人GLP-1模拟体、组合物、方法和用途技术

本发明专利技术涉及至少一种新的人ＧＬＰ－１模拟体或特定部分或变体，包括编码至少一种ＧＬＰ－１模拟体或特定部分或变体的分离核酸、ＧＬＰ－１模拟体或特定部分或变体、载体、宿主细胞、转基因动物或植物，及其制备和使用方法，包括治疗组合物、方法和装置。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】人GLP-l才莫拟体、组合物、方法和用途
技术介绍
专利
本专利技术涉及对有生物活性的蛋白、片段或配体具有特异性的哺乳动物GLP - 1模拟体(mimetibody )、特定部分或变体，GLP - 1模拟体编 码核酸和互补核酸、宿主细胞，及其制备和使用方法，包括治疗制剂、 施用和装置。
技术介绍
重组蛋白是一类新兴的治疗剂。这种重组体疗法在蛋白质制剂和化 学修饰方面已取得了进展。这种修饰可潜在地增强治疗性蛋白质的治疗 效用，例如通过延长半衰期(例如，通过阻碍其暴露于蛋白水解酶)， 增强生物活性或减少有害副作用。 一种这样的修饰是利用被融合至受体 蛋白，如enteracept的免疫球蛋白片段。人们也曾利用Fc区构建治疗性 蛋白质，试图提供较长的半衰期或整合诸如Fc受体结合、A蛋白结合 和补体结合的功能。糖尿病是一种正在发展的流行病，到2025年其估计感染超过3亿 人，还没有有效的药物治疗方法。2型糖尿病占所有病例的90 - 95%。 持续提高的血糖水平导致的并发症包括心血管病、肾病、神经病和浮见网 膜病。另外，在2型糖尿病的后期，胰脏的p-细胞死亡，因此停止分 泌胰岛素。现在对于糖尿病的治疗与各种各样的副作用相联系，所述的 副作用包括低血糖和体重增加。另外，现在对于2型糖尿病的治疗不能 治愈疾病，而是筒单地延长时间直到病人需要胰岛素疗法为止。胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)是一种在口服葡萄糖刺激之后由肠 L -细胞分泌的含有37个氨基酸的肽。随后在第6位和第7位之间的内 源性裂解产生了有生物活性的GLP - 1 (7-37)肽。GLP - 1 (7-37) 肽序列可以分为两个结构域。肽的氨基酸末端结构域参与信号活动，而 肽的其余部分看来似乎以螺旋构象与GLP- 1受体胞外环结合。对葡萄 糖作出应答，活性GLP- 1与胰脏的GLP - 1受体结合，并导致胰岛素 分泌的增加(促胰岛素活性)。另外，已经证明GLP-1减少胃排空'其减少释放到循环中的葡萄糖的量，并可能减少食物摄入。这些作用组 合起来就降低了血糖水平。也已经证明GLP- 1抑制细胞凋亡，促进胰脏中-细胞的增殖。因此，GLP-1是糖尿病患者降低血糖和保护胰脏 -细胞的有吸引力的治疗剂。另夕卜，GLP-1的活性受血糖水平的控制。 当血糖水平降低到某一阈值水平时，GLP-1无活性。因此，没有发生 与GLP - 1治疗相关的低血糖症的危险。临床上已经证明了 GLP - 1治疗的可行性。六周的GLP - 1注射有 效地降低了 2型糖尿病患者空腹血糖水平和8小时平均血糖水平。GLP -1治疗也导致e -细胞功能的改善。目前在临床试—验中Exenatide是一 种GLP - 1类似物。首先在希拉毒蜥(gila monster)唾液中鉴定出 Exenatide,其与GLP - 1有53%的同源性。Exenatide能结合GLP - 1受 体，并起始由GLP-1 (7-37)引起的负责多种活性的信号传导级联。 迄今为止，其已被证实能降低2型糖尿病患者的HbAlc水平和血清果糖 胺水平。另外，其抑制健康受检志愿者的胃排空，并且抑制他们的食物 摄入。但是，GLP-1在体内被蛋白酶二肽基肽酶IV (DPP-IV)所迅速 失活。因此，涉及GLP-1肽的治疗的用途受到了它们的迅速清除和短 半衰期的限制。例如，GLP-1(7-37)的血清半衰期仅仅为3-5分钟。 当皮下给药时，GLP-1 (7-36)酰胺的作用时间为约50分钟。甚至抗 内源性蛋白酶裂解的类似物和衍生物也没有足够长的半衰期以避免在 24小时的时间段中重复给药。例如，Exenatide抗DPP-IV,然而由于 其在体内药物动力学中的短半衰期和显著的变异性，仍然需要每日两次 餐前定量给药。在临床试验普遍使用的另一种化合物NN2211,是一种 富含脂质的GLP - 1类似物。它被认为能每日一次定量给药。当需要在长时间内维持治疗剂的高血液水平时，治疗剂的迅速清除 是不方便的，因为必需重复给药。此外，长效化合物对于过去的治疗方 案只包括口服药物的糖尿病患者特别重要。这些患者通常对于包括多次 药物注射的方案具有极为困难的时间过渡。具有增长的半衰期的GLP-1治疗相对其它开发中的GLP - 1肽和化合物而言具有明显的优势。因此，需要提供GLP-1治疗性蛋白质的改良和/或修饰型，以克服 上述一个或多个难题，以及本领域已知的其它难题。^t拟体技术为肽疗 法提供了新的递送平台。GLP-1模拟体就可以提供以持续的方式来递送GLP- 1肽的方法，提供了对目前开发中的GLP- 1肽进行的改进。 此外，基于其二聚体结构和组织分布特性，GLP-1模拟体对于胰岛素 分泌、(3 -细胞保存和食物摄入有可辨的特征。专利技术概述如此处所描述和/或实现的内容，并结合本领域所已知的内容，本发 明提供了人GLP - 1模拟体，包括修饰的免疫球蛋白、裂解产物和其它 特定部分及其变体，也提供了 GLP-l模拟体组合物、编码或互补核酸、 载体、宿主细胞、组合物、制剂、装置、转基因动物、转基因植物，及 其制备和应用方法。本专利技术也提供了如此处所描述和/或本领域已知的至少 一 种分离 GLP - 1模拟体或特定部分或变体。该GLP- 1模拟体可任选地包含至少 一个CH3区，该CH3区与至少一个CH2区直>|妻相连，该CH2区与至少 一个铰链区或其片段(H)直接相连，该铰链区或其片段与至少一个部 分可变区(V)直接相连，该部分可变区与任意接头序列(L)直接相连， 该接头序列与至少一个GLP-1治疗性肽(P)直接相连。在一对CH3 - CH2 -铰链-部分V区序列-接头-治疗性肽序列的 一种优选实施方案中，该对序列任选地通过締合或共价键连接，例如， 但不仅限于至少一个Cys - Cys 二硫键连接或至少一个CH4或其它免疫 球蛋白序列。 一种实施方案中，GLP-1模拟体包括式(I): a. (P(n) - L(o) - V(p) - H(q) - CH2(r) - CH3(s))(t), 其中P为至少一个具有生物活性的GLP-1肽、变体或衍生物，L为至 少一个接头序列，其可以是通过使模拟体具有可选取向和结合特性，从 而提供了结构柔性的多肽，V为免疫球蛋白可变区C-末端的至少一个 部分，H为免疫球蛋白可变铰链区的至少一个部分，CH2为免疫球蛋白 CH2恒定区的至少一个部分，CH3为免疫球蛋白CH3恒定区的至少一 个部分，n为1 - 10的整lt， o、 p、 q、 r、 s和t可独立地为0-10的整 数，模拟不同类型的免疫球蛋白分子，例如，但不仅限于IgGl、 IgG2、 IgG3、 IgG4、 IgAl、 IgA2、 IgM、 IgD、 IgE等，或其亚类等，或其组合。抗体序列的可变区可以是，但不仅限于SEQIDNO: 47 - 55中至少 一种氨基酸序列的至少一个部分，或者如表l所示的其片段，进一步可 选4奪地包含如PCT/^开文本WO 05/05604 ( PCT US04/19898 )图1 - 9所示的相应的SEQIDNO: 1-9的至少一个置换、插入或缺失，该申请 在2004年6月24日递交，在2005年1月20日公开。CH2区、CH3区 和铰链区可本文档来自技高网...

【技术保护点】
至少一种ＧＬＰ－１ＣＨ１缺失模拟体核酸，包含编码ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２或４的氨基酸序列的至少一种多核苷酸，或与其互补的多核苷酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：KT奥奈尔，K皮查，
申请(专利权)人：森托科尔公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]