄玻璃管，首先用SutterP-1000拉针仪拉制成内径为1-3um的注射针，再用MF-900煅针仪将针尖在5um处切断，用EG-400磨针仪磨制针尖角度为30度，最后用MF-900煅针仪将斜面拉尖即可。2.如权利要求1所述的一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法，其特征在于：所述薄玻璃管是外径为1mm，内径为0.58mm，长10cm，内径含玻璃丝的玻璃管。3.如权利要求1所述的一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法，其特征在于：所述拉针仪具体参数如下：Heat：Ramp+30；Pull：10；Velocit：120；Time：0；Pressure：200。4.如权利要求1所述的一种用于睾丸输出管注...

【专利技术属性】
技术研发人员：冉林武，杨文，陈健茂，李红兵，王晓东，荣瑞奇，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：宁夏,64