适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽制造技术

本实用新型专利技术公开了一种适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽，包括中心小室和分别连接于中心小室两侧的输入室和输出室，中心小室、输入室、输出室相互独立且输入室与中心小室连接，中心小室与输出室连通，所述中心小室两侧各设置有一由中心小室边缘向外延伸形成的斜面。本实用新型专利技术在灌流槽的中心小室的侧面设置特殊45°斜面，便于膜片钳实验电极进出。也方便于应用于正置水浸物镜显微镜的物镜调节。

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及生物医学技术的应用，主要针对神经科学和活体组织的电生理学研究领域，用于对活体脑组织切片、心肌片和平滑肌的整铺片进行持续恒定灌流相应细胞外液，以保持组织连接的完整性和细胞活性，实现对组织片中细胞代谢、分泌活动及电生理学功能研究的实验装置。
技术介绍
在现代医学生物学尤其是神经科学研究中，活体组织切片的体外培养和观察技术是非常重要和广泛应用的实验技术之一。近年来发展起来的组织培养技术目的是使组织标本离开体内而生存，给培养技术提出了更高的要求。很多学者在培养操作的方法、培养组织的器皿和培养基等方面做了改进和尝试，使体外组织培养的技术更趋于完善，细胞生长活性得到提高。活体组织切片可应用的研究方法有：脑片标记，使突触摄入放射性标记神经递质或前体，然后神经脑片摄入，使神经末梢递质贮存库被选择性标记。一般需要在37℃孵育30-60min，然后用灌流液冲洗脑片，将脑片移入小室中灌流。脑片杂交，经振动切片后的活体脑片，应用预先加温至37℃的含有生物素或其他标记分子的孵育液，持续作用30分钟。然后用37℃正常细胞外液清洗脑片。此过程均需要在维持脑片活性状态下进行。心肌片电生理实验，需要保持基本完整的心肌细胞之间缝隙连接，观察新植入的心肌细胞和宿主细胞之间功能联系。可应用膜片钳技术或激光共聚焦扫描显微镜技术。组织工程化心肌组织在组成结构上类似于心脏组织的三维电偶联网络和肌肉横纹，而且具有心肌组织样收缩功能，为观察病损心肌的修复提供了可能性。然而，现有多数的切片培养和灌流槽存在的一个重要缺陷就在于槽的封闭性和容积较大、容量非可控。如果需要进行组织细胞的功能、尤其是电生理功能的研究和检测时，不能进行有效实时记录观察。不能配合于激光共聚焦扫描显微镜的载物台和水浸镜头使用。也难以准确控制组织或细胞的外环境。尤其是目前的灌流槽由于容量较大，对于组织细胞分泌的微量细胞因子或神经递质难以实时、动态检测到，也不能配备兼容所有的显微镜观察。而大多数产品基于在细胞实验台加温的恒温灌流会带来较大的电信号干扰，难以记录细胞本身的电生理活动。
技术实现思路
有鉴于此，本技术的目的是提供一种适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽。本技术的目的是通过以下技术方案来实现的，一种适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽，包括中心小室和分别连接于中心小室两侧的输入室和输出室，中心小室、输入室、输出室相互独立且输入室与中心小室连接，中心小室与输出室连通，所述中心小室两侧各设置有一由中心小室边缘向外延伸形成的斜面。进一步，所述斜面向斜上方向延伸。进一步，所述斜面与中心小室边缘的夹角为45°。进一步，所述中心小室底部设置有盖玻片。进一步，所述中心小室设置有尼龙压网。进一步，所述中心小室与输入室和输出室通过底部设置的导流通道连通。进一步，连接中心小室与输入室上的管路上设置有恒温加热装置。进一步，连接中心小室与输入室上的管路上设置有氧气进入缓冲腔。进一步，所述中心小室的容积为300uL。本技术的优点在于：本技术针对现有的器官、组织或细胞内灌流槽不容易实现恒温控制、或者温度加热容易带来较大的工频电信号干扰，难以实现细胞分泌检测和电生理功能记录等部分缺陷，提出在常规组织培养之外的开放式、恒温、恒流、恒定小容量的灌流槽，可适用于进行组织片的实时形态学观察和电生理功能记录。灌流槽的中心小室的前后侧面设置特殊45°斜面，便于膜片钳实验电极进出。也方便于应用于正置水浸物镜显微镜的物镜调节。附图说明为了使本技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本技术作进一步的详细描述，其中：图1是灌流槽的主视图；图2是图1的A-A剖视图；图3是图1的B-B剖视图；图4A是灌流槽中的显微镜适配单元的主视图，图4B是灌流槽中的显微镜适配单元的剖视图；图5是灌流槽整装设备的主视图；图6是图5的C-C剖视图。具体实施方式以下将结合附图，对本技术的优选实施例进行详细的描述；应当理解，优选实施例仅为了说明本技术，而不是为了限制本技术的保护范围。如图1所示，本技术所述的灌流槽包括中心小室和分别连接于中心小室两侧的输入室和输出室，中心小室2、输入室1、输出室4相互独立且输入室与中心小室连接，中心小室与输出室连通，所述中心小室两侧各设置有一由中心小室边缘向外延伸形成的斜面3。中心小室、输入室、输出室的材料为聚四氟乙烯。在本实施例中，所述斜面向斜上方向延伸；所述斜面与中心小室边缘的夹角为45°。该斜面的设置便于膜片钳实验电极进出。也方便于应用于正置水浸物镜显微镜的物镜调节。在本实施例中，所述中心小室底部设置有盖玻片，可保证用于激光共聚焦扫描显微镜的各种物镜观察。在本实施例中，所述中心小室设置有尼龙压网，方便标本附着。在本实施例中，连接中心小室与输入室上的管路上设置有恒温加热装置，可保证恒温、恒流灌流，维持标本细胞生理活性。在本实施例中，连接中心小室与输入室上的管路上设置有氧气进入缓冲腔，可保证恒流、氧饱和灌流，维持标本细胞生理活性。在本灌流槽的中心小室与两侧的输入室和输出室之间通过底部的设计的导流通道进行连通，使药物可以迅速作用于标本，且不影响中间小室内液体稳定性，可以保证新鲜灌流液彻底能够进入中间小室。通过两侧小室的缓冲，能够克服液体表面张力，保证中间小室内的容积稳定在300uL。使用本装置时，将组织切片或培养细胞置于中间小室内的盖玻片上。液体由灌流槽的左侧输入室进入，经底部的两条设计暗槽充满中间小室，进而流入右侧输出室。在右侧输出室边缘放置内径1.5mm的玻璃毛细管引流输出灌流液。待液体在三个小室持续充灌切流动稳定后，中间小室内液体容积可控制在300uL。由于三个小室以底部流通液体，可以确保在流速相对较小、组织细胞外液容量小的情况下，仍旧可以快速、彻底地更换液体，不留死腔。灌流槽是一个开放的系统，尤其可以适合于单细胞、脑片的膜片钳及其它电生理实验。在与电生理相关的实验中，灌流槽所应用的三小室换液系统，可减小细胞槽内的离子干扰以及灌流液体液面不稳定产生的干扰。实验记录中的参考电极放在右侧的输出室内，靠近收集液，也可减少参考电极极化电压引入的漂移。图4A和图4B为显微镜适配单元的主剖视图，显微镜适配单元为外形与显微镜载物台上的预留孔形状匹配，中间放置灌流槽，使本系统适合各种显微镜载物台以及电生理实验需要的加宽固定载物台。图本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽，其特征在于：包括中心小室和分别连接于中心小室两侧的输入室和输出室，中心小室、输入室、输出室相互独立且输入室与中心小室连接，中心小室与输出室连通，所述中心小室两侧各设置有一由中心小室边缘向外延伸形成的斜面。

【技术特征摘要】
1.一种适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽，其特征在于：包括中心小室和分别
连接于中心小室两侧的输入室和输出室，中心小室、输入室、输出室相互独立且输入室与中心
小室连接，中心小室与输出室连通，所述中心小室两侧各设置有一由中心小室边缘向外延伸形
成的斜面。
2.根据权利要求1所述的适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽，其特征在于：所
述斜面向斜上方向延伸。
3.根据权利要求2所述的适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽，其特征在于：所
述斜面与中心小室边缘的夹角为45°。
4.根据权利要求1所述的适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽，其特征在于：所
述中心小室底部设置有盖玻片。
5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈鹏慧，
申请(专利权)人：中国人民解放军第三军医大学，
类型：新型
国别省市：重庆;50