一种用于免疫检测的多单元装置制造方法及图纸

本发明专利技术涉及一种用于免疫检测的多单元装置，包括：有多个孔的多孔板；与多孔板匹配的多单元检测板，所述多单元检测板适于插入该多孔板；所述多单元检测板包括多个检测单元；所述检测单元的表面包括具有不渗透端的凸起单位，在凸起单位不渗透的一端的表面覆盖有单单元膜。本发明专利技术所述的用于免疫检测的多单元装置克服了现有的多孔板无法用于载通分析的缺陷，适于用于包括载通分析的免疫印迹分析中以进行高通量检测。

【技术实现步骤摘要】
相关申请本申请是对基于2012年7月9日递交的61/669650号美国临时专利申请号的优先权要求的，于2013年7月8日递交的13/936890号美国专利申请且现为美国专利US9063134的部分延续申请，基于2015年5月18日递交的14/714774美国专利申请号的优先权要求的。每一个提到的申请都已经反映在本申请中。
本专利技术属于免疫分析领域，进一步地说，涉及高通量的免疫印迹分析的装置和方法。更严格的说，本专利技术涉及用于多个样品分析的包括载通技术的免疫印迹分析中多单元检测板和所述多单元检测板用于包括载通技术的免疫印迹分析的使用方法。
技术介绍
蛋白质分析技术是现代生物学研究的基础。蛋白质分析技术通过研究生命过程中的重要蛋白质因子的表达调控以及这些重要蛋白质因子的表达调控在药物学和临床医学中的应用，为生物医学、药物学和临床科学中的疾病的病理过程的研究、诊断、预防和治疗提供了重要的信息。刚获得专利授权的载通技术(Zesternanalysis)(美国专利号8293487，8563256以及8722345)是对传统的基于免疫印迹技术的蛋白质分析方法的革新。与传统的免疫印迹分析过程相比，载通技术在检测步骤之前，添加了一步洗脱步骤来保证分析的特异性。同目标抗原相结合的抗体或者抗体复合物可以特异性地被竞争分子洗脱到洗脱液中。洗脱液中被洗脱的抗体或者抗体复合物的数量真实地反映了分析样品中的目标抗原的数量。洗脱下来的抗体或者抗体复合物的数量可以直接在溶液中定量测量，这也显示了载通技术同传统免疫印迹分析技术相比较的另一个优势。虽然载通技术同传统免疫印迹分析技术相比，在简单性和适用于高通量分析方面显示了明显的优势，但是它也对适用的实验器材提出新的要求，因为现有的适用于传统免疫印迹分析的实验器材不是专为载通技术设计的，尤其现有的实验器材无法满足以高通量分析的为目的利用载通技术进行的实验的要求。包括硝酸纤维素膜和PVDF膜的几种膜在以西式印迹分析技术(Westernblotanalysis)为代表的传统的免疫印迹分析技术中得到广泛运用。这几种膜已经被优化以适用于免疫印迹分析的目的。在传统的免疫印迹分析过程中，信号是在膜上，目标抗原同抗体结合的位置上被检测出来，这就要求膜平滑、连续，以方便对检测结果进行比较。与此相反，在载通分析过程中，抗体或者抗体复合物被竞争分子从目标抗原和抗体或者抗体复合物的结合位置上解放出来进行定量分析。显然，在载通分析过程中，承载不同蛋白质样品的膜不能是连续的，它必须相互分离以允许对单个样品中的抗体或者抗体复合物进行洗脱，从而避免样品之间各自的信号相互干扰。在载通分析过程中，对于使用的膜的本身，对于膜的形状或者其他物理特性没有要求，因为对每个样品的信号检测不需要在膜表面上进行。多孔板被广泛应用于生化和免疫印迹分析，包括酶联免疫分析中。这些多孔板包括6孔板、24孔板、96孔板，甚至1536孔板。多孔板也可以被称为微量滴定板、微型板、微孔板。一般来说，用于酶联免疫反应的多孔板对蛋白质的结合能力少于1μg/cm2，相反，典型的用于传统的免疫印迹分析的膜，无论是硝酸纤维素膜，或者PVDF膜(中文名称为聚偏氟乙烯膜)，它们的蛋白质结合能力在100到200μg/cm2之间。虽然酶联免疫板成功地被运用于酶联免疫反应中，它的极低的蛋白质结合能力妨碍了其在免疫分析中的应用。因而，本专利技术提供了一种多单元装置用于满足载通分析技术以及其他免疫分析的要求，特别是满足对其在多样品分析中的应用。
技术实现思路
本专利技术提供了多单元装置以及利用多单元装置进行高通量免疫印迹分析的方法，所述多单元装置是可以用于用于高通量免疫印迹分析(包括载通分析)并与之相匹配的装置。本专利技术中的多单元检测板包括至少一个检测单元是由膜覆盖在该检测单元表面上。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种用于免疫检测的多单元装置，包括：有多个孔的多孔板；与多孔板匹配的多单元检测板(multi-unitplate)，所述多单元检测板适于插入该多孔板；所述多单元检测板包括多个检测单元；所述每个检测单元的表面包括具有不渗透端的凸起单位，在凸起单位不渗透的一端的表面覆盖有单单元膜。本专利技术所述的用于免疫检测的多单元装置，在进行载通分析时需要多单元检测板和多孔板配合使用。本专利技术中的多单元检测板可以插入同多单元检测板的检测单元数目相同的孔的多孔板，以用于载通分析。多单元检测板为包括多个检测单元的板，其中至少一个检测单元包括一个具有不渗透端的凸起单位，而单单元膜贴在凸起单位不渗透的一端。本专利技术所述的多单元检测板至少有一个检测单元独立于其他的检测单元，以避免这个独立的检测单元的样品与其他检测单元的样品相互干扰，以实现对单个样品的分析。在载通分析中，用于单个样品分析的膜称为单单元膜，即单个单元膜。单单元膜在多单元检测板中相互不需要相连。在洗脱步骤中，单单元膜被分别洗脱以用于对单个样品的定量分析。本专利技术所述的凸起单位既可以指一个凸起也可以指多个凸起。所述单单元膜具有孔隙，检测抗体可以通过孔隙。在检测抗体通过孔隙的过程中，检测抗体和单单元膜上的抗原相结合从而实现了捕获。本专利技术对于用于载通分析的单单元膜的形状、质地，甚至膜的连续性没有任何限制。单单元膜可以为一块膜也可以为多块膜(即多于一块膜)，只要它们共存于多单元检测板中的同一个检测单元，例如：多块膜同多单元检测板中的单个检测单元相联系，用于单个样品分析的膜。本专利技术所述的用于免疫检测的多单元装置克服了现有的多孔板无法用于载通分析的缺陷，适用于载通分析中并进行高通量检测。进一步地，本专利技术所述单单元膜覆盖着单个凸起单位的表面。进一步，所述单单元膜为硝酸纤维素膜或聚偏氟乙烯膜。进一步，所述单单元膜在点样前或者后通过处理以提高蛋白结合效率。进一步，所述多单元检测板的装置的设计与标准的多孔板设计相同以保证可以插入一个配套的多孔板。所述多单元检测板的多个单元可以以任意形状排列，优选地，最好以长方形的形式排列。进一步，所述检测单元的数目为6N，以3NX2N的方式排列，其中N是大于0的整数。多单元检测板的检测单元总数最好是常见的数目，比如当N分别为1、4、16、64和256时，单元的总数分别为6、24、96、384和1536。更好的设计是96或者384单元的多单元检测板，因为这些板更常用，有许多辅助用具可以利用，这些辅助用具包括液体处理工具，比如说可进行自动化液体处理的仪器。进一步，在具体应用的过程中，多个检测单元包括用于单独定位的检测单元。通过定位的检测单元可以实现快速识别、读取、记录检测数据等功能。在本专利技术的一种具体应用中，多单元检测板的单个检测单元的表面覆盖着光滑表面的单单元膜。在本专利技术的另一种具体应用中，多单元检测板的单个单元的表面覆盖着不光滑的单单元膜。本专利技术的多单元检测板可以用任何合适的材料制成。例如，多单元检测板的材质和多孔板的材质均可以选自以下材质：陶瓷、弹性体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于免疫检测的多单元装置，其特征在于，包括：有多个孔的多孔板(104)；与多孔板(104)匹配的多单元检测板(101)，所述多单元检测板(101)适于插入该多孔板(104)；所述多单元检测板(101)包括多个检测单元(102)；所述每个检测单元(102)的表面包括具有不渗透端的凸起单位，在凸起单位不渗透的一端的表面覆盖有单单元膜(103)。

【技术特征摘要】
2015.05.18 US 14/7147741.一种用于免疫检测的多单元装置，其特征在于，包括：有多个孔的
多孔板(104)；与多孔板(104)匹配的多单元检测板(101)，所述多单元检测
板(101)适于插入该多孔板(104)；
所述多单元检测板(101)包括多个检测单元(102)；所述每个检测单元
(102)的表面包括具有不渗透端的凸起单位，在凸起单位不渗透的一端的表
面覆盖有单单元膜(103)。
2.根据权利要求1所述一种用于免疫检测的多单元装置，其特征在于，
所述单单元膜(103)覆盖着单个凸起单位的表面。
3.根据权利要求2所述一种用于免疫检测的多单元装置，其特征在于，
所述单单元膜(103)是一块膜。
4.根据权利要求2所述一种用于免疫检测的多单元装置，其特征在于，
所述单单元膜(103)多于一块膜。
5.根据权利要求2所述一种用于免疫检测的多单元装置，其特征在于，
所述单单元膜(103)为硝酸纤维素膜或聚偏氟乙烯膜。
6.根据权利要求1所述一种用于免疫检测的多单元装置，其特征在于，
所述单单元膜(103)在点样前或者点样后通过处理以提高蛋白结合效率。...

【专利技术属性】
技术研发人员：张建棣，
申请(专利权)人：烟台载通生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37