The invention relates to a rapid dyeing and decolorization kit PAGE glue protein isolate reactive dyes based on fast dyeing and decolorization can realize the PAGE gel separated proteins, including protein staining and protein destainer. In order to realize the purpose, the invention provides a quick method of PAGE dyeing and decolorization of reactive dyes based on protein gel separation, which comprises the following steps: 1) according to different reactive dyes and protein covalent coupling characteristics of the optimal allocation of protein staining solution; 2) according to different reactive dyes and PAGE glue combined with the characteristics of optimal protein liquid decolorization; 3) conventional PAGE gel electrophoresis after added configured protein staining liquid full contact with PAGE glue, shaking at room temperature slowly oscillating dyeing 2hrs; 4) recovery of the dyeing liquid, using deionized water flushing coagulation PAGE glue to dye liquid outflow; 5) added configured full contact liquid and protein decolorization PAGE glue, shaker at room temperature until at least 5hrs shock decolorization background bands were clear so far off. The utility model has the advantages of high sensitivity, strong specificity and high safety.
【技术实现步骤摘要】
一种基于活性染料的PAGE胶分离蛋白快速染色脱色试剂盒
本专利技术属于生物
一种基于活性染料的PAGE胶分离蛋白快速染色脱色试剂盒,具体包括蛋白染色液和蛋白脱色液。
技术介绍
目前,大部分蛋白质的电泳分析研究方法是基于聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)电泳进行定性和相对定量分析。聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。为了使聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质更好地显示出来,通常使用一些化学染料标记物与蛋白质反应,由于蛋白质分子结构中含有大量的非共价结合位点,通过非共价键的作用固定在蛋白质分子上达到标记显示目的蛋白条带的效果。根据蛋白染色条带的有无可用于蛋白质定性,根据染色亮度可用于蛋白量粗略定量。目前,PAGE胶分离蛋白常采用传统的酸性染料考马斯亮蓝R250/G250等进行染色,可有效地以范德华力形式与蛋白质的碱性基团结合,通过脱色液将PAGE胶的背景色脱掉,最后使待检测蛋白样品以不同大小的分子量显示出来。然而,传统考马斯亮蓝法等染色法存在蛋白条带颜色固定、染色时间久、染色稳定性差、脱色时间较长等缺点。基于此,本专利技术旨在基于活性染料不同色素基团与蛋白质亲核试剂发生共价偶联特性,提供一种新的PAGE胶分离蛋白快速染色脱色试剂盒,通过该试剂盒的蛋白染色液可实现不同色素基团对PAGE胶分离蛋白样品的快速稳定偶联标记,进而通过蛋白脱色液实现快速脱色,最终使待测蛋白样品在PAGE胶上以不同颜色清 ...
【技术保护点】
一种基于活性染料的PAGE胶分离蛋白快速染色及脱色的方法,包括以下步骤:1)根据不同活性染料与蛋白质共价偶联特性配置最优蛋白染色液;2)根据不同活性染料与PAGE胶结合特性配置最优蛋白脱色液;3)常规PAGE胶蛋白电泳后,加入配置好的蛋白染色液与PAEG胶充分接触,摇床室温缓慢震荡染色2hrs;4)回收上述染色液,采用去离子水冲洗PAGE胶至无活性染料液体流出;5)加入配置好的蛋白脱色液与PAGE胶充分接触,摇床室温震荡脱色至少5hrs直至背景脱掉条带清晰为止。
【技术特征摘要】
1.一种基于活性染料的PAGE胶分离蛋白快速染色及脱色的方法,包括以下步骤:1)根据不同活性染料与蛋白质共价偶联特性配置最优蛋白染色液;2)根据不同活性染料与PAGE胶结合特性配置最优蛋白脱色液;3)常规PAGE胶蛋白电泳后,加入配置好的蛋白染色液与PAEG胶充分接触,摇床室温缓慢震荡染色2hrs;4)回收上述染色液,采用去离子水冲洗PAGE胶至无活性染料液体流出;5)加入配置好的蛋白脱色液与PAGE胶充分接触,摇床室温震荡脱色至少5hrs直至背景脱掉条带清晰为止。2.根据权利1所述不同活性染料,可为一氯均三嗪型活性染料、乙烯砜型活性染料、双一氯均三嗪型活性染料、卤代嘧啶型活性染料等适用于蛋白质染色的活性染料,特别是...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴永红,吴敏,张立松,王长振,孙杨东,周奉雪,张展,
申请(专利权)人:苏州泽科生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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