一种同时用于CT/PAT造影和光热治疗的纳米单质铋诊疗剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种同时用作CT/PAT造影和光热治疗的纳米单质铋诊疗剂的制备方法，将疏水性还原性有机溶剂与Bi(NO

Method for preparing nano substance bismuth therapeutic agent used for CT/PAT radiography and photothermal treatment

The present invention discloses a method for preparing nano elemental bismuth therapeutic agent used as CT/PAT contrast and photothermal treatment at the same time. The hydrophobic reductive organic solvent and Bi (NO) are prepared

【技术实现步骤摘要】
一种同时用于CT/PAT造影和光热治疗的纳米单质铋诊疗剂的制备方法
本专利技术属于纳米材料及分子医学
，具体涉及一种纳米单质铋诊疗剂的制备方法。
技术介绍
针对肿瘤患者的治疗，传统三大治疗手段放疗、化疗和手术治疗的局限性越来越明显，如缺乏对病变部位的选择性，创伤大，无法实现个体化治疗等，因此迫切需要开发新型的治疗手段来予以解决。目前光热治疗(photothermaltherapy,PTT)是近年来迅速发展的一种微创肿瘤治疗技术，被认为是一种极具潜力替代手术的肿瘤治疗方法。靶向肿瘤部位的光敏剂在入射光激发下，利用其光热转换效应产生热，可使肿瘤局部温度升高并达到一定温度(42℃以上)，从而实现杀伤肿瘤细胞的作用。由于利用靶向纳米光敏剂的肿瘤靶向传输以及对肿瘤部位选择性的照射，可显著降低全身系统毒性，同时，由于用于激发的近红外光组织穿透能力强，整个治疗过程完全由激光控制，并且可以和影像学手段结合，在给出病变组织影像的同时定点清除病灶，形成了兼具诊断和治疗能力的诊疗一体化载体，引起了肿瘤学治疗领域的广泛关注。靶向性显影一直以来都是CT成像技术的弱项，单纯的有机碘对比剂细胞吞噬量极低，且没有明显选择性，无法实现这一目的。近年来出现无机金属纳米粒子CT造影剂的出现，在一定程度上解决了这个问题。然而，当前金属纳米造影剂普遍存在价格昂贵、制备工艺复杂、生物相容性不足等问题。铋作为一种最便宜的重金属元素，已被广泛应用于临床制剂，如胶态次枸橼酸铋，是一种非常安全可靠的选择。Bi2S3纳米已被证明具有较好的CT成像效果，而本专利技术构建了一种单质铋纳米颗粒，并利用进行了亲水性改造，降低了毒性，具有很好的生物相容性。相较于前期研究，具有明显改进。同时本专利技术首次发现了单质铋纳米颗粒具有较好的光热效果及光声成像效果，大大拓宽了其临床应用，具有更大的临床意义。
技术实现思路
针对以上需求，本专利技术的目的在于提供一种同时作于CT/PAT造影和光热治疗的纳米单质铋诊疗剂的制备方法。本专利技术提供的制备方法包括以下步骤：1)将疏水性还原性有机溶剂与Bi(NO3)3按1：1～20的摩尔比混合，然后加热至170～180℃发生反应，自然冷却至20～40℃，过滤，所得固体经乙醇及氯仿洗脱后，即为疏水性分子包裹的纳米单质铋晶体；2)将纳米单质铋晶体分散到疏水性有机溶剂与水的混合溶液内，所述混合溶液中纳米单质铋晶体的浓度为20～100mg/ml，加入两亲性聚合物，超声反应10～30min，旋蒸除去疏水性溶剂，得到的溶液即为纳米单质铋诊疗剂。优选地，所述疏水性还原性有机溶剂为正十二硫醇、叔十二硫醇，油胺中的至少一种。优选地，所述两亲性聚合物为磷脂聚乙二醇、聚乙二醇、巯基聚乙二醇中的至少一种。优选地，所述混合溶液中疏水性有机溶剂与水的体积比为1：1～5，最佳为1：3。优选地，所述混合溶液中纳米单质铋晶体的浓度为50～80mg/ml，最佳为60mg/ml。本专利技术提供的诊疗剂以疏水性分子包裹的纳米单质铋晶体为内核，外层再包裹一层两亲性聚合物(分子结构中同时含有亲水基团和疏水基团的聚合物)分子，内核的粒径＜50nm，两亲性聚合物包裹后的粒径为100-200nm。本专利技术在CT/PAT成像造影及光热治疗诊疗剂具有明显的优势，如1.单质铋具有较大的相对原子质量，X射线吸收能力强，X射线衰减系数大，CT组织分辨率高；2.单质铋对近红外波段有较强的吸收，可同时用作光热治疗及PAT成像的造影剂。3.单质铋合成原料廉价易得，合成工艺简单易行。本专利技术以单质铋为基体吸收近红外光，可转换为高能量的热能使其具有较好的光热治疗及光声成像效果、同时铋本身具有CT造影剂的效果。两亲性聚合物的存在克服了纳米单质铋晶体本身的毒副作用及疏水性，使其具有良好的分散性及生物相容性，可广泛应用于肿瘤特异性的诊断和治疗，在临床应用中具有巨大价值，可同时实现肿瘤术前诊断、术中追踪及术后评价等一体化诊疗过程，具有较好的发展潜力。附图说明图1是正十二硫醇包裹的纳米单质铋晶体的透射电镜图像。图2是纳米单质铋诊疗剂的透射电镜图像。图3是正十二硫醇包裹的纳米单质铋晶体和纳米单质铋诊疗剂的粒径分布图。图4是纳米单质铋诊疗剂在不同光强下的温度变化曲线。图5是纳米单质铋诊疗剂对C6细胞(胶质瘤细胞)存活率的影响。图6是纳米单质铋诊疗剂在不同浓度的CT值曲线。图7是纳米单质铋诊疗剂在不同浓度的PAT信号值曲线。图8是荷瘤鼠肿瘤在不同处理条件下的的相对增长曲线。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术进行详细地说明。实施例1一种纳米单质铋诊疗剂的制备方法，包括以下步骤：1)将正十二硫醇与Bi(NO3)3·5H2O按1：3的摩尔比混合，使用加热套加热至178℃，保持一分钟，自然条件下降温至30℃，整个过程在搅拌状态下进行同时通氮气。过滤，将所得固体用无水乙醇洗脱3次(转速8000r/min，15min/次)，氯仿洗脱1次(转速3000r/min，8min/次)，40℃蒸干除去氯仿，得到的产物即为正十二硫醇包裹的纳米单质铋晶体。2)将所得正十二硫醇包裹的纳米单质铋晶体分散于环己烷与水的混合溶剂(环己烷与水的体积比1：3)中，使晶体浓度为60mg/ml，超声30min后，加入磷脂聚乙二醇(DSPE-PEG2000)，磷脂聚乙二醇与单质铋的摩尔比为1：5，超声反应30min，反应液经0.45um的滤膜过滤，除去大的团聚体，滤液旋蒸除去环己烷，剩下的溶液即为纳米单质铋诊疗剂。从图1、图2的透射电镜图中可以看出，步骤1)制得的纳米单质铋晶体和步骤2)制得的纳米单质铋诊疗剂粒径较为均一，形状为规则的圆形，且分散性较好。从图3的粒径分布图中可以看出，本实施例制得的纳米铋材料粒径均一，单分散性(PDI)较小，均小于0.1。实施例2一种纳米单质铋诊疗剂的制备方法，包括以下步骤：1)将油胺与Bi(NO3)3·5H2O按1：7的摩尔比混合，使用加热套加热至170℃，保持2分钟，自然条件下降温至40℃，整个过程在搅拌状态下进行同时通氮气。过滤，将所得固体用无水乙醇洗脱2次，氯仿洗脱2次，蒸干除去氯仿，得到的产物即为油胺包裹的纳米单质铋晶体。2)将所得油胺包裹的纳米单质铋晶体分散于氯仿与水的混合溶剂(氯仿与水的体积比1：1)中，使晶体浓度为20mg/ml，超声30min后，加入巯基聚乙二醇，巯基聚乙二醇与单质铋的摩尔比为1：1，超声反应20min，反应液经0.45um的滤膜过滤，除去大的团聚体，滤液旋蒸除去氯仿，剩下的溶液即为纳米单质铋诊疗剂。实施例3一种纳米单质铋诊疗剂的制备方法，包括以下步骤：1)将叔十二硫醇与Bi(NO3)3·5H2O按1：1的摩尔比混合，使用加热套加热至180℃，保持1分钟，自然降温至20℃，整个过程在搅拌状态下进行同时通氮气。过滤，将所得固体用无水乙醇洗脱1次，氯仿洗脱1次，蒸干除去氯仿，得到的产物即为叔十二硫醇包裹的纳米单质铋晶体。2)将所得叔十二硫醇包裹的纳米单质铋晶体分散于甲苯与水的混合溶剂(甲苯与水的体积比1：5)中，使晶体浓度为100mg/ml，超声30min后，加入磷脂聚乙二醇，磷脂聚乙二醇与单质铋的摩尔比为1：8，超声反应10min，反应液经滤膜过滤，除去大的团聚体，滤液旋蒸除去甲苯，剩下的溶液即为纳米单质铋诊疗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时用作CT/PAT造影和光热治疗的纳米单质铋诊疗剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)将疏水性还原性有机溶剂与Bi(NO

【技术特征摘要】
1.一种同时用作CT/PAT造影和光热治疗的纳米单质铋诊疗剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)将疏水性还原性有机溶剂与Bi(NO3)3按1：1～20的摩尔比混合，然后加热至170～180℃发生反应，自然冷却至20～40℃，过滤，所得固体经乙醇及氯仿洗脱后，即为疏水性分子包裹的纳米单质铋晶体；2)将纳米单质铋晶体分散到疏水性有机溶剂与水的混合溶液内，所述混合溶液中纳米单质铋晶体的浓度为20～100mg/ml，加入两亲性聚合物，超声反应10～30min，旋蒸除去疏水性溶剂，得到的溶液即为纳米单...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐海波，吴波，陆树婷，黄世文，程震，廖如芳，喻会，李玉爽，
申请(专利权)人：武汉大学中南医院，
类型：发明
国别省市：湖北,42