抗Orai1抗体制造技术

本发明专利技术的目的是提供用于移植排斥、免疫疾病、变应性疾病、炎性疾病、血栓、癌症等的治疗和/或预防剂，所述药剂靶向人Orai1。提供包含具有特异性识别人Orai1并抑制人T细胞活化的活性的抗体的药物组合物等。

Anti Orai1 antibody

The object of the present invention is to provide a therapeutic and / or prophylactic agent for transplant rejection, immune diseases, allergic diseases, inflammatory diseases, thrombosis, cancer, etc. the medicament targets Orai1. A pharmaceutical composition is provided that contains antibodies that specifically recognize human Orai1 and inhibit the activity of human T cell activation.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗Orai1抗体
本专利技术涉及提供用于治疗病症或疾病的更高度活性的抗Orai1抗体。
技术介绍
钙释放活化的钙（CRAC）通道是钙库操纵性钙通道(store-operatedchannels,SOC)的子集，所述钙库操纵性钙通道响应于胞内内质网中储存的钙的消耗而打开，且响应于胞外钙进入特定的非可兴奋性细胞，具体而言，免疫系统的细胞包括T细胞和肥大细胞，和细胞因此的活化。CRAC通道活性的抑制剂是本领域已知的，且其鉴定和治疗潜能已由Feske等人描述（非专利文献1和2）。Orail（CRACM1：钙释放活化的钙调节子1，跨膜蛋白142A：TMEM142A），是由301个氨基酸残基构成的4次跨膜蛋白，已经被鉴定为通过形成同四聚体而构成CARC通道的孔形成亚基的组分（专利文献1和非专利文献3-5）。Orai基因家族包括人Orai1基因以及人Orai2和人Orai3基因，其各自与人Orai1基因具有90%或更高的同源性（非专利文献6）。在一些情况下，形成包含Orai2和/或Orai3蛋白和Orai1的异四聚体或异六聚体的可能性也已经被报道（非专利文献7和8）。Orai1由以下构成：偶联STIM-1（基质相互作用分子1）或STIM-2（其为感受胞内内质网中储存的钙的消耗的蛋白）的N末端和C末端胞质区、和4个跨膜结构域、由大约20个氨基酸残基构成的第一胞外环结构域、和由大约40个氨基酸残基构成的第二胞外环结构域（非专利文献9）。Orai1的DNA序列和氨基酸序列可获自公共数据库并且可以指定在例如登录号NM_032790和NP_116179(NCBI)下。已经发现人Orai1基因功能的先天性缺陷消除了CRAC通道活性并取消了机体对免疫原的应答，导致严重的免疫缺陷病况。因此，Orai1的分子功能已证实对于活化CRAC通道是必需的（非专利文献10和11）。因此，靶向Orai1分子的功能阻断性抗体可以用作CRAC通道活性的抑制剂。在暗示CRAC通道活性抑制剂可以用于治疗患有免疫疾病、变应性疾病、炎性疾病、细胞或器官的移植、血栓形成、癌症等的患者这一信息（非专利文献12）的教导下，已经尝试获得目标在于抑制Orai1的分子功能的抗Orai1抗体，并且已经研究了它们的作用（非专利文献2和3以及专利文献13和14）。尽管该文献表明每一抗体单独抑制T细胞的活化，但抑制活性仍不是足够强。这些抗体作为靶向Orai1的生物制剂的临床应用可能无法满足在需要高剂量或频繁施用、受限的施用方法等方面的临床需要。引用列表专利文献专利文献1：国际申请号WO07/081804专利文献2：国际申请号WO11/063277专利文献3：国际申请号WO13/091903非专利文献非专利文献1：FeskeS,NatureRev.Immunol.7,第690-702页(2007)非专利文献2：DerlerI,等人,ExpertOpin.DrugDiscovery3(7),第787-800页(2008)非专利文献3：PrakriyaM,等人,Nature443,第230-233页(2006)非专利文献4：VigM,等人,Science312,第1220-1223页(2006)非专利文献5：ParkCY,等人,Cell136,第876-890页(2008)非专利文献6：MercerJC,等人,J.Biol.Chem.281,第24979-24990页(2006)非专利文献7：GwackY,等人,J.Biol.Chem.282,第16232-16243页(2007)非专利文献8：HouX,等人,Science338,第1308-1313页(2012)非专利文献9：VigM,等人,Curr.Biol.16,第2073-2079页(2006)非专利文献10：FeskeS,Nature441,第179-185页(2006)非专利文献11：McCarlCA,等人,J.AllergyClin.Immunol.124,第1311-1318页(2009)非专利文献12：McCarlCA,等人,J.Immunol.185,第5845-5858页(2010)非专利文献13：LinF,等人,J.Pharmacol.Exp.Ther.345,第225-238页(2013)非专利文献14：CoxJH,等人,PLOSONE8(12),e82944(2013)。专利技术概述技术问题本专利技术的目标是提供用于移植排斥、免疫疾病、变应性疾病、炎性疾病、血栓形成、癌症等的治疗和/或预防剂。问题的解决方案本专利技术人出于搜寻对移植排斥、免疫疾病、变应性疾病、炎性疾病、血栓形成或癌症具有治疗和/或预防作用的物质的目的，已经获得大鼠抗Orai1抗体。所获得的大鼠抗Orai1抗体已经人源化，并且已经工程化该人源化抗体的CDR、框架和可变区。以这种方式，完成了本专利技术。具体而言，本专利技术包括以下方面：（1）抗体或抗体的抗原结合片段，其特异性结合由SEQIDNO:2代表的氨基酸序列，其中重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，CDRH2由SEQIDNO:104、106、107和108中任一种代表的氨基酸序列组成，和CDRH3由SEQIDNO:109或110代表的氨基酸序列组成；和轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中CDRL1由SEQIDNO:93、94和95中任一种代表的氨基酸序列组成，CDRL2由SEQIDNO:96、97和98中任一种代表的氨基酸序列组成，和CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。（2）根据（1）的抗体或抗体的抗原结合片段，其中重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，CDRH2由SEQIDNO:106代表的氨基酸序列组成，和CDRH3由SEQIDNO:110代表的氨基酸序列组成；和轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中CDRL1由SEQIDNO:93代表的氨基酸序列组成，CDRL2由SEQIDNO:96代表的氨基酸序列组成，和CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。（3）根据（1）的抗体或抗体的抗原结合片段，其中重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，CDRH2由SEQIDNO:106代表的氨基酸序列组成，和CDRH3由SEQIDNO:110代表的氨基酸序列组成；和轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中CDRL1由SEQIDNO:94代表的氨基酸序列组成，CDRL2由SEQIDNO:97代表的氨基酸序列组成，和CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。（4）根据（1）的抗体或抗体的抗原结合片段，其中重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，CDRH2由SEQIDNO:106代表的氨基酸序列组成，和CDRH3由SEQIDNO:110代表的氨基酸序列组成；和轻链本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗体或抗体的抗原结合片段，其特异性结合由SEQ ID NO: 2代表的氨基酸序列，其中重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中所述CDRH1由SEQ ID NO: 102代表的氨基酸序列组成，所述CDRH2由SEQ ID NO: 104、106、107和108中任一种代表的氨基酸序列组成，和所述CDRH3由SEQ ID NO: 109或110代表的氨基酸序列组成；和轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中所述CDRL1由SEQ ID NO: 93、94和95中任一种代表的氨基酸序列组成，所述CDRL2由SEQ ID NO: 96、97和98中任一种代表的氨基酸序列组成，和所述CDRL3由SEQ ID NO: 101代表的氨基酸序列组成。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.08.07 JP 2014-1614491.抗体或抗体的抗原结合片段，其特异性结合由SEQIDNO:2代表的氨基酸序列，其中重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中所述CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，所述CDRH2由SEQIDNO:104、106、107和108中任一种代表的氨基酸序列组成，和所述CDRH3由SEQIDNO:109或110代表的氨基酸序列组成；和轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中所述CDRL1由SEQIDNO:93、94和95中任一种代表的氨基酸序列组成，所述CDRL2由SEQIDNO:96、97和98中任一种代表的氨基酸序列组成，和所述CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。2.权利要求1的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中所述CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，所述CDRH2由SEQIDNO:106代表的氨基酸序列组成，和所述CDRH3由SEQIDNO:110代表的氨基酸序列组成；和所述轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中所述CDRL1由SEQIDNO:93代表的氨基酸序列组成，所述CDRL2由SEQIDNO:96代表的氨基酸序列组成，和所述CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。3.权利要求1的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中所述CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，所述CDRH2由SEQIDNO:106代表的氨基酸序列组成，和所述CDRH3由SEQIDNO:110代表的氨基酸序列组成；和所述轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中所述CDRL1由SEQIDNO:94代表的氨基酸序列组成，所述CDRL2由SEQIDNO:97代表的氨基酸序列组成，和所述CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。4.权利要求1的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中所述CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，所述CDRH2由SEQIDNO:106代表的氨基酸序列组成，和所述CDRH3由SEQIDNO:110代表的氨基酸序列组成；和所述轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中所述CDRL1由SEQIDNO:95代表的氨基酸序列组成，所述CDRL2由SEQIDNO:98代表的氨基酸序列组成，和所述CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。5.权利要求1的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中所述CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，所述CDRH2由SEQIDNO:107代表的氨基酸序列组成，和所述CDRH3由SEQIDNO:110代表的氨基酸序列组成；和所述轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中所述CDRL1由SEQIDNO:93代表的氨基酸序列组成，所述CDRL2由SEQIDNO:96代表的氨基酸序列组成，和所述CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。6.权利要求1的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中所述CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，所述CDRH2由SEQIDNO:108代表的氨基酸序列组成，和所述CDRH3由SEQIDNO:110代表的氨基酸序列组成；和所述轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中所述CDRL1由SEQIDNO:93代表的氨基酸序列组成，所述CDRL2由SEQIDNO:96代表的氨基酸序列组成，和所述CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。7.权利要求1的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述重链序列包含具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可变区，其中所述CDRH1由SEQIDNO:102代表的氨基酸序列组成，所述CDRH2由SEQIDNO:104代表的氨基酸序列组成，和所述CDRH3由SEQIDNO:109代表的氨基酸序列组成；和所述轻链序列包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可变区，其中所述CDRL1由SEQIDNO:93代表的氨基酸序列组成，所述CDRL2由SEQIDNO:96代表的氨基酸序列组成，和所述CDRL3由SEQIDNO:101代表的氨基酸序列组成。8.权利要求1或2的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述抗体包含由来自SEQIDNO:62代表的氨基酸序列中的位置20-136的氨基酸残基组成的重链可变区序列和由来自SEQIDNO:56代表的氨基酸序列中的位置21-126的氨基酸残基组成的轻链可变区序列。9.权利要求8的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述抗体由重链序列和轻链序列组成，所述重链序列由来自SEQIDNO:62代表的氨基酸序列中的位置20-465或20-466的氨基酸残基组成且所述轻链序列由来自SEQIDNO:56代表的氨基酸序列中的位置21-234的氨基酸残基组成。10.权利要求8的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述抗体由重链序列和轻链序列组成，所述重链序列由来自SEQIDNO:70代表的氨基酸序列中的位置20-465或20-466的氨基酸残基组成且所述轻链序列由来自SEQIDNO:56代表的氨基酸序列中的位置21-234的氨基酸残基组成。11.权利要求1或3的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述抗体包含由来自SEQIDNO:62代表的氨基酸序列中的位置20-136的氨基酸残基组成的重链可变区序列和由来自SEQIDNO:58代表的氨基酸序列中的位置21-126的氨基酸残基组成的轻链可变区序列。12.权利要求11的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述抗体由重链序列和轻链序列组成，所述重链序列由来自SEQIDNO:62代表的氨基酸序列中的位置20-465或20-466的氨基酸残基组成且所述轻链序列由来自SEQIDNO:58代表的氨基酸序列中的位置21-234的氨基酸残基组成。13.权利要求1或4的抗体或抗体的抗原结合片段，其中所述抗体包含由来自SEQIDNO:62代表的氨基酸序列中的位置20-136的氨基酸残基组成的重链可...

【专利技术属性】
技术研发人员：驹井知明，木村贵子，马场大地，小野寺宜乡，田中健人，明松隆志，安艺杏梨，长冈信美，
申请(专利权)人：第一三共株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP