一种铁皮石斛的复合菌剂制造技术

本发明专利技术属于生物菌肥技术领域，具体涉及一种铁皮石斛的复合菌剂，包括根内放线菌的分离纯化，拮抗放线菌的筛选，促生菌根真菌的放线菌筛选，促生放线菌种属地位确定，优化菌根真菌协同放线菌促进铁皮石斛无性苗生长的复合菌剂。本发明专利技术利用铁皮石斛菌根真菌协同其根内放线菌得到的复合菌剂，能够刺激铁皮石斛细胞产生高效的防御能力，增强铁皮石斛自身修复、抗病性、抵抗极端环境及提高其无性苗成活率能力，促进铁皮石斛无性苗的生长，为规模化生产优质铁皮石斛种苗提供技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物菌肥
，具体涉及一种铁皮石斛的复合菌剂。
技术介绍
铁皮石斛是兰科石斛属多年生附生植物，在医药领域的研究与开发方面应用广泛。现代医学研究表明，铁皮石斛具有滋肺清热、滋阴养胃、清肝明目、抵抗癌症、降低血糖等药用功效。作为养生保健的极品，铁皮石斛被历代医学家所推崇。目前由于铁皮石斛的自然繁殖率低，对环境条件要求较严格，产区药农长期采挖等因素导致自然资源已濒临灭绝。而铁皮石斛又因为种子微小，没有胚乳，因此自然条件下不利于获得大批量铁皮石斛幼苗。当前，石斛组织培养体系已成功建立，可大量繁殖石斛无性苗，但无性苗移栽成活率低、生长缓慢、生长周期长等问题。
技术实现思路
解决上述技术问题，本专利技术提出了一种铁皮石斛的复合菌剂，采用铁皮石斛菌根真菌与根内放线菌协同作用促进其无性苗生长，即放线菌兰斯基链霉菌（Streptomyceskrainskii）与菌根真菌瘤菌根菌属（Epulorhizasp.）和胶膜菌属（Tulasnellasp.）协同促进铁皮石斛无性苗生长。其技术方案为：一种铁皮石斛的复合菌剂，（1）根内放线菌的分离纯化：A．选取健康新鲜铁皮石斛营养根系，将根样用纱布本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种铁皮石斛的复合菌剂，其特征在于，其制作工艺按照以下步骤进行：（1）根内放线菌的分离纯化：A．选取健康新鲜铁皮石斛营养根系，将根样用纱布包好经流动自来水冲洗干净；B．置于75%乙醇中消毒20s，无菌水冲洗2‑3次，再用0.1%升汞溶液消毒20s，无菌水冲洗4‑5次，使用灭菌滤纸将根样表面水分吸干；C．设置空白对照试验，即用消毒完的根样置于高氏一号培养基上滚动数次；D．将表面已消毒根样，置于超净工作台中研磨成匀浆，微波处理30S，混匀后分别稀释成10‑1、10‑2、10‑3根样稀释液，分别接种于高氏一号、TWYE、YIM38#三种培养基平板中，置于28℃恒温培养箱中倒置培养7‑15天；E．对照...

【技术特征摘要】
1.一种铁皮石斛的复合菌剂，其特征在于，其制作工艺按照以下步骤进行：（1）根内放线菌的分离纯化：A．选取健康新鲜铁皮石斛营养根系，将根样用纱布包好经流动自来水冲洗干净；B．置于75%乙醇中消毒20s，无菌水冲洗2-3次，再用0.1%升汞溶液消毒20s，无菌水冲洗4-5次，使用灭菌滤纸将根样表面水分吸干；C．设置空白对照试验，即用消毒完的根样置于高氏一号培养基上滚动数次；D．将表面已消毒根样，置于超净工作台中研磨成匀浆，微波处理30S，混匀后分别稀释成10-1、10-2、10-3根样稀释液，分别接种于高氏一号、TWYE、YIM38#三种培养基平板中，置于28℃恒温培养箱中倒置培养7-15天；E．对照空白培养基若无菌落生成，则表明根样表面消毒合格，将分离出的放线菌菌落挑出，多次纯化，得到放线菌菌株，置于4℃冰箱中保存备用；（2）拮抗放线菌的筛选：A．采用平板对峙法，将供试铁皮石斛病原真菌极细链格孢菌、砖红镰孢菌、层出镰孢菌、灰葡萄孢菌、齐整小核菌接种于PDA培养基中，28℃恒温培养5天，打取直径5mm的病原菌菌块接种于高氏一号培养皿中央，在同一水平线上，与病原菌同等距离的位置两侧，接种同等大...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁雅迪，范志伟，岳健，苏娟，李昆华，李锋，
申请(专利权)人：云南山里红生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：云南;53