一种蟾蜍草良种繁育的方法技术

本发明专利技术属于蟾蜍草的种植技术领域，具体涉及一种蟾蜍草良种繁育的方法，内容为：在春季取蟾蜍草幼株，经灭菌消毒后将其叶片的中间位置切成小块，接种到愈伤组织诱导培养基进行初代诱导培养，得到丛生芽；将丛生芽分成单个小芽，接种到丛芽增殖培养基上进行培养，得到1‑2cm的芽苗；然后将芽苗接种到生根培养基上培养至长出白色的根，得到蟾蜍草种苗。本发明专利技术相比现有技术具有以下优点：本发明专利技术中以怀特培养基为基础，添加山药浆等材料，得到适用于蟾蜍草繁殖各阶段的培养基，能够有效提升蟾蜍草育苗的成活率和出苗整齐度；所得种苗栽种完成后，有效保持亲本的优良特性，提高植株抗性，可用于规模化种植，大大提高了蟾蜍草的繁育能力和优品率。

Method for breeding fine variety of toad grass

The invention belongs to the technical field of grass planting toad, method, in particular to a toad breeding grass content in spring from toad grass plants. After sterilization after the middle position leaves cut into small pieces, inoculated into callus induction medium for primary cultured buds buds will be divided into; single bud, bud proliferation were inoculated into the culture medium, 1 2cm shoots; then the seedling inoculation to rooting culture medium to grow white roots, get toad grass seedling. Compared with the prior art, the invention has the following advantages: the invention by White as basic medium, adding yam paste and other materials, can be applied to medium grass breeding toad in each stage, can effectively improve the survival rate of seedling emergence and seedling uniformity of toad grass; the seedling planted after the completion, effectively maintain the excellent characteristics of parent. To improve plant resistance, can be used for large-scale cultivation, greatly improving the ability of breeding grass toad and excellence rate.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蟾蜍草的种植
，具体涉及一种蟾蜍草良种繁育的方法。
技术介绍
蟾蜍草在我国广泛分布，夏、秋季开花，平时可随时挖掘洗净晒干或鲜用，直接移栽后成活率高，可收籽再种，属于一种野生的、比较稀少的中草药，它可以有效预防和治疗感冒、慢性肠炎等疾病，对治疗咳嗽及支气管炎有显著的效果，蟾蜍草与两栖爬行动物蟾蜍分泌物蟾酥及含有此类物质的蟾皮、蟾衣、干蟾在一些疾病的治疗方面有异曲同工之妙，由于中药产业的广泛发展，蟾蜍草逐渐在片剂、保健饮料、保健食品、保健酒、健康烟、茶饮，或者在染料、农业副产品中逐渐应用，还有很多更广泛的用途正在研究进程中，因此蟾蜍草的需求量在不断增加，而目前对蟾蜍草的采集还来源于传统栽培技术栽培，但是由于长期过度采伐导致野生蟾蜍草逐渐减少、甚至由于环境污染使种子或植株携带病毒或有害物质，严重影响药物的药效，植株优良品质的退化以及栽种量的减小，限制了蟾蜍草的开发应用，因此，如何栽种品质优良的蟾蜍草成了目前需要急需研究的课题。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有的蟾蜍草品种差、产量低的问题，提供了一种蟾蜍草良种繁育的方法。本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种蟾蜍草良种繁育的方法，包括以下步骤：（1）在春季取优质蟾蜍草幼株，经灭菌消毒后将其叶片的中间位置切成小块，接种到愈伤组织诱导培养基进行初代诱导培养，得到丛生芽；将丛生芽分成单个小芽，接种到丛芽增殖培养基上进行培养，得到1-2cm的芽苗；然后将芽苗接种到生根培养基上培养至长出白色的根，得到蟾蜍草种苗；（2）愈伤组织诱导培养基按重量份包括：怀特培养基68-74份、山药浆8-10份、玉米素4-6份、水解酪蛋白3-5份、磷脂酰肌醇3-5份、苯丙氨酸二肽2-5份、延胡索酸3-4份；丛芽增生培养基按重量份包括：怀特培养基60-68份、山药浆14-16份、玉米素2-3份、水解酪蛋白6-8份、磷脂酰肌醇5-8份、苯丙氨酸二肽1-2份、延胡索酸1-2份；生根培养基按照重量份包括：怀特培养基60-68份、山药浆10-18份、玉米素1-2份、水解酪蛋白6-8份、磷脂酰肌醇6-8份、苯丙氨酸二肽1-2份、延胡索酸4-5份；（3）丛生芽的培养条件为：pH值6.7，培养温度22℃，空气湿度68%，光照培养周期9.5小时/天，光照强度200-300lx；芽苗的培养条件为：pH值6.4，培养温度26℃，空气湿度72%，光照培养周期11小时/天，光照强度550-750lx；种苗的培养条件为：pH值6.2，培养温度22℃，空气湿度76%，光照培养周期13小时/天，光照强度1250-1500lx。作为对上述方案的进一步描述，所述小块为0.55-0.75mm×0.55-0.75mm的小块。作为对上述方案的进一步描述，所述山药浆的制备方法如下：取新鲜山药去皮后洗净，切碎后加入相当于其重量5倍的去离子水，均匀打浆；然后加入相当于其重量5%的石榴提取物，在压强为0.2-0.25MPa、温度为140-160℃的条件下处理5-8分钟，完成后降温；过滤除去粗纤维，收集滤液并在高温处理后即得。作为对上述方案的进一步描述，所述石榴提取物的主要成分为安石榴苷，含量为50%。在上述蟾蜍草良种繁育的方法的基础上，在丛生芽的培养阶段，从培养开始，每隔2天，全天光暗培养一次，能够进一步缩短蟾蜍草繁育时间。本专利技术利用相对低温条件通过添加玉米素、延胡索酸与其他材料相配合，促进了细胞生长，抑制了代谢副产品的产生，使蟾蜍草愈伤组织快速形成紧凑的愈伤组织，提高愈伤组织的质量，进而提高其分化率，使其达到70%以上，能快速获得不定芽，芽苗经培养后生根率和移栽率达到100%。本专利技术相比现有技术具有以下优点：本专利技术中以蟾蜍草幼株叶面为外植体，以怀特培养基为基础，添加山药浆等材料，调节相应配比，得到适用于蟾蜍草繁殖各阶段的培养基，能够有效提升蟾蜍草育苗的成活率和出苗整齐度育苗时间缩短至14-18天；所得种苗栽种完成后，有效保持亲本的优良特性，提高植株抗性，可用于规模化种植，大大提高了蟾蜍草的繁育能力和优品率。具体实施方式本专利技术下面结合实施例进一步详述，一种蟾蜍草良种繁育的方法，包括以下步骤：在春季取优质蟾蜍草幼株，经灭菌消毒后将其叶片的中间位置切成小块，接种到愈伤组织诱导培养基进行初代诱导培养，得到丛生芽；将丛生芽分成单个小芽，接种到丛芽增殖培养基上进行培养，得到1-2cm的芽苗；然后将芽苗接种到生根培养基上培养至长出白色的根，得到蟾蜍草种苗。其中，根据各个阶段分别设置实施例的培养基成分，具体内容如下：表1愈伤组织诱导培养基按重量份配比表2丛芽增生培养基按重量份配比表3生根培养基按照重量份配比实施例1-7中，各阶段的培养条件如下：丛生芽的培养条件为：pH值6.7，培养温度22℃，空气湿度68%，光照培养周期9.5小时/天，光照强度200-300lx；芽苗的培养条件为：pH值6.4，培养温度26℃，空气湿度72%，光照培养周期11小时/天，光照强度550-750lx；种苗的培养条件为：pH值6.2，培养温度22℃，空气湿度76%，光照培养周期13小时/天，光照强度1250-1500lx。其中，所述山药浆的制备方法如下：取新鲜山药去皮后洗净，切碎后加入相当于其重量5倍的去离子水，均匀打浆；然后加入相当于其重量5%的石榴提取物，在压强为0.2-0.25MPa、温度为140-160℃的条件下处理5-8分钟，完成后降温；过滤除去粗纤维，收集滤液并在高温处理后即得。培养基中怀特培养基以及其他原材料均可由市场购买，其中，所述石榴提取物的主要成分为安石榴苷，含量为50%；由蟾蜍草幼苗得到的小块大小为0.55-0.75mm×0.55-0.75mm。按照实施例中方法配制培养基，用于蟾蜍草的繁育，统计相关实验数据，在得到幼苗后在相同条件下培育，具体结果如下：表4蟾蜍草叶片组织培养结果及移栽结果通过表4中结果可以看出，实施例1-3为优选例，可以有效提高蟾蜍草叶片组织的出愈率，通过提高愈伤组织的质量，进而提高其分化率，提高了幼苗的品质和抗性，提高移栽率。设置实施例8，其各阶段的培养基与实施例1中相同，在丛生芽的培养阶段，从培养开始，每隔2天，全天光暗培养一次，统计其组织培养结果及移栽结果，具体结果如下：表5实施例8与实施例1的对比结果组别出愈率（%）存活率（%）分化率（%）生根率（%）移栽成活率（%）实施例172.899.673.4100100实施例869.799.268.1100100由表5中结果可知，实施例8中方法降低了蟾蜍草叶片组织的分化率，但其总体繁育时间比实施例1缩短了3-4天。因此，在实际应用中，可以根据实际生产要求选择实施例1-3或实施例8的方法对蟾蜍草进行繁育。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蟾蜍草良种繁育的方法，其特征在于，包括以下步骤：在春季取优质蟾蜍草幼株，经灭菌消毒后将其叶片的中间位置切成小块，接种到愈伤组织诱导培养基进行初代诱导培养，得到丛生芽；将丛生芽分成单个小芽，接种到丛芽增殖培养基上进行培养，得到1‑2cm的芽苗；然后将芽苗接种到生根培养基上培养至长出白色的根，得到蟾蜍草种苗；愈伤组织诱导培养基按重量份包括：怀特培养基68‑74份、山药浆8‑10份、玉米素4‑6份、水解酪蛋白3‑5份、磷脂酰肌醇3‑5份、苯丙氨酸二肽2‑5份、延胡索酸3‑4份；丛芽增生培养基按重量份包括：怀特培养基60‑68份、山药浆14‑16份、玉米素2‑3份、水解酪蛋白6‑8份、磷脂酰肌醇5‑8份、苯丙氨酸二肽1‑2份、延胡索酸1‑2份；生根培养基按照重量份包括：怀特培养基60‑68份、山药浆10‑18份、玉米素1‑2份、水解酪蛋白6‑8份、磷脂酰肌醇6‑8份、苯丙氨酸二肽1‑2份、延胡索酸4‑5份；丛生芽的培养条件为：pH值6.7，培养温度18℃，空气湿度68%，光照培养周期9.5小时/天，光照强度200‑300lx；芽苗的培养条件为：pH值6.4，培养温度26℃，空气湿度72%，光照培养周期11小时/天，光照强度550‑750lx；种苗的培养条件为：pH值6.2，培养温度22℃，空气湿度76%，光照培养周期13小时/天，光照强度1250‑1500lx。...

【技术特征摘要】
1.一种蟾蜍草良种繁育的方法，其特征在于，包括以下步骤：在春季取优质蟾蜍草幼株，经灭菌消毒后将其叶片的中间位置切成小块，接种到愈伤组织诱导培养基进行初代诱导培养，得到丛生芽；将丛生芽分成单个小芽，接种到丛芽增殖培养基上进行培养，得到1-2cm的芽苗；然后将芽苗接种到生根培养基上培养至长出白色的根，得到蟾蜍草种苗；愈伤组织诱导培养基按重量份包括：怀特培养基68-74份、山药浆8-10份、玉米素4-6份、水解酪蛋白3-5份、磷脂酰肌醇3-5份、苯丙氨酸二肽2-5份、延胡索酸3-4份；丛芽增生培养基按重量份包括：怀特培养基60-68份、山药浆14-16份、玉米素2-3份、水解酪蛋白6-8份、磷脂酰肌醇5-8份、苯丙氨酸二肽1-2份、延胡索酸1-2份；生根培养基按照重量份包括：怀特培养基60-68份、山药浆10-18份、玉米素1-2份、水解酪蛋白6-8份、磷脂酰肌醇6-8份、苯丙氨酸二肽1-2份、延胡索酸4-5份；丛生芽的培养条件为：pH值6.7，培养温度18℃，空气湿度68%，光照培养周期9.5小时/天，光照强度200-300...

【专利技术属性】
技术研发人员：王克彬，
申请(专利权)人：王克彬，
类型：发明
国别省市：安徽;34