复合菌法提取剑麻皂素和/或海柯吉宁的方法技术

本发明专利技术公开了采用复合菌法提取剑麻皂素和/或海柯吉宁的方法，首先利用果胶酶和纤维素酶水解龙舌兰属植物麻渣中的果胶，在降低麻渣的粘度的同时将麻渣中的皂苷释放出来，然后再利用霉菌组合在发酵后所产生的复合酶有效地降解被释放出来的皂苷。该方法既可用于从麻渣中提取剑麻皂素或海柯吉宁，还可用于从麻渣中同时提取剑麻皂素或海柯吉宁，且具有操作简单，提取条件温和，对环境污染小，产品收率和纯度高，成本低廉等优点。

Extraction method of ticogenin and / or Ke Kerling compound bacteria by sea

The invention discloses a method for extracting ticogenin and / or sea by composite bacteria method Ke Kerling, firstly the pectin and cellulase hydrolysis of Agave dregs in, will be released in reducing saponin dregs dregs viscosity at the same time, saponin compound enzyme and then using fungus combinations generated after fermentation the effective degradation is released. This method can be used for the extraction of ticogenin Kerling residue from sea or Ke, also can be used for the simultaneous extraction of ticogenin Ke Kerling from residue or sea, and has the advantages of simple operation, mild extraction conditions, small environmental pollution, high yield and purity of products, low cost etc..

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药原料生产领域，具体涉及提取剑麻皂素和/或海柯吉宁的方法。
技术介绍
剑麻，又称菠萝麻、西纱尔麻、龙舌兰麻，是龙舌兰科龙舌兰属植物。据统计，2010年末我国剑麻种植面积2.05万公顷，收获面积1.83万公顷，总产纤维4.63万吨。剑麻中干纤维重量占全株6％左右，其他90％以上是叶汁、叶渣、麻茎、花轴。目前剑麻最主要的用途是抽取剑麻纤维，在加工过程中会产生的大量麻渣，成为废弃物不仅造成资源浪费，而且会造成环境污染。为了解决此问题，国内的科学研究者做了大量工作，包括从麻渣中提取剑麻皂素(又称替告吉宁，替告皂甙元)和海柯吉宁(又称海柯皂甙元，番麻皂素)。剑麻皂素和海柯吉宁(具体结构分别如下式所示)都含有甾体骨架成分，是半合成甾体药物的重要原料。剑麻皂素主要用于合成哺乳动物性信息素雄甾烯酮和雄甾烯醇，皮质激素氢化可的松、地塞米松及倍他米松，蛋白同化激素、抗心律失常药、抗肿瘤药环硫雄醇，口服避孕药双炔失碳酯，骨骼肌松弛药哌库溴铵等甾体药物。龙本文档来自技高网...

【技术保护点】
复合菌法提取剑麻皂素和/或海柯吉宁的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取龙舌兰属植物或其麻渣，加水，调pH至3‑6，加入果胶酶和纤维素酶，搅拌反应后得到清液1；(2)将菌种分别接种于培养液中，发酵结束后，将发酵液与清液1混匀，搅拌反应，静置，去除上层清液，将下层离心，去除上层清液，得到沉淀物1，收集此步骤所得清液高温灭菌后弃去；(3)将沉淀物1与生石灰混匀，加入75‑95％的乙醇水溶液，加热回流后，加入活性炭，回流后，离心，弃去沉淀，得到清液2；(4)在清液2中加入强碱，搅拌溶解后，加入盐酸羟胺，加热回流后，离心得清液3和沉淀物2；以及(5)将清液3结晶，干燥得到剑麻皂素；和/或(6)将沉...

【技术特征摘要】
1.复合菌法提取剑麻皂素和/或海柯吉宁的方法，其特征在于，包括如
下步骤：
(1)取龙舌兰属植物或其麻渣，加水，调pH至3-6，加入果胶酶和
纤维素酶，搅拌反应后得到清液1；
(2)将菌种分别接种于培养液中，发酵结束后，将发酵液与清液1混
匀，搅拌反应，静置，去除上层清液，将下层离心，去除上层清液，得到
沉淀物1，收集此步骤所得清液高温灭菌后弃去；
(3)将沉淀物1与生石灰混匀，加入75-95％的乙醇水溶液，加热回
流后，加入活性炭，回流后，离心，弃去沉淀，得到清液2；
(4)在清液2中加入强碱，搅拌溶解后，加入盐酸羟胺，加热回流后，
离心得清液3和沉淀物2；以及
(5)将清液3结晶，干燥得到剑麻皂素；和/或
(6)将沉淀物2与至少85％的乙醇水溶液和0.5-1.5mol/L的盐酸水溶
液混匀，回流后，重结晶，干燥得到海柯吉宁；
优选龙舌兰属植物为剑麻、番麻、亚洲马盖麻、假菠萝麻、无刺番麻，
最优选为剑麻；
优选麻渣为干渣。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中：
优选龙舌兰属植物或其麻渣被粉碎成粒径为0.01-5cm的颗粒，更优选
粒径为0.1-3cm，最优选粒径为约1cm；
优选加水量为龙舌兰属植物或其麻渣重量的0.5-25倍，更优选1-10倍，
最优选2-5倍；
优选调pH至4-5，最优选约4.5；
优选用柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲溶液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液或
柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液调pH；
优选龙舌兰属植物或其麻渣:果胶酶:纤维素酶的重量比为
1:(0.001-0.2):(0.0005-0.1)，更优选为1:(0.005-0.1):(0.001-0.05)，最优选为

\t1:(0.01-0.02):(0.005-0.01)；
优选反应时间为1-12h，更优选为2-8h，最优选为4-5h。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤(2)中：
优选菌种为黑曲霉(Aspergillusniger)和米曲霉(Aspergillusoryzae)，
或者为里氏木霉(Trichordermareesei)、米曲霉(Aspergillusoryzae)和
青霉菌(Penicilliumsp.)；
优选黑曲霉或青霉菌的培养液组成为：马铃薯提取液1.0L、葡萄糖
20.0g、KH2PO43.0g、MgSO4·7H2O1.5g、维生素B10.1g、琼脂15.0g、质
量百分比为0.001-0.1％的麻汁；
优选米曲霉培养液组成为：麦芽汁1.0L、琼脂15.0g、质量百分比为
0.001-0.1％的麻汁，调节pH至4.8；
优选里氏木霉培养液组成为：马铃薯提取液1.0L、葡萄糖20.0g、琼脂
15.0g、质量百分比为0.001-0.1％的麻汁；
更优选上述培养液中麻汁的质量百分比为0.005-0.05％，最优选为约
0.01％；
优选发酵结束后发酵液中菌量为2-50mg/mL，进一步优选为
5-40mg/mL，更优选为10-30mg/mL，进一步更优选为12-20mg/mL，最优
选为约15mg/mL。
优选清液1：黑曲霉发酵液：米曲霉发酵液体积比为1:(0.5-5):(0.5-5)，
更优选为1:(0.8-3):(0.8-3)，最优选为1:(1-1.5):(1-1.5)；
优选清液1:里氏木霉发酵液:米曲霉发酵液：青霉菌发酵液体积比为

【专利技术属性】
技术研发人员：石清东，王姣，
申请(专利权)人：北京颐方生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11