一种利用生物技术催芽红豆杉种子的方法技术

本发明专利技术涉及利用生物技术催芽红豆杉种子的方法，可有效解决红豆杉种子发芽出苗率低，成活率低的问题，方法是，将成熟的红豆杉种子，用清水清洗干净，置入无菌室；将洗干净的种子按照重量比1︰1加入质量浓度60～65%沼液水溶液，再加入种子重量1～2%的活性生化菌和0.5～1%红糖水，搅拌均匀，25～30℃静止浸泡发酵7天；将发酵池中浸泡的红豆杉萌芽种粒捞出，在剩余菌液加入赤霉素，作为苗期缓释肥料；将苗期缓释肥料用水稀释5倍，灌溉萌芽育苗的种粒，出苗后遮荫，荫棚的透光率15%～20%，常规管理，1年后移栽。本发明专利技术方法简单，易于操作，费用低，效果好，种子发芽率高，成活率高，生态环保。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及种子培育，特别是一种利用生物技术催芽红豆杉种子的方法。
技术介绍
红豆杉是第四纪冰川后遗留下的珍稀濒危植物，其分布范围狭窄，生长缓慢，现存数量逐年减少，是国家重点保护的野生植物。红豆杉的根、茎、叶、皮中含有可提纯的紫杉醇,是集药用、材用、观赏于一身的珍稀树种，有“植物黄金”之称，具有很高的经济开发价值。紫杉醇具有高效抗癌活性，主要适用于卵巢癌和乳腺癌，对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效。紫杉醇分子结构复杂，目前尚难以实现化学合成等因素，主要依靠从红豆杉组织器官中提取，但红豆杉体内紫杉醇含量低，对红豆杉植株需求量极大，但天然红豆杉分布零散，使得紫杉醇供应问题成为限制其应用的主要因素，因此大力开展红豆杉人工栽培成为当务之急。红豆杉属植物是典型的阴性树种，对气候的变化，特别是对温度、光照和湿度的要求较严。在偏酸性、排水良好，湿润、松散、肥沃的土壤上生长良好。通过南方红豆杉种子育苗试验发现，红豆杉结种数量少、种皮厚、休眠期长达一年以上，宜秋季采后即播，春播需用经过低温层积催芽或隔年埋藏的种子，否则播后在二至三年中陆续发芽。苗木初期生长缓慢，一年生苗木高仅5～6厘米，根细长，须根较少，需留床二至三年，方可出圃移栽。由于本种耐荫性极强，且生长缓慢，幼苗发生后以适当遮荫为宜。总之，用红豆杉种子繁殖，出苗率低，种子难采，苗木保存率不高，导致苗木成本高。
技术实现思路
针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种利用生物技术催芽红豆杉种子的方法，可有效解决红豆杉种子发芽出苗率低，成活率低的问题。本专利技术解决的技术方案是，包括以下步骤：1.种子处理：将成熟的红豆杉种子，用清水清洗干净，置入无菌室；2.浸泡：将洗干净的种子按照重量比1︰1加入质量浓度60～65%沼液水溶液，再加入种子重量1～2%的活性生化菌和0.5～1%红糖水，搅拌均匀，25～30℃静止浸泡发酵7天；3.将发酵池中浸泡的红豆杉萌芽种粒捞出，在剩余菌液加入赤霉素，作为苗期缓释肥料，赤霉素在苗期缓释肥料中的重量含量为5%；4.苗圃内对红豆杉萌芽种粒进行播种育苗：将苗期缓释肥料用水稀释5倍，用于灌溉萌芽育苗的红豆杉种粒，出苗后要遮荫，幼苗怕日灼，荫棚的透光率15%～20%，然后按常规进行管理，1年后移栽。所述的活性生化菌为专利号ZL200710054677.3方法制备的多用途复合霉菌，具体是：首先以嗜纤维菌、啤酒酵母菌和龟裂链霉菌作母种，对三种母菌种进行扩殖培养，步骤是：对嗜纤维菌培养基进行常规灭菌，再将嗜纤维菌母种置入装有嗜纤维菌培养基的培殖试管中，菌种加入量按菌种对培养基重量比为1:100，嗜纤维菌培养基每1000g是由牛肉膏4～15g、蛋白胨15～20g、可溶性淀粉1～3g、食盐6～8g、琼脂18～20g和余量为水组成，嗜纤维菌母种植入培养基后，在恒温26℃、pH值为7.3下培殖84小时，繁殖成试管种，再置入培养罐内进行厌氧发酵，在18～30℃下厌氧发酵200小时待用；对啤酒酵母菌培养基进行常规灭菌，灭菌后按重量的啤酒酵母菌比啤酒酵母菌培养基为1:100的比例植入啤酒酵母菌，在26℃恒温下摇瓶培养84小时，繁扩成啤酒酵母菌试管种，所说的啤酒酵母菌培养基是由葡萄糖25～35g、酵母粉15～25g加豆汁调至1000ml组成，扩繁成的啤酒酵母菌试管种再置入培养罐内在18～30℃下厌氧发酵200小时，成为扩殖的啤酒酵母菌，备用；对龟裂链霉菌培养基进行120℃高温湿热灭菌，再将龟裂链霉菌母种置入装有已灭过菌的龟裂链霉菌培养基的培植灌内，龟裂链霉菌母种加入量为培养基重量的1/100，即重量比为1:100，pH值为7.3，恒温为26℃下培植84小时，繁殖成试管种，所说的龟裂链霉菌培养基是每1000ml的培养基是由可溶性淀粉15～25g、硝酸钾0.5～1.5g、食盐0.4～0.8g、K2HPO4.3H2O0.4～0.8g、MgSO4.7H2O0.4～0.8g、FeSO4.7H2O0.005～0.02g、琼脂15～25g和余量为水制成，pH值为7.2～7.4，配制时，先用冷水将可溶性淀粉调成糊状，再倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其它成分，充分溶解均匀后，补足水分至1000ml，繁殖成的试管种龟裂链霉菌再置入培养罐内，在18～30℃的温度下，进行厌氧发酵200小时，培殖成扩殖的龟裂链霉菌，备用；三种经厌氧发酵后扩殖的嗜纤维菌、啤酒酵母菌和龟裂链霉菌以重量1:1:1比例混配在一起组成混合菌，再置入培养罐内，加入麦麸或米糠进行扩繁，在15～3℃下进行固体扩繁240～300小时，麦麸或米糠与混合菌的重量比为100:1，固体扩繁后再放入培殖罐，在25℃恒温下发酵200小时，干燥脱水后成菌粉，含水量2.5～4%，成品包装。本专利技术方法简单，易于操作，费用低，效果好，种子发芽率高，成活率高，而且生态环保，是红豆杉种植技术上的创新。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的具体实施方式作进一步详细说明。实施例1本专利技术在具体实施中，将9月至10月采集成熟的红豆杉种子放于盆中用清水清洗干净，置入无菌室，将洗干净的种子按照重量比1︰1加入质量浓度60%沼液水溶液，再加入种子重量1%的活性生化菌和0.5%红糖水，搅拌均匀，30℃静止浸泡发酵7天。实施例2本专利技术在具体实施中，将9月至10月采集成熟的红豆杉种子放于盆中用清水清洗干净，置入无菌室，将洗干净的种子按照重量比1︰1加入质量浓度65%沼液水溶液，再加入种子重量2%的活性生化菌和1%红糖水，搅拌均匀，25℃静止浸泡发酵7天。按实施例1～2所述，对红豆杉种子预处理后，
技术实现思路
部分的播种技术如下，即：1）每年9月至10月采集成熟的红豆杉种子，放于盆中用清水清洗干净后运入无菌室；2）种子放进不锈钢容器内，按照重量比1︰1加入质量浓度60～65%沼液水溶液，再加入种子重量1～2%的活性生化菌和0.5～1%红糖水，搅拌均匀，25～30℃静止浸泡发酵7天；3）将发酵池中浸泡的红豆杉萌芽种粒捞出，在剩余菌液加入赤霉素，作为苗期缓释肥料，赤霉素在苗期缓释肥料中的重量含量为5%；4）苗圃内对红豆杉萌芽种粒进行播种育苗，将前一阶段配置的苗期缓释肥料稀释5倍后，用于灌溉上述育苗的红豆杉种粒，出苗后要遮荫，幼苗怕日灼，荫棚的透光率15%～20%，然后按传统水肥管理，1年后移栽。用本专利技术处理红豆杉种子，播种实验表明：未经该工艺处理的红豆杉种子播种后的发芽率仅为50%；而经该工艺处理的红豆杉种子播种后的发芽率可达到96%，成活率达99%以上。本专利技术的创新之处在于：首次采用废弃沼液，活性菌技术对红豆杉种子催芽育苗，提高种子育苗的发芽率和成活率，是红豆杉种植技术上的创新。本专利技术与现有技术相比，具有以下优点：1.发芽率和成活率高采用本专利技术对红豆杉种子进行催芽育苗，活性生化菌产生的有效成分可以在快速解除种子休眠，而沼液富含多种营养成分，为种子后期萌发提供了营养储备，大大提高了育苗的发芽率和成活率，同时活性生化菌和沼液能够有效杀灭种子中潜伏的各种病原物，减轻了后期病虫害的发生，增加了育苗成功率。种子外层的果皮和果肉经发酵携带一定量的活性生化菌也可促进萌芽，抵御病虫害侵染。2.成本低，操作简单本专利技术实施种所需原料，成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用生物技术催芽红豆杉种子的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）种子处理：将成熟的红豆杉种子，用清水清洗干净，置入无菌室；（2）浸泡：将洗干净的种子按照重量比1︰1加入质量浓度60～65%沼液水溶液，再加入种子重量1～2%的活性生化菌和0.5～1%红糖水，搅拌均匀， 25～30℃静止浸泡发酵7天；（3）将发酵池中浸泡的红豆杉萌芽种粒捞出，在剩余菌液加入赤霉素，作为苗期缓释肥料，赤霉素在苗期缓释肥料中的重量含量为5%；（4）苗圃内对红豆杉萌芽种粒进行播种育苗：将苗期缓释肥料用水稀释5倍，用于灌溉萌芽育苗的红豆杉种粒，出苗后要遮荫，幼苗怕日灼，荫棚的透光率15%～20%，然后按常规进行管理，1年后移栽。

【技术特征摘要】
1.一种利用生物技术催芽红豆杉种子的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）种子处理：将成熟的红豆杉种子，用清水清洗干净，置入无菌室；（2）浸泡：将洗干净的种子按照重量比1︰1加入质量浓度60～65%沼液水溶液，再加入种子重量1～2%的活性生化菌和0.5～1%红糖水，搅拌均匀，25～30℃静止浸泡发酵7天；（3）将发酵池中浸泡的红豆杉萌芽种粒捞出，在剩余菌液加入赤霉素，作为苗期缓释肥料，赤霉素在苗期缓释肥料中的重量含量为5%；（4）苗圃内对红豆杉萌芽种粒进行播种育苗：将苗期缓释肥料用水稀释5倍，用于灌溉萌芽育苗的红豆杉种粒，出苗后要遮荫，幼苗怕日灼，荫棚的透光率15%～20%，然后按常规进行管理，1年后移...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩雪梅，董冰雪，陈吉宝，李雪晖，李玉英，牛秋红，谢琳，曹明军，
申请(专利权)人：南阳师范学院，
类型：发明
国别省市：河南;41