用于口腔炎症的测定制造技术

用于测定口腔炎症诸如牙龈炎或牙周炎的存在或严重性的方法和试剂盒，其中所述测定方法包括：(a)从所述受试者中获得口腔材料的试验样品；(b)测定所述试验样品中多形核中性粒细胞指示物质的量；和(c)将所述试验样品中的多形核中性粒细胞指示物质的量与对照样品进行比较。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
口腔组织炎症可以由手术、局部损伤、创伤、坏死、不适当的口腔卫生或各种系统性起源引起。牙龈(牙床)是围绕牙齿的口腔衬里的软组织的一部分。牙龈炎是牙床的炎症，常表现为肿胀、红色或出血的牙床。牙龈炎是支持牙齿的牙床和牙槽骨的炎症或感染。牙周炎是与牙龈炎相比疾病的进行性恶化状态，其中牙床发炎并开始从牙齿上萎缩并形成囊袋，这最终可能导致骨和牙周韧带的破坏。通常认为，生活在口腔和牙齿表面上的菌斑形成细菌是口腔炎症(诸如牙龈炎)的原因，并且由所述细菌释放的某些物质引起口腔炎症。除其他事项之外，与口腔炎症相关的细菌产生代谢物作为废物，所述代谢物包括气体诸如硫化氢、甲基硫醇和其他含硫气体。这些气体和代谢物被认为是口臭的气味的主要促成原因之一。20世纪60年代的临床观察已经确定了累积的牙菌斑和牙龈炎的引发之间的关系。这些关系的认识在建立牙科的临床实践中是关键的，并且有助于发现用于预防性方法的治疗剂，诸如三氯生、氯己定、西吡氯铵及其他。尽管有这些进展，但是显然牙龈炎的临床测量有一些限制并且不允许检测与牙龈炎相关的最早的事件。文献中描述了关于多形核中性粒细胞(PMN)在口腔炎症病状期间的防御机制中的作用的研究(Kornman等，1997)。虽然研究主要集中在PMN在防御机制中的作用，但是缺乏在口腔中或在唾液中评价PMN的那些研究。此外，没有多少信息描述具体的口腔卫生制剂对PMN水平的效应。与大多数医学病状一样，期望早期检测口腔炎症以便开始早期治疗以避免炎症恶化。对于牙龈炎和牙周炎来说尤其如此，即当前者是不希望的病状时，其效应可以被逆转。相反，牙周炎是比牙龈炎更严重的口腔病状，其中对口腔组织的损害基本上是不可逆的。此外，用于测定世界上许多患者的口腔炎症程度的复杂因素以近似牙科护理专业的方式或由于诊断和治疗方法的成本而限制了对专业牙科护理的就诊。因此，本领域仍然需要监测患者口腔炎症状态和/或监测口腔炎症治疗进展的安全的、非侵入性的、简易的和节约成本的方法。简述已经令人惊讶地发现，受试者唾液中多形核白细胞(PMN)或PMN指示物质的量、数量或水平与所述受试者的口腔炎症的水平或程度有关。因此，本专利技术涉及在受试者中测定口腔炎症的存在、不存在或严重性或监测口腔炎症疾病状态的方法，所述方法包括(a)从所述受试者获得口腔材料的试验样品，(b)在所述试验样品中测定PMN或PMN指示物质的量，(c)将所述试验样品中PMN或PMN指示物质的量与对照比较。本专利技术的方法在护理机构点(例如诊疗椅边、牙科诊所、牙科营地等)容易实施。由于本专利技术的方法的简易、安全和非侵入性质，在一些实施方案中，所述方法可以由能够记录/报告结果的患者进行。本专利技术的适用性的其他领域将根据下文提供的详述而变得明显。应理解，详述和具体实施例虽然指示了本专利技术的优选实施方案，但是仅仅意图用于说明的目的，而不是意图限制本专利技术的范围。详述以下对优选实施方案的描述在本质上仅是示例性的，并且决不意图限制本专利技术、本专利技术的应用或用途。如全篇中所用，范围被用作描述范围内的各个和每个值的简略表达方式。可以选择范围内的任何值作为范围的终点。此外，本文中引用的所有参考文献均以引用的方式整体并入本文。如果本公开中的定义和引用的参考文献的定义出现冲突，以本公开为准。除非另外指出，否则本文和本说明书中其他地方表述的所有百分比和量都应理解为重量百分比。除非另有特别说明，否则本文表述的所有百分比均基于干物质的重量。在本专利技术的上下文中，如本文所用的术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”意指逆转、缓解、减轻或抑制所述术语适用的病症或病状的进展，或者所述病症或病状的一种或多种症状。除非上下文另外明确规定，否则如本文和所附权利要求书中所用，单数形式“一个/种(a)”、“一个/种(an)”以及“所述(the)”包括复数指代物。术语“正常对照”是指没有口腔炎症的受试者或受试者群。术语“拭子”是指适于收集由吸收材料形成的口腔流体的任何装置。优选地，吸收材料附接到夹持器，但是如本文所用的术语拭子包括由吸收材料制成的独立式装置，其可以放置在口腔中或口腔表面中以吸收位于其中的唾液。术语“口腔材料”是指口腔中可以采样的任何物质，例如唾液、牙龈缝液、来自舌头或面颊的口腔刮屑、牙龈菌斑等。用于本专利技术的方法的优选口腔材料为唾液。如本文所用，“测量”或“测定”是指任何定性测定或定量测定。在本专利技术的方法中，受试者可以是任何动物，并且优选为哺乳动物，诸如人、小鼠、大鼠、猫、犬、马、牛、驴、绵羊或猪。人是最优选的。在一些方面，所述方法包括从受试者获得口腔材料(诸如唾液)的试验样品。唾液可以通过本领域中合适的任何方式来获得。例如，本领域已知的并且可商购获得的各种口腔流体收集装置和试剂盒。口腔流体收集装置可以包括，或换句话讲成型或形成为颗粒、纤维、板等。唾液可以通过抽吸或吸收进行收集。合适的口腔流体收集装置可从OasisDiagnosticsCorp.、Vancouver、WA，诸如Super-SALTM、和UltraSal-2TM处商购获得。在一些方面，口腔材料(例如唾液)通过诸如拭子的装置获得。拭子可以由本领域中合适的任何材料构成，诸如藻酸盐、海绵、毛细管基质、滤纸、钙纤维、基于纤维素的材料或合成聚合物(诸如聚氨酯、聚酯、人造丝或乙二醇和对苯二甲酸的聚合物)。以商品名(DuPont)出售的乙二醇和对苯二甲酸的聚合物(即聚对苯二甲酸乙二酯)特别适用于本专利技术。优选拭子不含有棉花或其他天然的基于纤维素的材料，因为棉花可能被来自棉花植物生长的土壤中的金属污染，从而潜在地污染测定并产生不准确的或假阳性的结果。拭子的吸收材料可以用盐或高渗溶液浸渍以促进吸收。吸收材料也可以用调味剂浸渍以使得采样对受试者更舒适。拭子可以在由塑料、木材、铝等(其中优选合成材料诸如塑料)制成的夹持器或敷药器的端部上。然后将拭子置于水溶液中，优选无菌溶液和缓冲溶液。拭子可以进行旋动、涡旋等以将PMN和/或其衍生物或组分从拭子材料中移出到水溶液中。在另一个实施方案中，唾液通过咳出获得。例如，受试者用水溶液(优选无菌的和/或缓冲的水溶液)冲洗口腔。缓冲溶液的实例包括Hanks平衡盐溶液、磷酸盐缓冲盐水、TRIS缓冲液等。然后将口腔中的内容物(即唾液样品)咳出到容器中(优选无菌的容器)。可以通过本领域已知的常规技术，例如通过细胞计数器、显微镜等，在样品中测定PMN的数量。如果使用显微镜，则可以例如通过离心、过滤等将唾液样品浓缩，然后重悬浮。常规的或荧光的细胞染色剂，诸如吖啶橙等可以用于染色PMN以使得它们更易看见。在一个实施方案中，PMN的数量可以通过论文：BenderJS，ThangH，GlogauerM，(2006)“Novelrinseassayforthequantificationoforalneutrophilsandthemonitoringofchronicperiodontaldisease”，J.PeriodontalRes.2006，41：214-220(以引用的方式并入本文)中公开的方法来测定。从受试者收集唾液所需的时间可以变化。在一些方面，口腔流体收集装置或缓冲溶液在受试者的口中保持至少约5秒，或至少约10本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于在受试者中检测口腔炎症的存在、不存在或严重性或监测所述口腔炎症疾病状态的方法，所述方法包括(a)从所述受试者获得口腔材料的试验样品，(b)在所述试验样品中测定多形核中性粒细胞指示物质的量，(c)将所述试验样品中所述多形核中性粒细胞指示物质的量与对照样品比较。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于在受试者中检测口腔炎症的存在、不存在或严重性或监测所述口腔炎症疾病状态的方法，所述方法包括(a)从所述受试者获得口腔材料的试验样品，(b)在所述试验样品中测定多形核中性粒细胞指示物质的量，(c)将所述试验样品中所述多形核中性粒细胞指示物质的量与对照样品比较。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述对照样品是来自健康受试者或来自多个健康受试者的样品。3.根据权利要求1-2所述的方法，其中所述口腔材料为唾液。4.根据权利要求1-3所述的方法，其中相对于所述对照样品多形核中性粒细胞指示物质的量的增加指示口腔炎症的存在。5.根据前述权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述试验样品中增加水平的多形核中性粒细胞指示物质指示无效的口腔炎症治疗，而所述试验样品中减少水平的多形核中性粒细胞指示物质指示有效的口腔炎症治疗。6.根据前述权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述口腔炎症为牙龈炎。7.根据前述权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述口腔炎症为牙周炎。8.根据前述权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述口腔炎症的相关病状为口臭。9.根据前述权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述试验样品用拭子获得。10.根据前述权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述试验样品通过咳出获得。11.根据前述权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述多形核中性粒细胞指示物质为乳铁蛋白。12.根据前述权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述多形核中性粒细胞指示物质为白细胞酯酶。13.根据前述权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述多形核中性粒细胞指示物质为钙卫蛋白。14.根据前述权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述口腔材料与含有用于测定多形核中性粒细胞指示物质的存在或量的试剂的吸收材料接触。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述吸收材料为条或在试纸条中。16.一种用于在确定患有权利要求1中的口腔炎症的受试者中选择治疗方案的方法，所述方法包括(a)从所述受试者获得口腔材料(诸如唾液)的试验样品，(b)在所述试验样品中测定多形核中性粒细胞或多形核中性粒细胞指示物质的量，(c)将所述试验样品中多形核中性粒细胞或多形核中性粒细胞指示物质的量与对照比较，(d)基于步骤(c)中完成的所述比较选择治疗方案。17.根据权利要求16所述的方法，其包括施用治疗有效量的洁齿剂组合物的受试者的另外的步骤。18.根据权利要求16或17所述的方法，其中所述洁齿剂组合物包含选自由抗微生物剂、抗炎剂、氟化物离子源、碱性氨基酸及其混合物组成的组的活性剂。19.根据权利要求16-18中任一项所述的方法，其中所述治疗方案选自每天刷牙两次、每天刷牙多于两次、用抗炎剂治疗所述受试者、用抗微生物剂治疗所述受试者，或其组合。20.根据权利要求16-19中任一项所述的方法，其中所述抗微生物剂选自由卤化二苯醚、三氯生、草药提取物、精油、迷迭香提取物、百里酚、薄荷醇、桉树脑、水杨酸甲酯、双胍防腐剂、氯己定、阿来西定、奥替尼啶...

【专利技术属性】
技术研发人员：普雷姆·斯里尼瓦桑，
申请(专利权)人：高露洁棕榄公司，
类型：发明
国别省市：美国;US