一种监控携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例的方法技术

本发明专利技术公开了一种监控携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例的方法。布放BG‑Trap成蚊诱捕装置诱集白蚊伊蚊，然后回收布放的BG‑Trap成蚊诱捕装置，统计BG‑Trap成蚊诱捕装置抓到的白蚊伊蚊的雌雄蚊数，然后对雄蚊进行PCR检测，判断其是否携带库蚊沃尔巴克氏体，分别统计携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数和不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数，得到释放比例，释放比例＝携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数/不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数。本发明专利技术可以随时监测携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例，以及未携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊的密度，然后根据释放比例和密度及时调整释放量，保证较好的压制效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蚊虫防治领域，具体涉及一种监控携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例的方法。
技术介绍
：从果蝇、伊蚊和库蚊体内提取沃尔巴克氏体并成功将其导入到登革热媒介白蚊伊蚊体内，建立了稳定的携带新型沃尔巴克氏体的蚊株。携带沃尔巴克氏体的雄蚊与非携带沃尔巴克氏体雌蚊交配所产的卵不能发育。通过大量释放携带沃尔巴克氏体的雄蚊，可以使蚊子种群数量降低至不足以引起登革热流行。那么如何监测释放地区的携带沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊的压制效果呢？
技术实现思路
：本专利技术的目的是提供一种能够监测释放地区的携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例的方法。本专利技术的监控携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例的方法，其特征在于，包括以下步骤：布放BG-Trap成蚊诱捕装置诱集白蚊伊蚊，然后回收布放的BG-Trap成蚊诱捕装置，统计BG-Trap成蚊诱捕装置抓到的白蚊伊蚊的雌雄蚊数，然后对雄蚊进行PCR检测，判断其是否携带库蚊沃尔巴克氏体，分别统计携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数和不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数，得到释放比例，释放比例＝携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数/不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数。在释放比例达到或者超过5的时候，压制效果会很不错。所述的对雄蚊进行PCR检测，其库蚊沃尔巴克氏体的荧光检测引物为：wPipF:5’-GTTTGTGCAGCTAATAG-3’；wPipR:5’-GTCTGCAAGGCCTATTTCTACTG-3’。本专利技术的第二个目的是提供一种监控释放携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊的释放分区中未携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊密度的方法，其特征在于，包括以下步骤：释放携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊的释放分区中未携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊密度＝(释放量/释放比例)/总面积。所述的BG-Trap成蚊诱捕装置是一种成蚊诱捕装置。购自上海奇栋实业有限公司，其产品名称为QD-Ⅱ型成蚊诱捕器。本专利技术可以随时监测释放分区携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例，以及未携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊的密度，然后根据释放比例和密度及时调整释放量，从而保证较好的压制效果。具体实施方式：以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。实施例1：1.布放BG-Trap成蚊诱捕装置诱集白蚊伊蚊上午在第一现场沙仔的全部释放分区选择合适位置布放BG-Trap成蚊诱捕装置，选址尽量在植被茂盛、血源和栖息地附近。2.回收布放的BG-Trap成蚊诱捕装置并统计在BG-Trap成蚊诱捕装置布放24小时后回收统计诱集到的白蚊伊蚊的雌雄蚊数。需要把诱集到的雌雄蚊分别装管并标记，而且要保证每个样都是单独保存。3.对诱集到的雄蚊进行PCR检测，判断诱集到的雄蚊是否携带库蚊沃尔巴克氏体库蚊沃尔巴克氏体的PCR荧光检测引物：wPipF:5’-GTTTGTGCAGCTAATAG-3’；wPipR:5’-GTCTGCAAGGCCTATTTCTACTG-3’；反应条件为：预变性50℃5分钟；95℃15分钟、扩增94℃15秒、55℃45秒，40个循环。如果样品Ct值≤34，且曲线有明显的对数增长期，可判样品为阳性沃尔巴克雄蚊，即为携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊；如果样品Ct值>34，且曲线无明显的对数增长期，可判样品为阴性沃尔巴克雄蚊，即为不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊。4.得到释放比例分别统计携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数和不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数，得到释放比例，释放比例＝携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数/不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数。在7.25-7.26这个周期内，对BG-Trap成蚊诱捕装置诱集到的224个雄蚊进行PCR检测，结果显示携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数和不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数分别为176和48，其释放比例＝176/48＝3.7。5.计算野外密度(释放携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊的释放分区中未携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊密度)野外密度＝＝(释放量/释放比例)/总面积。在7.21-7.28这个周期内，沙仔的携带库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊总释放量为163.4万只，同时在7.25-7.26这个周期内，根据BG-Trap成蚊诱捕装置诱集到成蚊的统计结果得到释放比例是3.7，沙仔的总释放面积为250000m2，计算出野外白纹伊蚊密度＝(163.4/3.7)/25＝1.8只/m2，此野外密度即为释放携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊的释放分区中未携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊密度。为了达到很好的压制效果，经常监测释放携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊的释放分区中未携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊密度是必须的。第一现场沙仔目前全部采用本专利技术的方法，通过实验以及现场得到的数据表明，在释放比例达到或者超过5倍的时候，压制效果会很不错。因此我们会在每个释放周期统计释放比例，根据结果及时调整。运用分子生物学检测方法，可以很好地弥补用肉眼识别的不足，而且由于PCR特别灵敏，因此准确性也会大大提升。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种监控携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例的方法，其特征在于，包括以下步骤：布放BG‑Trap成蚊诱捕装置诱集白蚊伊蚊，然后回收布放的BG‑Trap成蚊诱捕装置，统计BG‑Trap成蚊诱捕装置抓到的白蚊伊蚊的雌雄蚊数，然后对雄蚊进行PCR检测，判断其是否携带库蚊沃尔巴克氏体，分别统计携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数和不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数，得到释放比例，释放比例＝携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数/不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数。

【技术特征摘要】
1.一种监控携带库蚊沃尔巴克氏体的白蚊伊蚊释放比例的方法，其特征在于，包括以下步骤：布放BG-Trap成蚊诱捕装置诱集白蚊伊蚊，然后回收布放的BG-Trap成蚊诱捕装置，统计BG-Trap成蚊诱捕装置抓到的白蚊伊蚊的雌雄蚊数，然后对雄蚊进行PCR检测，判断其是否携带库蚊沃尔巴克氏体，分别统计携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数和不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数，得到释放比例，释放比例＝携带库蚊沃尔巴克氏体的阳性雄蚊数/不携带库蚊沃尔巴克氏体的阴性雄蚊数。2.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦迎阳，钱伟，朱俭，杨刚勇，甘任贤，陈茂显，陈旭鹏，凌树燊，
申请(专利权)人：广州威佰昆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44