一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂及其制备方法技术

本发明专利技术属于生物制剂领域，本发明专利技术公开了一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂，按下列重量份的原料制成，蜡质芽孢杆菌0.1～1份；硫酸锰0.1～1份；聚谷氨酸0.001～0.1份，还公开了上述肥料增效剂的制备方法，本发明专利技术具有良好的促生、防病作用，对土壤中的根结线虫病、纹枯病、枯萎病具有良好的防治能力；本发明专利技术在聚谷氨酸、蜡质芽孢杆菌和硫酸锰复配后具有明显的协同增产、防病、抗逆效果，抗病型肥料增效剂可与肥料配合使用，提高肥料的利用率。同时，本发明专利技术具有生产简便、成本低廉和效果显著等优点，适合规模化生产，推动生态农业进程。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物制剂
，特别涉及一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂及其制备方法。
技术介绍
化肥和农药在现代农业生产中发挥至关重要的作用。但过度依赖化肥和农药已经成为农业可持续发展的瓶颈。长期大量使用化肥、农药不仅造成了大量经济损失，同时也给我们的生存环境带来诸多不良后果，如土壤板结、农产品污染、水质污染、破坏生态平衡、危害人类健康等问题。如何有效提高肥料利用率，减少化肥和农药使用量，发展绿色生态农业已成为我国农业发展中迫切需要解决的重点课题。生物技术的发展以及肥料增效剂的出现，正好迎合了这一需求。微生物用于农作物防病、增产，具有生产简便、成本低廉、效果显著、环境友好等优点，利用微生物处理农作物以达到防病增产的目的已有大量研究。从而减少肥料和农药的用量，起到效果好且绿色生态的作用。
技术实现思路
为了弥补以上不足，本专利技术提供了一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂及其制备方法，以解决上述
技术介绍
中的问题。本专利技术的技术方案为：一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂，包括下列重量份的原料制成：蜡质芽孢杆菌0.1～1份；硫酸锰0.1～1份；聚谷氨酸0.001～0.1份。作为一种优化的技术方案，包括下列重量份的原料制成：蜡质芽孢杆菌1份；硫酸锰0.4份；聚谷氨酸0.05份。作为一种优化的技术方案，还包括辅料，所述的辅料重量占组合抗病型肥料增效剂总重量的5％-40％，所述的辅料为膨润土、黄腐酸、白云石、钾长石粉、磷酸钙和碳酸钙粉中的任意一种或几种的组合。作为一种优化的技术方案，所述的聚谷氨酸平均分子量为5-3000kDa，所述聚谷氨酸为聚谷氨酸纯品、聚谷氨酸盐纯品、包含聚谷氨酸的发酵培养物、聚谷氨酸溶液、含有聚谷氨酸发酵液的可湿性粉剂中的任意一种或几种的组合。作为一种优化的技术方案，还包括肥料，所述肥料为氮肥、钾肥、磷肥、复合肥和有机肥其中的一种。本专利技术还提供一种制备所述含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂的方法，本专利技术的方案是：(1)将蜡质芽孢杆菌按如下方法制备成菌剂：将斜面保存的蜡质芽孢杆菌活化，接种于活化培养基上；挑取活化培养基上的菌种，接种于发酵培养基组中培养，得发酵液菌数达到50亿-1000亿；将菌液在冷藏箱内放置24小时，冷藏箱内温度为4℃，然后加入碳酸钙和海藻糖作为保护剂，板框压滤后得到滤饼，70℃烘干，制得蜡质芽孢杆菌菌剂；(2)取步骤(1)得到的菌剂中0.1-1重量份的蜡质芽孢杆菌菌剂与0.1-1重量份的硫酸锰和0.001-0.1重量份的聚谷氨酸混匀，得含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型增效剂。作为一种优化的技术方案，步骤(2)中添加辅料，所述的辅料重量占组合抗病型肥料增效剂总重量的5％-40％，所述的辅料为膨润土、黄腐酸、白云石、钾长石粉、磷酸钙和碳酸钙粉中的任意一种或几种组合。作为一种优化的技术方案，所述的发酵培养基组由下列重量份的原料制成，碳源10-100份；氮源1-40份；无机盐0.01-50份；水1000份。作为一种优化的技术方案，所述发酵培养基的PH值5.0-9.0。作为一种优化的技术方案，所述碳源为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、木糖、果糖、乳酸、柠檬酸、甘油、淀粉和糖蜜中的任意一种或几种的组合；作为一种优化的技术方案，所述的氮源为酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、玉米浆、豆饼粉、棉籽饼粉、尿素、(NH4)2SO4、NH4Cl、(NH4)2HPO4和NH4NO3中的任意一种或几种的组合；作为一种优化的技术方案，所述的无机盐为硫酸盐、磷酸盐、磷酸二氢盐、磷酸氢二盐和盐酸盐中的一种或几种的组合。作为一种优化的技术方案，所述步骤(2)中添加肥料，所述肥料为氮肥、钾肥、磷肥、复合肥和有机肥其中的一种。一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型增效剂的使用方式：冲施、灌根、撒施或穴施。其中：蜡质芽孢杆菌，其分类命名为蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)，菌株号为XK-4，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCCNO.12648，保藏日期为2016年6月23日，保藏单位地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。蜡质芽孢杆菌具有下述性质：1、菌落形态学特征：菌体直杆状、成链、光镜下长2.5-3.5微米，宽1微米、革兰氏反应阳性，芽孢椭圆或柱状，中生，孢囊不膨大，原生质内含有不着色颗粒，平板培养，菌落圆形，直径0.2cm，边缘整齐，稍隆起，无光泽，不透明，蜡质；液体培养，形成菌膜。2、生理与生化特性：(1)培养温度：15～45℃，最适温度为27～32℃；(2)在pH6.0～7.5范围内生长；(3)革兰氏染色：阳性；(4)VP反应：阳性；(5)淀粉水解试验：阳性；(6)硝酸盐还原反应：阳性；(7)柠檬酸利用：阳性；(8)明胶液化：阳性；(9)苯丙酸脱氨酶试验：阴性；(10)M.R.：阴性；(11)脲酶试验：阴性；(12)丙酸盐利用：阴性；3、16SrDNA序列分析：对菌株进行生理生化特征分析，并通过分子生物学技术，获得16SrRNA基因序列。将所测序列从GeneBank数据库中的相关种进行比较，构建16SrDNA全序列为基础的系统发育树。本专利技术有如下有益效果：蜡质芽孢杆菌：英文名称：Bacilluscereus，属微生物制剂，作用机理是产生大量的拮抗蛋白，能通过体内的SOD酶，调节作物细胞生长环境，维护细胞正常的生理代谢和生化反应，抑制有害病菌生长，提高抗逆性，促进作物生长，试验示范证明其对根结线虫病有良好的防治效果，并可兼治纹枯病，对枯萎病、青枯病等土传病害有较强的防治效果，蜡质芽孢杆菌的分泌物具有多种促生因子，活化土壤，能够转化有机氮、磷，分泌有机酸，降解土壤中的难溶性无机盐，分泌抗菌物质，能够改善土壤的酸碱度，一定程度上对聚谷氨酸降解酶的产生起到抑制作用，缓解了聚谷氨酸的降解速度。聚谷氨酸是一种新型肥料增效剂，由微生物发酵合成的水溶性高分子量多肽，具有良好的生物可降解性、保水性、阳离子螯合性，能够缓慢的为作物生长提供营养，能为蜡质芽孢杆菌的生存提供更为良好的生长环境，诱导芽孢的生成，促进蜡质芽孢杆菌的定殖，使菌体活性更高。Mn是蜡质芽孢杆菌生长的必需元素，适当的Mn2+浓度能够调节微生物的生理活性，可以诱导芽孢生成，并且能够调节植株SOD酶，适当Mn离子的引入，能够影响菌体生长曲线，促进芽孢的形成，使菌体活性更高。聚谷氨酸含有末端胺和多个COO-基团，氮肥的NH4+，磷肥中的PO43+、钾肥中的K+，元素肥料的Ca2+、Mg2+、Zn2+等可以直接和聚谷氨酸的羧基位点与酰胺基位点键合，形成水溶性的、稳定的聚谷氨酸盐，缓慢的为作物生长提供营养。本专利技术发挥聚谷氨酸作为肥料增效剂和土壤调理剂的作用，改良土壤结构，提高微生物成活率，提高肥料利用率，同时发挥蜡质芽孢杆菌防病、抗逆能力，通过聚谷氨酸与蜡质芽孢杆菌以及硫酸锰复合后产生协同互作效应，增产、抗病、保肥、保水、绿色无污染。本专利技术所述蜡质芽孢杆菌对根结线虫病有良好的防治效果，并可兼治纹枯病，对枯萎病、青枯病等土传病害有较强的防治效果，降低用药成本，减少环境污染。聚谷氨酸是微生物发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂，其特征在于，包括下列重量份的原料制成：蜡质芽孢杆菌 0.1～1份；硫酸锰 0.1～1份；聚谷氨酸 0.001～0.1份。

【技术特征摘要】
1.一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂，其特征在于，包括下列重量份的原料制成：蜡质芽孢杆菌0.1～1份；硫酸锰0.1～1份；聚谷氨酸0.001～0.1份。2.如权利要求1所述的一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂，其特征在于：所述的蜡质芽孢杆菌，其分类命名为蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)，菌株号为XK-4，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCCNO.12648。3.如权利要求1所述的一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂，其特征在于：还包括辅料，所述的辅料重量占组合抗病型肥料增效剂总重量的5％-40％，所述的辅料为膨润土、黄腐酸、白云石、钾长石粉、磷酸钙和碳酸钙粉中的任意一种或几种的组合。4.如权利要求1所述的一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂，其特征在于：所述的聚谷氨酸平均分子量为5-3000kDa，所述聚谷氨酸为聚谷氨酸纯品、聚谷氨酸盐纯品、聚谷氨酸的发酵培养物、聚谷氨酸溶液、含有聚谷氨酸发酵液的可湿性粉剂中的任意一种或几种的组合。5.如权利要求1所述的一种含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂，其特征在于：还包括肥料，所述肥料为氮肥、钾肥、磷肥、复合肥和有机肥其中的一种。6.一种制备如权利要求1至5任一项所述的含蜡质芽孢杆菌、硫酸锰和聚谷氨酸的组合抗病型肥料增效剂的方法，其特征在于：(1)将蜡质芽孢杆菌按如下方法制备成菌剂：将斜面保...

【专利技术属性】
技术研发人员：许宗奇，冯小海，蒋亭亭，梁金丰，詹伊婧，
申请(专利权)人：南京轩凯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32