检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂制造技术

本发明专利技术公开了检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂。本发明专利技术公开的成套试剂由SEQ ID No.1所示的HPV16‑FIP、SEQ ID No.2所示的HPV16‑BIP、SEQ ID No.3所示的HPV16‑F3、SEQ ID No.4所示的HPV16‑B3、SEQ ID No.5所示的HPV18‑FIP、SEQ ID No.6所示的HPV18‑BIP、SEQ ID No.7所示的HPV18‑F3和SEQ ID No.8所示的HPV18‑B3组成。实验证明，本发明专利技术公开的检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂特异性高，灵敏度高，准确率高，可用于检测人乳头瘤病毒。

Kit for detecting human papillomavirus HPV16 and HPV18

The invention discloses a kit for detecting human papillomavirus HPV16 and HPV18. The invention discloses a reagent set by SEQ ID shown in the No.1 HPV16 FIP, SEQ ID shown in the No.2 HPV16 BIP, SEQ ID shown in the No.3 HPV16 F3, SEQ ID shown in the No.4 HPV16 B3, SEQ ID No.5 shown in HPV18 FIP, SEQ ID No.6 shown in HPV18 BIP, SEQ ID No.7 shown in HPV18 F3 and SEQ ID No.8 HPV18 shown B3. The experimental results show that the kit for detecting human papillomavirus HPV16 and HPV18 has high specificity, high sensitivity and high accuracy, and can be used for the detection of human papilloma virus.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
中检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂。
技术介绍
人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒，感染人类表皮及黏膜组织，目前约有170种类型的HPV被鉴别出来。流行病学研究已经证实，HPV病毒持续感染是引发宫颈癌的主要原因，根据HPV病毒和宫颈癌的关系，可以分为高危型、可能高危型和低危型，其中，16型(HPV16)和18型(HPV18)是世界范围内感染率最高的亚型。目前，HPV的检测有两种商业化方法，一种是由德国Qiagen公司生产的杂交捕获II代(HC2)检测试剂盒,作为检测其他方法的金标准，另一种是由瑞士Roche公司生产的LA检测方法，但由于这两种方法成本较高，难以大量推广使用。此外，常用的方法还有细胞学检查、聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量PCR、Southern Blot法等，细胞学检查灵敏度低，可能出现假阴性，PCR和实时荧光PCR需要热循环仪等复杂仪器，耗时较长，Southern Blot法操作复杂，成本高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何快速检测高危型人乳头瘤病毒HPV16和HPV18，并提高检测的特异性、灵敏性及降低检测成本。为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂。本专利技术所提供的检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂，由成套试剂1和成套试剂2组成；所述成套试剂1由名称为HPV16-FIP的单链DNA、名称为HPV16-BIP的单链DNA、名称为HPV16-F3的单链DNA和名称为HPV16-B3的单链DNA组成；所述HPV16-FIP为如下a1)至a4)中的任一种单链DNA：a1)序列表中SEQ ID No.1所示的单链DNA；a2)在a1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a3)与a1)或a2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；a4)在严格条件下与a1)或a2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16-BIP为如下b1)至b4)中的任一种单链DNA：b1)序列表中SEQ ID No.2所示的单链DNA；b2)在b1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b3)与b1)或b2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16-F3为如下c1)至c4)中的任一种单链DNA：c1)序列表中SEQ ID No.3所示的单链DNA；c2)在c1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；c3)与c1)或c2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；c4)在严格条件下与c1)或c2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16-B3为如下d1)至d4)中的任一种单链DNA：d1)序列表中SEQ ID No.4所示的单链DNA；d2)在d1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；d3)与d1)或d2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述成套试剂2由名称为HPV18-FIP的单链DNA、名称为HPV18-BIP的单链DNA、名称为HPV18-F3的单链DNA和名称为HPV18-B3的单链DNA组成；所述HPV18-FIP为如下e1)至e4)中的任一种单链DNA：e1)序列表中SEQ ID No.5所示的单链DNA；e2)在e1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；e3)与e1)或e2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；e4)在严格条件下与e1)或e2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18-BIP为如下f1)至f4)中的任一种单链DNA：f1)序列表中SEQ ID No.6所示的单链DNA；f2)在f1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；f3)与f1)或f2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；f4)在严格条件下与f1)或f2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18-F3为如下g1)至g4)中的任一种单链DNA：g1)序列表中SEQ ID No.7所示的单链DNA；g2)在g1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；g3)与g1)或g2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；g4)在严格条件下与g1)或g2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18-B3为如下h1)至h4)中的任一种单链DNA：h1)序列表中SEQ ID No.8所示的单链DNA；h2)在h1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；h3)与h1)或h2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；h4)在严格条件下与h1)或h2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。上述检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂中，a2)所述在a1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA可为在SEQ ID No.1所示的单链DNA的5′端和/或3′端添加一至十个核苷酸得到的单链DNA。b2)所述在b1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA可为在SEQ ID No.2所示的单链DNA的5′端和/或3′端添加一至十个核苷酸得到的单链DNA。c2)所述在c1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA可为在SEQ ID No.3所示的序列的5′端和/或3′端添加一至十个核苷酸得到的单链DNA。d2)所述在d1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA可为在SEQ ID No.4所示的序列的5′端和/或3′端添加一至十个核苷酸得到的单链DNA。e2)所述在e1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA可为在SEQ ID No.5所示的序列的5′端和/或3′端添加一至十个核苷酸得到的单链DNA。f2)所述在f1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA可为在SEQ ID No.6所示的序列的5′端和/或3′端添加一至十个核苷酸得到的单链DNA。g2)所述在g1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA可为在SEQ ID No.7所示的序列的5′端和/或3′端添加一至十个核苷酸得到的单链DNA。h2)所述在h1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA可为在SEQ ID No.8所示的序列的5′端和/或3′端添加一至十个核苷酸得到的单链DNA。这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本专利技术的SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6、SEQ ID No.7或SEQ ID No.8所示的核苷酸序列具有85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂，由成套试剂1和成套试剂2组成；所述成套试剂1由名称为HPV16‑FIP的单链DNA、名称为HPV16‑BIP的单链DNA、名称为HPV16‑F3的单链DNA和名称为HPV16‑B3的单链DNA组成；所述HPV16‑FIP为如下a1)至a4)中的任一种单链DNA：a1)序列表中SEQ ID No.1所示的单链DNA；a2)在a1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a3)与a1)或a2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；a4)在严格条件下与a1)或a2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16‑BIP为如下b1)至b4)中的任一种单链DNA：b1)序列表中SEQ ID No.2所示的单链DNA；b2)在b1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b3)与b1)或b2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16‑F3为如下c1)至c4)中的任一种单链DNA：c1)序列表中SEQ ID No.3所示的单链DNA；c2)在c1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；c3)与c1)或c2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；c4)在严格条件下与c1)或c2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16‑B3为如下d1)至d4)中的任一种单链DNA：d1)序列表中SEQ ID No.4所示的单链DNA；d2)在d1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；d3)与d1)或d2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述成套试剂2由名称为HPV18‑FIP的单链DNA、名称为HPV18‑BIP的单链DNA、名称为HPV18‑F3的单链DNA和名称为HPV18‑B3的单链DNA组成；所述HPV18‑FIP为如下e1)至e4)中的任一种单链DNA：e1)序列表中SEQ ID No.5所示的单链DNA；e2)在e1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；e3)与e1)或e2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；e4)在严格条件下与e1)或e2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18‑BIP为如下f1)至f4)中的任一种单链DNA：f1)序列表中SEQ ID No.6所示的单链DNA；f2)在f1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；f3)与f1)或f2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；f4)在严格条件下与f1)或f2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18‑F3为如下g1)至g4)中的任一种单链DNA：g1)序列表中SEQ ID No.7所示的单链DNA；g2)在g1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；g3)与g1)或g2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；g4)在严格条件下与g1)或g2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18‑B3为如下h1)至h4)中的任一种单链DNA：h1)序列表中SEQ ID No.8所示的单链DNA；h2)在h1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；h3)与h1)或h2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；h4)在严格条件下与h1)或h2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。...

【技术特征摘要】
1.检测人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的成套试剂，由成套试剂1和成套试剂2组成；所述成套试剂1由名称为HPV16-FIP的单链DNA、名称为HPV16-BIP的单链DNA、名称为HPV16-F3的单链DNA和名称为HPV16-B3的单链DNA组成；所述HPV16-FIP为如下a1)至a4)中的任一种单链DNA：a1)序列表中SEQ ID No.1所示的单链DNA；a2)在a1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a3)与a1)或a2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；a4)在严格条件下与a1)或a2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16-BIP为如下b1)至b4)中的任一种单链DNA：b1)序列表中SEQ ID No.2所示的单链DNA；b2)在b1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b3)与b1)或b2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16-F3为如下c1)至c4)中的任一种单链DNA：c1)序列表中SEQ ID No.3所示的单链DNA；c2)在c1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；c3)与c1)或c2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；c4)在严格条件下与c1)或c2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV16-B3为如下d1)至d4)中的任一种单链DNA：d1)序列表中SEQ ID No.4所示的单链DNA；d2)在d1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；d3)与d1)或d2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述成套试剂2由名称为HPV18-FIP的单链DNA、名称为HPV18-BIP的单链DNA、名称为HPV18-F3的单链DNA和名称为HPV18-B3的单链DNA组成；所述HPV18-FIP为如下e1)至e4)中的任一种单链DNA：e1)序列表中SEQ ID No.5所示的单链DNA；e2)在e1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；e3)与e1)或e2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；e4)在严格条件下与e1)或e2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18-BIP为如下f1)至f4)中的任一种单链DNA：f1)序列表中SEQ ID No.6所示的单链DNA；f2)在f1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；f3)与f1)或f2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；f4)在严格条件下与f1)或f2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18-F3为如下g1)至g4)中的任一种单链DNA：g1)序列表中SEQ ID No.7所示的单链DNA；g2)在g1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；g3)与g1)或g2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；g4)在严格条件下与g1)或g2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述HPV18-B3为如下h1)至h4)中的任一种单链DNA：h1)序列表中SEQ ID No.8所示的单链DNA；h2)在h1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；h3)与h1)或h2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；h4)在严格条件下与h1)或h2)限定的单链DNA杂交的单...

【专利技术属性】
技术研发人员：林金明，冯晓，易伶潞，李海芳，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：北京;11