美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法技术

本发明专利技术涉及植物组织培养技术领域，具体涉及美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法；它的步骤具体为：1、外植体的选择与消毒；2、愈伤组织的诱导；3、不定芽的诱导；4、根的诱导；本发明专利技术美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，它使用美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片作为材料，取材方便，接种后在较短时间内形成愈伤组织直至生根形成幼苗植株，所得植株生长健壮，平均根长均明显增大。繁殖系数约为8.2，培养条件可人为控制。利用本方法，可以提高美洲黑69与欧美杨72杂种F1代优良单株的幼苗繁殖系数和成活率，培养周期短，变异少，操作方法简单，从而为杨树人工林大面积生产提供耐盐碱地的优良品种。

Method for producing leaf regeneration plant of American black poplar 69 and hybrid F1 generation of hybrid poplar and poplar

The present invention relates to the technical field of plant tissue culture, in particular to a production method of America Black Poplar 69 and poplar 72 hybrids F1 excellent leaf regeneration plant; its specific steps: 1, selection and disinfection of explants, callus induction; 2; 3, induction of adventitious buds and root induction of 4;; the invention of Populus deltoides and production method of 69 poplar hybrids F1 72 fine plant leaves of the regenerated plants, it uses America Black Poplar 69 and poplar 72 hybrids F1 excellent leaf as materials, convenient after inoculation in a relatively short period of time until the formation of callus formation rooting seedlings, the plants robust growth, the average root length were significantly increased. The propagation coefficient was about 8.2, and the culture condition could be controlled. By this method, and can improve the survival rate of 69 and 72 of America Black Poplar hybrids F1 fine plant seedling propagation coefficient, short cultivation period, less variation, simple operation, excellent variety which is resistant to saline for Poplar Plantation in large area produces.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物组织培养
，具体涉及美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法。
技术介绍
杨树因其生长速度快、世界分布广、人工林栽植面积大，已经成为21世纪改善人类生存环境，满足人类生活需求最有潜力的树种之一。目前已经成为世界木本植物育种、栽培等模式树种。近年来，杨树人工林面积持续扩大，出现了可用土地资源不足的问题，而我国存在大面积的盐碱滩涂地，面积达到0.27亿hm2，如何加强对盐碱滩涂地的利用，成为杨树育种中关注的焦点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，为转抗盐碱基因提供科研材料，它包括。采用上述结构后，本专利技术有益效果为：本专利技术所述的美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，它使用美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片作为材料，取材方便，数量充足，接种后在较短时间内形成愈伤组织直至生根形成幼苗植株，所得植株生长健壮，平均根长均明显增大。繁殖系数约为8.2，培养条件可人为控制。利用本方法，可以提高美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的幼苗繁殖系数和成活率，培养周期短，变异少，培养条件可人为控制，操作方法简单，为美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株作为优良的科研材料进行遗传转化和品种改良等研究奠定基础，从而为杨树人工林大面积生产提供耐盐碱地的优良品种。附图说明此处所说明的附图是用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本申请的一部分，但并不构成对本专利技术的不当限定，在附图中：图1美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片外植体；图2美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的愈伤组织；图3美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的丛生芽；图4美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的生根幼苗。具体实施方式下面将结合附图以及具体实施例来详细说明本专利技术，其中的示意性实施例以及说明仅用来解释本专利技术，但并不作为对本专利技术的限定。本具体实施方式所述的美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，它的步骤具体为：（1）外植体的选择与消毒：选择生长健壮无病害的美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的幼嫩叶片作为外植体，将材料经流水冲洗1h，去除表面杂物，在无菌操作工作台上，先用灭菌的无菌水冲洗3遍，再用75%无水乙醇消毒30s，接着用无菌水冲洗3遍，然后用0.1%氯化汞消毒处理5-7min，最后用灭菌的无菌水冲洗4遍；（2）愈伤组织的诱导：在超净工作台上，将消毒好的叶片切成5mm大小的方块，接种于诱导愈伤组织培养基上，叶的背面紧贴培养基，每瓶接种3-4块，诱导光照条件14h/d，光照强度2000lux，温度23-28℃，湿度60%；（3）不定芽的诱导：将经过继代培养1次后的黄绿色愈伤组织转接到诱导不定芽分化培养基上，诱导光照条件14h/d，光照强度约2000lux，温度23-28℃，湿度60%；（4）根的诱导：经过不定芽诱导得到再生芽，待再生芽长到3-5片叶子，长度0.8-1.2cm转入诱导生根培养基诱导生根，诱导光照条件14h/d，光照强度2000lux，温度23-28℃，湿度60%。进一步地：所述诱导愈伤组织培养基配方为：MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂，PH值为5.8。进一步地：所述诱导不定芽分化培养基配方为：MS+0.5mg/L6-BA+0.02mg/LTDZ+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂，PH值为5.8。进一步地：所述诱导生根培养基配方为：1/2MS+2mg/LIBA+0.05mg/LNAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，PH值为5.8。进一步地：所述美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株培养周期为55-65天。本专利技术所述的美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，它使用美洲黑杨69杨与欧美杨72杨杂种F1代优良单株叶片作为材料，取材方便，数量充足，接种后在较短时间内形成愈伤组织直至生根形成幼苗植株，所得植株生长健壮，平均根长均明显增大。繁殖系数约为8.2，培养条件可人为控制。利用本方法，可以提高美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的幼苗繁殖系数和成活率，培养周期短，变异少，培养条件可人为控制，操作方法简单，为美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株作为优良的科研材料进行遗传转化和品种改良等研究奠定基础，从而为杨树人工林大面积生产提供耐盐碱地的优良品种。以上所述仅是本专利技术的较佳实施方式，故凡依本专利技术专利申请范围所述的构造、特征及原理所做的等效变化或修饰，均包括于本专利技术专利申请范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，其特征在于它的步骤具体为：（1）外植体的选择与消毒：选择生长健壮无病害的美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的幼嫩叶片作为外植体，将材料经流水冲洗1h，去除表面杂物，在无菌操作工作台上，先用灭菌的无菌水冲洗3遍，再用75%无水乙醇消毒30s，接着用无菌水冲洗3遍，然后用0.1% 氯化汞消毒处理5‑7 min，最后用灭菌的无菌水冲洗4遍；（2）愈伤组织的诱导：在超净工作台上，将消毒好的叶片切成5mm大小的方块，接种于诱导愈伤组织培养基上，叶的背面紧贴培养基，每瓶接种3‑4块，诱导光照条件14h/d，光照强度2000lux，温度 23‑28 ℃，湿度60%；（3）不定芽的诱导：将经过继代培养1次后的黄绿色愈伤组织转接到诱导不定芽分化培养基上，诱导光照条件14h/d，光照强度约2000lux，温度 23‑28 ℃，湿度60%；（4）根的诱导：经过不定芽诱导得到再生芽，待再生芽长到3‑5片叶子，长度0.8‑1.2cm转入诱导生根培养基诱导生根，诱导光照条件14h/d，光照强度2000lux，温度 23‑28 ℃，湿度60%。...

【技术特征摘要】
1.美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，其特征在于它的步骤具体为：（1）外植体的选择与消毒：选择生长健壮无病害的美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的幼嫩叶片作为外植体，将材料经流水冲洗1h，去除表面杂物，在无菌操作工作台上，先用灭菌的无菌水冲洗3遍，再用75%无水乙醇消毒30s，接着用无菌水冲洗3遍，然后用0.1%氯化汞消毒处理5-7min，最后用灭菌的无菌水冲洗4遍；（2）愈伤组织的诱导：在超净工作台上，将消毒好的叶片切成5mm大小的方块，接种于诱导愈伤组织培养基上，叶的背面紧贴培养基，每瓶接种3-4块，诱导光照条件14h/d，光照强度2000lux，温度23-28℃，湿度60%；（3）不定芽的诱导：将经过继代培养1次后的黄绿色愈伤组织转接到诱导不定芽分化培养基上，诱导光照条件14h/d，光照强度约2000lux，温度23-28℃，湿度60%；（4）根的诱导：经过不定芽诱导得到再生芽，待再生芽长到3-5片叶子，长度0.8-1.2cm转入诱导生根培养基诱导生根，诱导光照条件14h/d，光照强度...

【专利技术属性】
技术研发人员：马艳，陈威，曾妮，张晴，宰学明，
申请(专利权)人：金陵科技学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32