一种用于预防或治疗急性及慢性血栓的方法技术

本发明专利技术涉及纤溶酶原在溶解新鲜和陈旧血栓方面的作用。与现有其它溶解血栓的药物相比，本发明专利技术纤溶酶原可特异性溶解血栓而不会造成出血等副作用。本发明专利技术的药物还具有可溶解新鲜和陈旧血栓且具有半衰期长和溶血栓强度可控的优势，因此，纤溶酶原可能成为全新的溶解体内血栓的策略。

A method for the prevention or treatment of acute and chronic thrombosis

The present invention relates to the action of plasminogen in the dissolution of fresh and old thrombus. Compared with other existing thrombolytic drugs, the invention of plasminogen can specifically dissolve thrombus without causing side effects such as bleeding. The medicine also has the advantages of soluble, fresh and old thrombus, long half-life and controllable thrombus strength, so plasminogen may be a new strategy for dissolving thrombus in vivo.

【技术实现步骤摘要】
一种用于预防或治疗急性及慢性血栓的方法
本专利技术涉及一种新的使用纤溶酶原预防和/或治疗血栓的方法。纤溶酶原可特异性溶解血栓而不会造成出血等副作用。本专利技术的药物还具有可溶解新鲜和陈旧血栓且具有半衰期长和溶血栓强度可控的优势，因此，纤溶酶原可能成为全新的溶解体内血栓的策略。
技术介绍
血栓的形成及危害血栓是指人体或动物在存活期间因某些诱因，血液有形成分在循环血中异常发生的血凝块，或者在心脏内壁或血管壁上发生的血液沉积物。其包括心肌梗死、脑栓塞、肺血栓、深部静脉血栓和周围血管栓塞等，是严重危害人类健康的疾病，其发病率、致残率、致死率都很高。据世界卫生组织统计，世界上每年死于血栓塞疾病的人数约为2600万，远高于其他死亡原因，成为危害人类健康头号敌人[1]。纤溶酶是纤溶酶原激活系统(PA系统)的关键组分。它是一种广谱的蛋白酶，能够水解细胞外基质(ECM)的几个组分，包括纤维蛋白、明胶、纤连蛋白、层粘连蛋白和蛋白聚糖[2]。此外，纤溶酶能将一些金属蛋白酶前体(pro-MMP)激活形成具有活性的金属蛋白酶(MMP)。因此纤溶酶被认为是胞外蛋白水解作用的一个重要的上游调节物[3,4]。纤溶酶是由纤溶酶原通过两种生理性的PA：组织型纤溶酶原激活剂(tPA)或尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)蛋白水解形成的。由于纤溶酶原在血浆和其他体液中相对水平较高，传统上认为PA系统的调节主要通过PA的合成和活性水平实现。PA系统组分的合成受不同因素严格调节，如激素、生长因子和细胞因子。此外，还存在纤溶酶和PA的特定生理抑制剂。纤溶酶的主要抑制剂是α2-抗纤溶酶(α2-antiplasmin)。某些细胞表面具有直接水解活性的uPA特异性细胞表面受体(uPAR)[5,6]。纤溶酶原(plasminogen，plg)是一个单链糖蛋白，分子量约为92kDa[7,8]。纤溶酶原主要在肝脏合成，大量存在于胞外液中。血浆中纤溶酶原含量约为2μM。因此纤溶酶原是组织和体液中蛋白质水解活性的一个巨大的潜在来源[9,10]。纤溶酶原存在两种分子形式：谷氨酸-纤溶酶原(Glu-plasminogen)和赖氨酸-纤溶酶原(Lys-plasminogen)。天然分泌和未裂解形式的纤溶酶原具有一个氨基末端(N-末端)谷氨酸，因此被称为谷氨酸-纤溶酶原。然而，在纤溶酶存在时，谷氨酸-纤溶酶原在Lys76-Lys77处水解成为赖氨酸-纤溶酶原。与谷氨酸-纤溶酶原相比，赖氨酸-纤溶酶原与纤维蛋白具有更高的亲和力，并可以更高的速率被PA激活。这两种形式的纤溶酶原的Arg560-Val561肽键可被uPA或tPA切割，导致二硫键连接的双链蛋白酶纤溶酶的形成[11]。纤溶酶原的氨基末端部分包含五个同源三环，即所谓的kringle，羧基末端部分包含蛋白酶结构域。一些kringle含有介导纤溶酶原与纤维蛋白及其抑制剂α2-AP特异性相互作用的赖氨酸结合位点。最新发现一个为38kDa的纤溶酶原片段，其中包括kringle1-4，是血管生成的有效抑制剂。这个片段被命名为血管抑素，可通过几个蛋白酶水解纤溶酶原产生。纤溶酶的主要底物是纤维蛋白，纤维蛋白的溶解是预防病理性血栓形成的关键[12]。纤溶酶还具有对ECM几个组分的底物特异性，包括层粘连蛋白、纤连蛋白、蛋白聚糖和明胶，表明纤溶酶在ECM重建中也起着重要作用[8,13,14]。间接地，纤溶酶还可以通过将某些蛋白酶前体转化为活性蛋白酶来降解ECM的其他组分，包括MMP-1、MMP-2、MMP-3和MMP-9。因此，有人提出，纤溶酶可能是细胞外蛋白水解的一个重要的上游调节器[15]。此外，纤溶酶具有激活某些潜在形式的生长因子的能力[16-18]。在体外，纤溶酶还能水解补体系统的组分并释放趋化补体片段。现有溶血栓治疗方法目前减少血栓的相关药物治疗是常见的非手术治疗方法包括溶栓疗法、抗凝疗法、抗血小板药物和血管扩张药物。现在最常用最有效的方法就是采用溶栓疗法，常用的溶血栓药物有三代：第一代以链激酶(SK)和尿激酶(UK)为代表，溶栓能力强，但没有溶栓特异性，容易出现全身溶栓亢进而导致出血[19,20]。第二代以组织型纤溶酶原激活剂tPA为代表，其溶栓作用优于SK、UK，但在体内半衰期短[21]。第三代以基因工程技术，单克隆技术对第一代，第二代药物进行改造，但基本都在试验阶段。这些药物都基于增加纤溶平衡中的激活剂，产生纤溶酶(Plm)促进纤溶，从而达到溶栓目的[22]。目前已批准的溶栓药物分为两类：绝大多数溶栓药物使用的是纤溶酶原激活剂，包括天然和不同重组形式的tPA、uPA，以及链激酶(streptokinase)。纤溶酶原激活剂自身不能溶解血栓，必须将血栓附近的纤溶酶原分子激活成活性的纤溶酶后才能进行溶栓作用。最近几年，活性纤溶酶获得批准用于直接局部溶栓，具体方法是将导管通到血栓部位的情况下局部释放活性纤溶酶从而直接溶栓。纤溶酶原(plg)是纤溶酶(Plm)的非活性形式，传统上认为其在体内是过量和惰性的，机体的溶解血栓过程只有通过纤溶酶原在其激活剂的作用下激活为有活性的纤溶酶，活性纤溶酶进而行使溶解纤维蛋白血凝块(fibrinclot)的功能。传统上认为纤溶酶原本身不起溶解血栓的作用。然而，本专利技术惊奇地发现天然纤溶酶原具有良好的溶解新鲜和陈旧血栓的功能，且具有安全性好，溶解血栓强度便于调节，特异性好等优点。本专利技术的溶栓机理与目前已知的溶栓策略完全不同。现有技术溶解血栓的方法是通过增加溶栓反应的催化剂，即纤溶酶原激活剂，包括tPA、uPA、链激酶及其衍生物或者溶栓反应的产物，即活性纤溶酶来实现。本专利技术溶解血栓的方法是通过调节溶栓反应的底物纤溶酶原的策略来实现的。相对于现有技术中的溶栓药物，本专利技术的纤溶酶原溶栓至少具备以下优点。1.良好的溶栓效果外周动脉堵塞(peripheralarterialocclusion,PAO)和深静脉血栓(deepveinthrombosis,DVT)的情况下形成的长的血栓和逐步收缩的陈旧血栓，现有技术的溶栓药物效果较差[23-25]，而本专利技术使用纤溶酶原或者纤溶酶原与PA的组合，对上述血栓实现了良好的溶栓效果。因此，本专利技术可以有效解决tPA,uPA的上述问题。2.半衰期长目前的溶栓物质一个重要特点是体内半衰期过短，如天然uPA的体内半衰期为5-10分钟，天然tPA的体内半衰期为3-5分钟，天然纤溶酶的体内半衰期更是极为短暂。即使目前通过基因工程改造以图延长这些物质的半衰期，但是效果并不理想，半衰期过短仍然极大地限制了这些物质的应用。然而，纤溶酶原的体内半衰期长达53小时，这说明使用纤溶酶原或者纤溶酶原与PA的组合，均能显著的延长体内溶血栓的作用期，达到持续、稳定溶栓的目的。3.更具温和性和可调控性对于活性纤溶酶来讲，由于其是一个高活性的蛋白酶，因此通过使用活性纤溶酶来溶栓必须是一个非常快速的反应过程，从而导致目前的使用中必须通过导管直接引到血栓部位。对于纤溶酶原激活剂来讲，由于其在溶栓反应中处于催化剂的位置，添加少量的纤溶酶原激活剂会在很短时间里迅速形成大量活性纤溶酶，是一个剧烈的酶反应过程。然而，本专利技术实验证明通过调节溶栓反应的底物纤溶酶原溶解血栓的过程更温和，而且，通过不同纤溶酶原使用量本文档来自技高网...

【技术保护点】
纤溶酶原在制备预防和/或消除受试者动、静脉血栓的药物中的用途。

【技术特征摘要】
2015.12.18 CN 20151096075651.纤溶酶原在制备预防和/或消除受试者动、静脉血栓的药物中的用途。2.根据权利要求1的用途，其中所述血栓包括新鲜血栓和陈旧血栓。3.权利要求1或2的用途，其中所述血栓为血液系统疾病、循环系统疾病、自身免疫疾病、代谢紊乱疾病或感染性疾病导致的血栓。4.权利要求1-3任一项的用途，其中所述血栓为继发于糖尿病的大、小血管、微血管血栓。5.权利要求1-4任一项的用途，其中所述血栓为大小血管病变导致的血栓。6.纤溶酶原在制备预防和/或治疗受试者血栓相关疾病的药物中的用途，其中所述纤溶酶原通过消除血栓预防和/或治疗受试者所述血栓相关疾病。7.根据权利要求6的用途，其中所述血栓...

【专利技术属性】
技术研发人员：李季男，
申请(专利权)人：深圳瑞健生命科学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44