一种优化型HLA-I类转基因小鼠的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种优化型HLA-I转基因小鼠的构建方法。本发明专利技术提供了一种构建抗原提呈能力增强的HLA-I转基因小鼠模型的方法，包括如下步骤：构建hTAP双转基因小鼠；将HLA-I转基因小鼠与hTAP小鼠进行交配，所得双转基因后代即为抗原提呈能力增强的HLA-I转基因小鼠模型；所述hTAP转基因小鼠为转入了如下基因的小鼠：人源TAP1基因、人源TAP2基因、人源PSMB8基因和人源PSMB9基因。本发明专利技术繁育出的HLA-I/hTAP双转基因小鼠，与HLA-I单转基因小鼠相比，对抗原提呈的能力增强。可见，hTAP转基因小鼠有助于HLA-I转基因小鼠HLA-I的抗原提呈能力并增强CTL反应。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及一种优化型HLA-I类转基因小鼠的构建方法,特别涉及一种提高HLA-I转基因小鼠HLA-I分子抗原提呈能力的方法。
技术介绍
MHC I类分子的抗原提呈途径包括三个阶段：抗原肽段的产生、肽段转运到内质网、肽段与MHC I类分子的结合和展示。首先，抗原蛋白在细胞浆中被蛋白酶体降解成3-22个残基的短肽。这些短肽经过热休克蛋白HSP90的进一步修剪，由抗原提呈相关转运蛋白(transporter associated with antigen presentation，TAP)选择性地转运至粗面内质网(rough endoplasmic reticulum，RER)腔内。在RER内，分子伴侣钙联蛋白(calnexin，CNX)促进游离的MHC I重链的折叠，并且募集另一分子伴侣ERp57促进MHC I类分子结构域中二硫键的形成；随后，β2-微球蛋白(β2m)与MHC I重链结合，CNX解离，MHC I与分子伴侣钙网蛋白(calreticulin，CRT)结合。当TAP相关蛋白Tapasin(TAP-associated glyprotein)把TAP转运本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种构建抗原提呈能力增强的HLA‑I转基因小鼠模型的方法，包括如下步骤：构建hTAP转基因小鼠；将所述hTAP转基因小鼠与HLA‑I转基因小鼠进行交配，所得后代中的双转基因小鼠即为抗原提呈能力增强的HLA‑I转基因小鼠模型；所述hTAP转基因小鼠为转入了如下基因的小鼠：人源TAP1基因、人源TAP2基因、人源PSMB8基因、人源PSMB9基因。

【技术特征摘要】
1.一种构建抗原提呈能力增强的HLA-I转基因小鼠模型的方法，包括如下步骤：构建hTAP转基因小鼠；将所述hTAP转基因小鼠与HLA-I转基因小鼠进行交配，所得后代中的双转基因小鼠即为抗原提呈能力增强的HLA-I转基因小鼠模型；所述hTAP转基因小鼠为转入了如下基因的小鼠：人源TAP1基因、人源TAP2基因、人源PSMB8基因、人源PSMB9基因。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述hTAP转基因小鼠还被转入了人源HLA-DOB基因和人源HLA-DMB基因。3.根据权利要求1或2所述的方法，所述人源TAP1基因的核苷酸序列为序列表中的序列1；所述人源TAP2基因的核苷酸序列为序列表中的序列2；所述人源PSMB8基因的核苷酸序列为序列表中的序列3；所述人源PSMB9基因的核苷酸序列为序列表中的序列4。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述HLA-DOB基因的核苷酸序列为序列表中的序列5；所述HLA-DMB基因的核苷酸序列为序列表中的序列6。5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述hTAP转基因小鼠是按照包括如下步骤的方法制备得到的：(1)将RP11-10A19BAC质粒注射到由目的小鼠1的精子和目的小鼠2的卵子形成的受精卵的原核中，将处理后的所述受精卵移植入代孕母鼠中发育，出生后得到F0代嵌合...

【专利技术属性】
技术研发人员：周旭宇，张建华，张伟，黄满，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11