一种丹参丹酚酸A的制备方法技术

本发明专利技术涉及医药领域，具体涉及一种丹参丹酚酸A制备方法。本发明专利技术方法具有多方优点：(1)在转化步骤前先将丹酚酸类成分进行粗分离，分出富含丹酚酸B及紫草酸的溶液，再进行转化，从而使要转化药液的体积减小，转化反应不需要较大的设备；(2)采用常压下加热回流转化，无需高压反应，易工业化操作；(3)采用中高压色谱柱，能将未转化完的丹酚酸B和紫草酸的丹酚酸溶液再经过转化加以利用，提高丹酚酸A整体收率(4)获得的丹酚酸A纯度高(98％以上)，收率高(3.0‰以上)，且重复性好，适合工业化生产。

Preparation method of salvianolic acid A

The invention relates to the field of medicine, in particular to a preparation method of salvianolic acid A. The method has many advantages: (1) the conversion step before the crude separation of salvianolic acid solution, separated in salvianolic acid B and lithospermic acid, then the transformation, so that the conversion to liquid volume decreases, conversion reaction without a large equipment; (2) by heating under atmospheric pressure reflux transformation, without high pressure reaction, easy industrialized operation; (3) by HPLC, salvianolic acid solution can not end the conversion of salvianolic acid B and lithospermic acid after conversion to use, improve the overall yield of salvianolic acid A (4) to obtain high purity (salvianolic acid A 98% above), high yield (3 per thousand or more), and good repeatability and is suitable for industrialized production.

【技术实现步骤摘要】
一种丹参丹酚酸A的制备方法
本专利技术涉及一种丹参丹酚酸A制备方法，属于医药

技术介绍
丹参在临床上广泛用于治疗心血管系统疾病，其主要活性成分为水溶性酚酸类，主要有丹酚酸B、原儿茶醛、原儿茶酸、丹参素、迷迭香酸等，丹酚酸A是丹参水溶性酚酸类成分中的一种，其含量较低。但近年来研究发现，丹酚酸A是目前已知的最强的抗氧化化合物之一，丹酚酸A在抗氧化、心肌缺血保护、抗血栓、神经保护、抗肝纤维化、防治糖尿病及并发症等多个方面具有广泛的药理活性(张莉，张维库，赵莹，杨秀颖，方莲花，王守宝，杜冠华(2011)。丹酚酸A为淡黄色粉末，易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等溶剂，对光和热不稳定，暴露空气易氧化成丹酚酸C和异丹酚酸C等，其结构式如下：现有大量关于丹酚酸A制备方法的专利和文献，其中丹酚酸A制备方法的中国专利有CN200610012615.1、CN200610052442.6、CN200610165779.8、CN200710001055.4、CN200710070553.4、CN200710099618.8、CN200810120784.6、CN201010143656.0、CN201010143666.4、CN201010143678.7、CN201010143689.5、CN201010143714.X、CN201010148488.4、CN201010541651.3、CN201010598480.8、CN201010620911.6、CN201110083924.9、CN201110141512.6、CN201210487598.2、CN201210487600.6、CN201210487643.4、CN201210488782.9、CN201310192210.0、CN201310258565.5、CN201310487751.6、CN201410216134.7、CN201510086508.2、CN201511019464.8，其中专利CN200610052442.6、CN200610165779.8、CN200710070553.4、CN200810120784.6、CN201010143656.0、CN201110083924.9、CN201210487643.4、CN201310487751.6采用水或醇直接提取，该法由于丹参药材中丹酚酸A的含量约为0.03％～0.06％，故采取直接提取的方法得到的丹酚酸A提取率比较低；专利CN200710099618.8、CN201010143678.7、CN201010143689.5、CN201010143714.X、CN201010598480.8、CN201210487598.2、CN201310192210.0、CN201310258565.5采用以丹酚酸B或丹参多酚酸盐为起始原料，经过高温高压、酶促反应或加入催化剂如氯化锌等反应转化生产丹酚酸A，该法比较容易控制，但是以丹酚酸B或丹参多酚酸盐为原料其成本较高，且转化为丹酚酸A的转移率比较低，如CN201010143678.7仅为10％左右。另外一部分专利，如CN1830947公开了高温处理丹参提取物制备丹酚酸A的条件为101～140℃处理0.5～24小时，随后，CN100999470对其条件进行了细化，条件进一步优化为PH3.5～6.0,110～130℃下处理1～6小时制备丹酚酸A，为解决丹参药材中丹酚酸A含量低提供了较好的方法，解决了丹酚酸A的来源问题，但是此工艺，由于是水提液不经处理直接进行转化反应，存在如下不利因素：1)水提液中含有蛋白质及胶体物质，将与转化后的丹酚酸A结合，增加后续分离难度；2)水提取液中含有部分金属离子在转化过程中可能与丹酚酸A或丹酚酸B螯合，阻碍或加剧丹酚酸A的生成或降解；3)转化体积过大，需要增大设备从而增大了能耗，且加压操作存在安全性问题。另外，以上的专利仅考虑丹酚酸B转化生成丹酚酸A，而忽略了紫草酸，根据文献(Xia,H.,Sun,L.,Lou,H.,&Rahman,M.M.(2014).ConversionofsalvianolicacidBintosalvianolicacidAintissuesofRadixSalviaeMiltiorrhizaeusinghightemperature,highpressureandhighhumidity.PhytomedicineInternationalJournalofPhytotherapy&Phytopharmacology,21(6),906-911.)，丹酚酸B在一定条件下降解产生丹酚酸A，丹酚酸B先降解产生紫草酸，再经过脱去一份子二氧化碳才生成丹酚酸A，故丹酚酸A是丹酚酸B和紫草酸共同的降解产物，如下式：在精制过程，现有的专利和文献主要采用大孔吸附树脂、硅胶、聚酰胺、以及MCI和SephadexLH-20，使用硅胶往往使用比较多的有机溶剂，且死吸附较大而造成丹酚酸A较多的损失，后两种MCI、SephadexLH-20成本较高，且工艺控制研究不深入，往往造成在处理过程中丹酚酸A的降解和破坏。通过转化的方式生成丹酚酸A，为丹酚酸A的制备提供了很好的思路，但是综合以上的专利文献，对丹参药材中降解生成丹酚酸A的途径及转化反应条件还没有深入的研究，根据已有的研究报道，丹酚酸A的提取和收率有一定提高，但是仍然存在转化率低，分离纯化过程较长，收率低的问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的主要目的在于提供一个低成本、转化率高，后续分离精制过程简单，能产业化制备丹酚酸A的方法。为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种丹酚酸A的制备方法，包括(1)提取步骤、(2)过大孔吸附树脂柱的粗分离步骤、(3)转化步骤、(4)精制步骤、(5)萃取步骤、(6)干燥步骤，所述(4)精制步骤是采用中高压柱色谱对丹酚酸A进行精制纯化，中高压色谱的填料为ODSC18，填料粒径为10～40um，压力10～25bar。优选地，所述的中高压色谱洗脱溶剂为甲醇-磷酸水或乙醇-磷酸水的一种，所述甲醇-磷酸水或乙醇-磷酸水的体积比为15:85～25:75，其中所述磷酸水中磷酸的质量百分比为0.1％～0.4％。优选地，所述(4)精制步骤中，填料粒径为20um。优选地，所述(4)精制步骤中，上样溶液的丹酚酸A浓度为1.10mg/ml～1.50mg/ml的溶液。优选地，所述(1)提取步骤中，使用的提取溶剂选自水、甲醇、乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。优选地，所述(2)过大孔吸附树脂柱的粗分离步骤选用的大孔吸附树脂为LK02或LKY134或D101中的一种，上样速度为1BV/h，上样量为18.0～25.0ml/g大孔吸附树脂，用水和10％乙醇水分别洗脱4～5BV，弃去，然后用70％乙醇洗脱10BV，收集70％乙醇洗脱液。优选地，所述(3)转化步骤，首先将所述70％乙醇洗脱液浓缩至丹酚酸B和紫草酸总量浓度为10.0～16.0mg/ml的溶液，再加盐酸或硫酸调PH值为3～6，加热回流16～20小时。优选地，所述(3)转化步骤中所述丹酚酸B和紫草酸总量最佳浓度为12.5mg/ml，所述PH值最佳为4.0，最佳加热回流18个小时。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种丹酚酸A的制备方法，包括(1)提取步骤、(2)过大孔吸附树脂柱的粗分离步骤、(3)转化步骤、(4)精制步骤、(5)萃取步骤、(6)干燥步骤，其特征在于所述的(4)精制步骤是采用中高压柱色谱对丹酚酸A进行精制纯化，中高压色谱的填料为ODS C18，填料粒径为10～40um，压力10～25bar。

【技术特征摘要】
1.一种丹酚酸A的制备方法，包括(1)提取步骤、(2)过大孔吸附树脂柱的粗分离步骤、(3)转化步骤、(4)精制步骤、(5)萃取步骤、(6)干燥步骤，其特征在于所述的(4)精制步骤是采用中高压柱色谱对丹酚酸A进行精制纯化，中高压色谱的填料为ODSC18，填料粒径为10～40um，压力10～25bar。2.根据权利要求1的方法，其特征在于所述(4)精制步骤中洗脱溶剂为甲醇-磷酸水或乙醇-磷酸水的一种，所述甲醇-磷酸水或乙醇-磷酸水的体积比为15:85～25:75，其中所述磷酸水中磷酸的质量百分比为0.1％～0.4％。3.根据权利要求1的方法，其特征在于所述(4)精制步骤中，填料粒径为20um。4.根据权利要求1的方法，其特征在于所述(4)精制步骤中，上样溶液的丹酚酸A浓度为1.10mg/ml～1.50mg/ml的溶液。5.根据权利要求1、2、3或4的方法，其特征在于所述(1)提取步骤中，使用的提取溶剂选自水、甲醇、乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。6.根据权利要求1、2、3或4的方法，其特征在于所述(2)过大孔吸附树脂柱的粗分离步骤选用的大孔吸附树脂为LK02或LKY134或D101中的一种，上样速度为1BV/h，上样量为18.0～25.0ml/g大孔吸附树脂，用水和10％乙醇水分别洗脱4～5BV，弃去，然后用70％乙醇洗脱10BV，收集70％乙醇洗脱液。7.根据权利要求6的方法，其特征在于所述(3)转化步骤，首先将所述70％乙醇洗脱液浓缩至丹酚酸B和紫草酸总量浓度为10.0～16.0mg/ml的溶液，再加盐酸或硫酸调PH值为3～6，加热回流16～20小时。8.根据权利要求7的方法，其特征在于所述(3)转化步骤中所述丹酚酸B...

【专利技术属性】
技术研发人员：李东，关秀伟，徐桂玲，宗梁，张纲，李志刚，
申请(专利权)人：京津冀联创药物研究北京有限公司，神威药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11