一种基于蓝绿光组合增强光源的甘草培养方法技术

本发明专利技术提供一种基于蓝绿光组合增强光源的甘草培养方法，其以MS培养基为基础培养基，调整了培养基中激素配方和添加了稀土元素，并在增值培养当中添加蓝色和绿色增强颜色光源，极大地提高了甘草愈伤组织的增值量，本发明专利技术具有增值系数高的优点。

Glycyrrhiza cultivation method based on blue green combined enhanced light source

The present invention provides a combination of blue and green light of the cultivation of licorice based method, it takes MS as basic medium, the culture medium formulation adjustment of hormone and adding rare earth elements, and add value in training of blue and green color enhancement of light source, greatly improve the high value-added amount of callus. The invention has the advantages of high value-added coefficient.

【技术实现步骤摘要】
一种基于蓝绿光组合增强光源的甘草培养方法
本专利技术属于甘草组织培养
，尤其涉及一种基于蓝绿光组合增强光源的甘草培养方法。
技术介绍
甘草，（学名：GlycyrrhizauralensisFisch）别名：国老、甜草、乌拉尔甘草、甜根子。豆科、甘草属多年生草本，根与根状茎粗壮，是一种补益中草药。对人体很好的一种药，药用部位是根及根茎，药材性状根呈圆柱形，长25～100厘米，直径0.6～3.5厘米。外皮松紧不一，表面红棕色或灰棕色。根茎呈圆柱形，表面有芽痕，断面中部有髓。气微，味甜而特殊。功能主治清热解毒、祛痰止咳、脘腹等。喜阴暗潮湿，日照长气温低的干燥气候。甘草多生长在干旱、半干旱的荒漠草原、沙漠边缘和黄土丘陵地带。根和根状茎供药用。传统的甘草获取方法是采挖叶生植物资源，造成水土流失和严重土壤沙漠化。另外，甘草种子主要来自野生甘草，其品种混杂，种子稀缺，发芽率极低，野生资源不适应规模化和标准化生产的需要。同时由于人们破坏性地对叶生甘草采挖，使野生植物几乎灭绝，对甘草的保护性利用迫在眉睫，但由于甘草种植发芽率不高和人们对其此生代谢物的需求，从而使甘草的组织培养对研究和生产具有重要作用，然而目前的甘草组织培养增值方法增长系数较低。稀土元素是17种特殊的元素的统称，它的得名是因为瑞典科学家在提取稀土元素时应用了稀土化合物，所以得名稀土元素。然而稀土是历史遗留下来的名称，稀土是从18世纪末开始陆续发现，当时人们常把不溶于水的固体氧化物称为土，例如，将氧化铝称为“陶土”，氧化钙称为”碱土“等。稀土一般是以氧化物状态分离出来的，当时比较稀少，因而得名为稀土（RareEarth，简称RE或R），然而经过大量的科学研究，在组织培养当中添加了稀土元素会大大地提高组织培养的质量。铈是周期系第ΙΙΙ族副族镧系元素，一种稀土元素。原子序数58。稳定同位素：136、138、140、142。灰色金属，有展性。密度：正方晶体6.9，立方晶体6.7。熔点799℃，沸点3426℃。铈是一种银灰色的活泼金属，粉末在空气中易自燃，易溶于酸。铈的名称来源于小行星谷神星的英文名。铈在地壳中的含量约0.0046%，是稀土元素中丰度最高的。
技术实现思路
基于现有技术存在上述问题，本专利技术提供一种基于蓝绿光组合增强光源的甘草培养方法，其以MS培养基为基础培养基，调整了培养基中激素配方和添加了稀土元素，并在增值培养当中添加蓝色和绿色增强颜色光源，极大地提高了甘草愈伤组织的增值量，本专利技术具有增值系数高的优点。一种含噻苯隆的甘草增殖培养基筛选方法，其包括以下步骤：步骤S10，按以下配方配制培养基：以MS培养基为基础培养基，添加TDZ（噻苯隆）的浓度为0.06mg/L、NAA（萘乙酸）的浓度为2.5mg/L、活性炭的浓度为0.15mg/L、硝酸铈的浓度为3g/L，维生素C的浓度为0.3mg/L，琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L；步骤S20，选择生长正常和健康的甘草愈伤组织，在超净工作台中将愈伤组织非正常部分切除，将愈伤组织用手术刀切割成体积为0.4-0.6cm3的大小，并接种到装有步骤S10配制好的培养基的组培瓶中，并转移到组培室中；步骤S30，将组培室中的环境温度调整为26℃～27℃，黑暗培养4日后，使用白光、蓝光增强光源和绿光增强光源照射愈伤组织，光照时间为光照16小时/黑暗8小时，光照强度为4000-4500lux。其中，所述的步骤S10中还包括步骤S11，对培养基进行121℃的高温蒸汽灭菌20分钟。其中，所述的步骤S30中的增强光源是LED灯，绿色增强光源是绿色LED灯，蓝色增强光源蓝色LED灯。其中，所述的步骤S50中的绿色光源是波段为570nm的绿光，蓝色光源是波段为460nm的蓝光。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的描述。一种含噻苯隆的甘草增殖培养基筛选方法，其包括以下步骤：步骤S10，按以下配方配制培养基：以MS培养基为基础培养基，添加TDZ（噻苯隆）的浓度为0.06mg/L、NAA（萘乙酸）的浓度为2.5mg/L、活性炭的浓度为0.15mg/L、硝酸铈的浓度为3g/L，维生素C的浓度为0.3mg/L，琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L；步骤S20，选择生长正常和健康的甘草愈伤组织，在超净工作台中将愈伤组织非正常部分切除，将愈伤组织用手术刀切割成体积为0.4-0.6cm3的大小，并接种到装有步骤S10配制好的培养基的组培瓶中，并转移到组培室中；步骤S30，将组培室中的环境温度调整为26℃～27℃，黑暗培养4日后，使用白光、蓝光增强光源和绿光增强光源照射愈伤组织，光照时间为光照16小时/黑暗8小时，光照强度为4000-4500lux。作为优选实施例，所述的步骤S10中还包括步骤S11，对培养基进行121℃的高温蒸汽灭菌20分钟。作为优选实施例，所述的步骤S30中的增强光源是LED灯，绿色增强光源是绿色LED灯，蓝色增强光源蓝色LED灯。作为优选实施例，所述的步骤S50中的绿色光源是波段为550nm-580nm的绿光，蓝色光源是波段为450nm-470nm的蓝光；将已经切割好的甘草愈伤组织接种到步骤S10配制好的培养基中使用本专利技术提供的组织培养方法，20天后计算甘草愈伤组织的增值系数为4.32，高于常规培养方法，增值系数的计算方法是培养后愈伤组织的质量除以培养前愈伤组织的质量。以上所述实施例仅表达了本专利技术的一种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本专利技术专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本专利技术的保护范围。因此，本专利技术专利的保护范围应以所附权利要求为准。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含噻苯隆的甘草增殖培养基筛选方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤S10，按以下配方配制培养基：以MS培养基为基础培养基，添加TDZ（噻苯隆）的浓度为0.06mg/L、NAA（萘乙酸）的浓度为2.5 mg/L、活性炭的浓度为0.15 mg/L、硝酸铈的浓度为3g/L，维生素C的浓度为0.3mg/L，琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L；步骤S20，选择生长正常和健康的甘草愈伤组织，在超净工作台中将愈伤组织非正常部分切除，将愈伤组织用手术刀切割成体积为0.4‑0.6cm

【技术特征摘要】
1.一种含噻苯隆的甘草增殖培养基筛选方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤S10，按以下配方配制培养基：以MS培养基为基础培养基，添加TDZ（噻苯隆）的浓度为0.06mg/L、NAA（萘乙酸）的浓度为2.5mg/L、活性炭的浓度为0.15mg/L、硝酸铈的浓度为3g/L，维生素C的浓度为0.3mg/L，琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L；步骤S20，选择生长正常和健康的甘草愈伤组织，在超净工作台中将愈伤组织非正常部分切除，将愈伤组织用手术刀切割成体积为0.4-0.6cm3的大小，并接种到装有步骤S10配制好的培养基的组培瓶中，并转移到组培室中；步骤S30，将组培室中的环境温度调整为26℃～27℃，黑暗培养4日后...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：陈志育，
类型：发明
国别省市：广东,44