口腔鳞状细胞癌生物标记物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了口腔鳞状细胞癌生物标记物及其应用，所述生物标记物为XIRP2，实验证明，XIRP2基因在口腔鳞状细胞癌组织中表达上调，沉默XIRP2基因可以降低该基因的转录和翻译，抑制口腔鳞状细胞癌细胞的过度增殖。本发明专利技术提供了该基因或其表达产物在诊治口腔鳞状细胞癌中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，涉及一种在口腔鳞状细胞癌生物标记物及其应用，具体的涉及在口腔鳞状细胞癌显著上调的XIRP2的应用。
技术介绍
口腔恶性肿瘤是一类严重威胁人类健康的疾病。在口腔恶性肿瘤中，口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma，OSCC)比例约占90％。与其他肿瘤的发生一样，OSCC的发生发展是一个多基因，多分子呈网络结构，多步骤、多阶段共同作用的长期复杂过程。各肿瘤基因、分子之间相互协同作用促使肿瘤细胞形成和发展。目前肿瘤的发生机制及治疗均未取得重大突破，如何早期检测肿瘤病损及根治是现代肿瘤工作者难题及机遇。肿瘤是一种分子水平的疾病，从基因蛋白水平进行肿瘤的研究是最终途径。近年在整体水平上以高通量分子扫描手段为基础的基因组学、蛋白质组学以及计算机辅助设计等技术的整合及相互关联的“技术链”的应用等为肿瘤的研究提供了新的契机，并且已经在乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌、黑色素瘤等的研究中取得了丰硕的成果。其中基因表达谱芯片是最典型的代表，通过基因表达谱芯片可以检测和筛选肿瘤组织与正常组织的差异基因以及癌基因、抑癌基因的变化及变化关系，从中寻找病因，为早期诊断及根治提供线索和依据。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种口腔鳞状细胞癌的生物标记物，灵敏和特异性的实现口腔鳞状细胞癌的诊断和治疗。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了XIRP2基因在制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品中的应用。进一步，所述产品包括通过芯片、印迹法、RT-PCR、实时定量PCR、FISH法、CGH法或阵列CGH法、亚硫酸氢盐测序法、COBRA法检测XIRP2基因的变化以诊断口腔鳞状细胞癌的产品。其中，印迹法包括Northern、Southern、Western印迹法。Southern印迹法是将从样本得到的基因组DNA分离并固定，通过检测DNA与XIRP2基因的杂交来测定样本中的XIRP2基因；Northern印迹法是一种将由样本中获得的mRNA分离、固定，通过检测mRNA与XIRP2基因的杂交来检测该基因的mRNA；Western印迹法是一种将样本中的蛋白分离、固定，通过检测抗体与XIRP2蛋白的免疫反应来分析基因的表达程度。其中，所述用RT-PCR诊断口腔鳞状细胞癌的产品至少包括一对特异扩增XIRP2基因的引物；所述用实时定量PCR诊断口腔鳞状细胞癌的产品至少包括一对特异扩增XIRP2基因的引物。进一步，所述用实时定量PCR诊断管鳞癌的产品至少包括的一对特异扩增XIRP2基因的引物序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。本专利技术提供了一种诊断口腔鳞状细胞癌的产品，所述产品能够通过检测样本中XIRP2基因的表达水平来诊断口腔鳞状细胞癌。进一步，所述产品包括芯片、试剂盒或制剂。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测XIRP2基因转录水平的针对XIRP2基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的XIRP2蛋白的特异性抗体；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测XIRP2基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括XIRP2蛋白的特异性抗体。本专利技术所述的基因芯片或基因检测试剂盒可用于检测包括XIRP2基因在内的多个基因(例如，与口腔鳞状细胞癌相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白芯片或蛋白免疫检测试剂盒可用于检测包括XIRP2蛋白在内的多个蛋白质(例如与口腔鳞状细胞癌相关的多个蛋白质)的表达水平。将口腔鳞状细胞癌的多个标志物同时进行检测，可大大提高口腔鳞状细胞癌诊断的准确率。本专利技术提供了XIRP2基因在制备治疗口腔鳞状细胞癌的药物组合物中的应用。进一步，所述药物组合物包括XIRP2基因和/或其表达产物的抑制剂。所述抑制剂包括抑制XIRP2基因表达的物质、抑制XIRP2基因表达产物稳定性的物质、和/或抑制XIRP2基因表达产物活性的物质。进一步，所述抑制剂是针对XIRP2基因的siRNA、针对XIRP2蛋白的抗体；优选的，所述抑制剂为siRNA。在本专利技术的具体实施方式中，所述针对XIRP2基因的siRNA的序列如SEQIDNO.9和SEQIDNO.10所示。本专利技术还提供了一种治疗口腔鳞状细胞癌的药物组合物，所述药物包含XIRP2基因和/或其表达产物抑制剂。所述抑制剂包括抑制XIRP2基因表达的物质、抑制XIRP2基因表达产物稳定性的物质、和/或抑制XIRP2基因表达产物活性的物质。本专利技术还提供了一种抑制细胞增殖的方法，所述方法是将针对XIRP2基因的siRNA、shRNA、反义寡核苷酸或功能缺失型基因在体外导入到肿瘤细胞中。本专利技术提供了一种组合药物，所述组合药物包括上述的药物组合物、和含抗肿瘤剂的药物组合物。进一步，抗肿瘤剂的药物组合物包括但不限于免疫治疗剂如西妥昔单克隆抗体，化学治疗剂或化学放射性治疗剂如卡波铂或者是一种相关类别的铂类药物、紫杉烷或者是一种类别的紫衫烷，或者是两者。本专利技术的优点和有益效果：本专利技术首次发现了与口腔鳞状细胞癌发生发展相关的生物标记物—XIRP2，通过检测受试者XIRP2的变化，来实现口腔鳞状细胞癌的早期诊断。本专利技术提供了治疗口腔鳞状细胞癌的分子靶标，通过靶向于分子标志物来治疗疾病具有敏感性和特异性。本专利技术对口腔鳞状细胞癌的机制研究提供了一定的理论基础。附图说明图1显示利用QPCR检测XIRP2基因在口腔鳞状细胞癌组织中的表达情况；图2显示利用QPCR检测XIRP2基因在口腔鳞状细胞癌细胞中的表达情况；图3显示利用QPCR检测siRNA对XIRP2基因表达的影响；图4显示MTT法检测XIRP2对口腔鳞状细胞癌细胞增殖活性的影响；图5显示利用transwell小室检测XIRP2基因对口腔鳞状细胞癌细胞侵袭的影响。具体的实施方式本专利技术首次发现了XIRP2与口腔鳞状细胞癌的发生发展相关，并验证了XIRP2在口腔鳞状细胞癌中高表达。XIRP2可作为口腔鳞状细胞癌的独立预测因子，也可以和其他的基因标志物联合应用。本专利技术中术语“生物标记物”是其在组织或细胞中的表达水平与正常或健康细胞或组织的表达水平相比发生改变的任何基因或蛋白。本领域技术人员将认识到，本专利技术的实用性并不局限于对本专利技术的标志物基因的任何特定变体的基因表达进行定量。作为非限制性的实例，标志物基因可具有SEQIDNO.1或SEQIDNO.2指定的编码序列或氨基酸序列。在一些实施方案中，其具有与所列的序列至少85％相同或相似的cDNA序列或氨基酸序列，诸如上述所列的序列至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％相同或相似的cDNA序列或氨基酸序列。本文所述的生物标记物包括基因和蛋白。此类生物标记物包括含有编码生物标记物的核酸序列或此序列的互补序列的完整或部分序列的DNA。生物标记物核酸还包括含有所关注的任何核酸序列的完整或部分序列的RNA。生物标记物蛋白是由本专利技术的DNA生物标记物编码的或对应于本专利技术的DNA生物标记物的蛋白。生物标记物蛋白包含任何生物标记物蛋白或多肽的完本文档来自技高网...

【技术保护点】
XIRP2基因在制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.XIRP2基因在制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括通过芯片、印迹法、RT-PCR、实时定量PCR、FISH法、CGH法或阵列CGH法、亚硫酸氢盐测序法、COBRA法检测XIRP2基因的变化以诊断口腔鳞状细胞癌的产品。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断口腔鳞状细胞癌的产品至少包括一对特异性扩增XIRP2基因的引物，所述引物如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。4.一种诊断口腔鳞状细胞癌的产品，其特征在于，所述产品能够通过检测样本中XIRP2基因的变化来诊断口腔鳞...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋宏涛，马翠，任静，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11