肝病治疗用药用植物溶剂提取物制造技术

一种用于肝病治疗的荨麻科植物根或茎部的溶剂提取物，提取自一苧麻科植物，且该苧麻科植物其与山苧麻（Ｂｏｅｈｍｅｒｉａｆｒｕｔｅｓｃｓｎｓ），长叶苧麻（Ｂｏｅｈｍｅｒｉａ　ｚｏｌｌｉｎｇｅｒｉａｎａ）、咬人猫（Ｕｒｌｉｃａｔｈｕｎｂ ｅｒｇｉａｎａ）、水麻（Ｐｉｌｅａｓｐｐ）、苧麻（Ｂｏｅｈｍｅｒｉａｎｉｖｅａ）及木苧麻（Ｂｏｅｈｍｅｒｉａｄｅｎｓｉｆｌｏｒａ）的核糖体基因间序列（ＩｎｔｅｒｎａｌｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄＳｐａｃｅｒ）相似度大于７０％以 上。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是关于一种具有抑制B型肝炎病毒DNA复制及B型肝炎病毒表面抗原(HBs)及e抗原(HBe)分泌的肝病治疗用的药用植物提取物；该提取物不仅对野生型(wild·type)B型肝炎病毒具有抑制效果，亦对肝安能抗药性(lamivudine-resistant)的B型肝炎病毒的病毒DNA复制及病毒表面抗原及e抗原的分泌具抑制效果。此肝病治疗用的药用植物来源为具有特定核糖体基因间序列(ribosomal DNA Internal transcribed Spacer，简称ITS序列)的荨麻科植物，以及该ITS序列可作为该药物植物的鉴识比对。
技术介绍
全世界有三亿五千万人口为慢性B型肝炎带原者，在美国约有一百二十五万的慢性肝炎感染者，在中国大陆约有三千至五千万人感染B型肝炎，一亿二千万人为慢性B型肝炎带原者，其中每年约有三十万人死于B型肝炎，在台湾则约有三百万人感染B型肝炎。据估计在美国每年约有14-32万人感染B型肝炎，因B型肝炎感染所引起的经济损失每年至少七亿美元。在台湾的慢性肝病及肝硬化患者超过五千人，为国人第六大死因，再加上引起肝肿瘤等病症，则更为可观。目前治疗B型肝炎以干扰素(interferon)及肝安能(lamivudine)为主。干扰素在1992年为FDA允许使用于治疗慢性B型肝炎，但是在使用期间会引起非常大的副作用，且仅约20％的B肝病人对干扰素有反应，而肝安能在1998年通过FDA的许可用来治疗慢性B型肝炎，但也仅有17-33％的病人有反应，而中国人对肝安能的反应更低，最严重则为长期使用肝安能会引起B肝病毒的突变，随使用时间加长，其突变率也随之增加，在使用第一年约有24％的突变率，至第二年则增加为42％，第三年为52％，至第四年则高至67％。故可知目前为止，仍未有高疗效低副作用且不会引起病毒突变的治疗B型肝炎药物。根据研究发现，B型肝炎带原者的e抗原呈阳性，患者罹肝癌危险为常人六十倍，推估七十岁时，罹肝癌风险高达九成；因此开发更为有效、同时可以抑制B型肝炎病毒表面抗原及e抗原的产生、不会引起病毒突变，甚至可抑制突变病毒的B型肝炎治疗药物为当务之急。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供一种具有抑制B型肝炎病毒DNA复制及B型肝炎病毒表面抗原及e抗原分泌的肝病治疗用的药用植物提取物；以及利用核糖体基因间序列(ITS序列)对该药用植物进行鉴定的方法。本专利技术的主要目的是提供一种用于肝病治疗的药用植物提取物，是由将山苧麻、长叶苧麻、咬人猫、水麻、苧麻、木苧麻的根或茎部磨碎打粉、以溶剂提取而制成。本专利技术的另一目的是提供一种提取方法，以用于制造抑制B型肝炎病毒DNA复制，B型肝炎病毒表面抗原及治疗e抗原分泌的肝病用的药用植物提取物，是由将山苧麻、长叶苧麻、哎人猫、水麻、苧麻、木苧麻的根或茎部磨碎打粉、以溶剂提取而制成。本专利技术的又一目的是提供一种用于肝病治疗的药用植物的药用植物鉴定法，是由与山苧麻、长叶苧麻、咬人猫、水麻、苧麻、木苧麻的核糖体基因间序列(Internal transcribed Spacer，简称ITS序列)进行比对，其ITS序列相似度至少为70％，以单离出具有对抑制B型肝炎病毒DNA复制，B型肝炎病毒表面抗原及治疗e抗原分泌的肝病有较佳药效的植物药材。为实现上述目的，本专利技术提供的用于肝病治疗的荨麻科植物根或茎部的溶剂提取物，提取自一苧麻科植物，且该苧麻科植物其与山苧麻(Boehmeria frutescsns)，长叶苧麻(Boehmeria zollingeriana)、咬人猫(Urlicathunbergiana)、水麻(Pilea spp)、苧麻(Boehmeria nivea)及木苧麻(Boehmeriadensiflora)的核糖体基因间序列(Internal transcribed Spacer)相似度大于70％以上。其中该山苧麻的核糖体基因间序列如序列识别号1、2及3所示。其中该长叶苧麻的核糖体基因间序列如序列识别号4、5及6所示。其中该咬人猫的核糖体基因间序列如序列识别号7、8及9所示。其中该水麻的核糖体基因间序列如序列识别号10、11及12所示。其中该苧麻的核糖体基因间序列如序列识别号13、14及15所示。其中该木苧麻的核糖体基因间序列如序列识别号16、17及18所示。其中山苧麻、长叶苧麻、咬人猫、水麻、苧麻、木苧麻之一的核糖体基因间序列可用于肝病治疗的药用植物提取物的药用植物鉴定。其中植物提取物是经抽取待测荨麻科植物DNA、连锁聚合酶反应增幅放大、核糖体基因间序列片段定序、分析比对山苧麻、长叶苧麻、咬人猫、水麻、苧麻、木苧麻的核糖体基因间序列、建立荨麻科植物核糖体基因间序列资料库的步骤鉴定。该溶剂提取物的提取方法包括下列步骤(a)将该等荨麻科植物根或茎部根或茎部磨碎打粉，得到一粉状物；(b)以一高极性溶剂或其溶剂混合物处理步骤(a)中所得粉状物，得到提取液；经蒸发干固萃取物；以及(c)再以低极性溶剂及水溶剂混合物处理该步骤(b)中所得的水溶液层，经蒸发干固萃取物。其中该高极性溶剂为甲醇、乙醇或其混合物。其中该低极性溶剂选自一群组包括乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、环己烷、正己烷、正丁醇乙醚、苯，及上述的混合物。其中该低极性溶剂为乙酸乙酯。其中肝病治疗为B型肝炎治疗。并可用于抗甘安能药物的B型肝炎治疗。其中肝病治疗的荨麻科植物根或茎部的溶剂提取物配合其他肝病治疗药物使用。本专利技术提供的荨麻科植物药材鉴定方法，包括以下步骤(a)提供一已知的荨麻科植物药材的核糖体基因间序列(ITS)资料库；(b)提供一荨麻科植物药材的根部或茎部，抽取其DNA；(c)设计一引子对(Primer)如下，5’-CACACCGCCCGTCCTACCGA-3’ 5’-ACTCGCCGTTACTAGGGGAA-3’并针对该步骤(b)中所抽取的DNA进行聚合酶连锁反应，得到一第一ITS序列；(d)将步骤(c)中所得到的该第一ITS序列进行定序(sequencing)；以及(e)将该第一ITS序列与该资料库中的ITS序列资料进行相似度比对，当相似度大于70％以上时，即为该步骤(b)中的荨麻科植物药材。其中该步骤(b)抽取DNA方法是先以CTAB(cetyltrimethylammoniumbromide)、PVPP(polyvinyl polypyrrolidone)及不同盐浓度处理，再经过沉淀离心、Chloroform萃取及酒精沉淀而得。其中该步骤(b)中的荨麻科植物药材选自一群组包括山苧麻(Boehmeria frutescsns)，长叶苧麻(Boehmeria zollingeriana)、咬人猫(Urlicathunbergiana)、水麻(Pilea spp)、苧麻(Boehmeria nivea)及木苧麻(Boehmeriadensiflora)。在一具体实施例中，本专利技术将肝病治疗的药用植物提取物作为活体外抑制病毒的应用(1)抑制野生型(wild-type)B型肝炎病毒DNA复制及其病毒表面抗原(HBs)及e抗原(HBe)的分泌；(2)抑制抗肝安能药性(lamivudine-resistant)的B型肝炎病毒DNA复制及其病毒表面抗原及e抗原的分泌。另一具体实施例中，本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李连滋，张秀凤，李承榆，邱淑娇，童天送，
申请(专利权)人：财团法人工业技术研究院，
类型：发明
国别省市：