一种藿香与蛴螬有效部位配伍后抗EV‑71病毒的制备方法技术

本发明专利技术属于中药活性成分提取工艺及抗病毒有效部位的分离，主要涉及藿香与蛴螬提取物配伍后抗EV‑71病毒有效部位的分离方法，具体步骤为采用蒸馏水回流提取藿香、蛴螬，醇沉，抗病毒，溶解沉淀，采用D101型号的大孔吸附树脂对蛴螬提取物进行分离效果较好，确定抗病毒有效部位。然后将两种药物的有效部位，分别按9:1、8:2、7:3、6：4、5：5、4：6、3：7、2：8、1：9比例配伍，再次进行抗EV‑71病毒研究。本发明专利技术采用抗病毒追踪的方法发现了藿香与蛴螬抗病毒有效部位经过配伍后，抗病毒效果较好，并且找到最佳配伍比例。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药活性成分生产提取工艺，涉及藿香、蛴螬抗病毒有效部位提取的新思路新方法以及在制药领域的新用途，具体涉及利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化藿香、蛴螬抗呼吸道合胞病毒的有效成分，以及有效成分进行配伍后的抗病毒研究。
技术介绍
最近几年以来各种病毒的突然入侵，比如SARS病毒，甲型H1N1等，每一次病毒的爆发都会导致人类的恐慌甚至死亡，所以找到合适的抗病毒药物至关重要。藿香是唇形科刺蕊草属植物，它原产于东南亚地区，如马来西亚、菲律宾、印度尼西亚等国，我国引种栽培历史悠久，可追溯到梁代或以前。肠病毒在病毒学上属于微小病毒科中的肠病毒群，EV-71是目前肠道病毒群中最晚发现的病毒，它的感染性极而强且致病率较高，尤其是在神经系统方面的并发症。EV-71病毒是引起婴幼儿手足口病的主要病原体之一，也可引起无菌性脑膜炎、脑干脑炎和脊髓灰质炎样的麻痹等多种神经系统疾病藿香具有芳香化浊、发表解暑、开胃止呕的功效，常用于治疗湿浊中阻、脘痞呕吐、暑湿倦怠、寒湿闭暑、胸闷不舒、腹痛吐泻等疾病。藿香的提取物具有抗流感病毒以及呼吸道病毒的作用。蛴螬为金龟子幼虫—朝鲜黑金龟子的幼虫，长约35mm，乳白色，体常弯曲，密生黄白色细毛，生活于3～6cm深的土内，咬食农作物的根部，因此农业上把它当作农作物的害虫捕杀；但在医学上却具有多种药理作用,如破血、行瘀、散结通乳等,用治折损、淤痛、痛风、破伤风、喉痹、痈疽等。蛴螬主要分布于中国东北、华北、朝鲜等地。在药理学方面，蛴螬提取物具有抗肿瘤、治疗口疮和眼部疾病等多种生物活性，是一种极具研究和开发价值的动物药。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是明确了藿香和蛴螬抗EV-71病毒的有效部位，为该有效部位的分离提取提供了一种利用抗病毒追踪的方式制备藿香、蛴螬抗病毒有效部位的新方法，并且找到两者的最佳配伍比例。本专利技术的优点是，本专利技术首次分离出了藿香、蛴螬中具有抗EV-71病毒的一种有效部位，并专利技术了一种抗病毒追踪的方法对该有效部位进行了制备，此分离方法目的性强，简单节省了大量的人力物力，优于传统的系统分离。制备得到的有效部位对EV-71病毒具有较好的治疗作用。本专利技术藿香与蛴螬有效部位抗病毒的最佳配伍比例为2:3部位及最佳配伍比例的制备方法，包括如下步骤：（1）取一定量的藿香、蛴螬药材分别用10倍的水加热回流提取2次，第一次2小时第二次1.5小时。（2）合并两次的提取液减压浓缩，浓缩至每毫升药液含有1克的药材，然后加乙醇调节乙醇的浓度为70%，静置24小时。过滤得到沉淀和上清液。（3）将上清液回收乙醇，将沉淀用水溶解，分别进行抗病毒实验。实验显示沉淀的抗病毒效果较好。（4）取一定的D101、HPD100、DM130、X-5、AB-8型号大孔吸附树脂分别用95%的乙醇浸泡24小时，之后装柱，用蒸馏水洗至无醇味，然后用5倍柱体积5%的盐酸水溶液进行冲洗浸泡3个小时，之后用蒸馏水冲至PH等于7，再用5倍柱体积的5%的NaOH水溶液进行冲洗浸泡3个小时，之后用蒸馏水冲至PH等于7，备用。（5）取（3）中的沉淀上样于处理好的大孔树脂柱，分别用水，25%乙醇，50%乙醇，75%乙醇进行冲洗，每个洗脱液中每200ml接一瓶，并且冲洗到没有颜色之后再换下一个洗脱液。（6）将上述接到的样品进行抗病毒实验。实验显示经过大孔树脂的筛选，藿香对AB-8大孔树脂的效果较好，蛴螬对D101大孔吸附树脂效果较好，藿香与蛴螬水部位抗病毒效果很好。（7）将藿香与蛴螬的水部位分别以9：1、8：2、7：3、6：4、5：5、4：6、3：7、2：8、1：9的比例进行配伍，结果显示比例2:3为最佳配伍比例。具体实施方式实例1（1）称取一定量的藿香、蛴螬分别加10倍量加热回流提取两次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并两次提取液，减压浓缩至每毫升药液含有1克的药材，加乙醇调节溶液乙醇的浓度为70%，静置24小时。（2）将（1）得到的醇沉液减压抽滤，得到沉淀，将沉淀用蒸馏水超声溶解。（3）将（2）得到的溶液上样于处理好的D101、HPD100、DM130、X-5、AB-8大孔吸附树脂，用水进行冲洗，每200ml接一瓶，冲洗至无色。（4）合并（3）中水洗脱部位，浓缩至一定体积，分别进行抗病毒研究。（5）将（4）中得到的经过AB-8树脂筛选的藿香水洗脱部位与经过D101树脂筛选的蛴螬水洗脱部位分别以9：1、8：2、7：3、6：4、5：5、4：6、3：7、2：8、1：9的比例进行配伍，再次进行抗病毒实验，结果显示藿香与蛴螬配伍后抗病毒效果较好，并且比例2:3为最佳配伍比例。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种藿香与蛴螬提取物经配伍后具有抗EV‑71病毒作用的有效部位以及一种利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化该有效成分的工艺方法，其特征在于藿香、蛴螬的水提醇沉的沉淀部位具有抑制EV‑71病毒的效果，首先利用水提醇沉，其次利用AB‑8（藿香）、D101（蛴螬）型号的大孔树脂分离，在每一步的提取分离之后要进行抗病毒追踪出有效部位的所在，再将有抗病毒作用的部位进行配伍，最后进行抗病毒实验研究，得出最佳的配伍方案。

【技术特征摘要】
1.一种藿香与蛴螬提取物经配伍后具有抗EV-71病毒作用的有效部位以及一种利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化该有效成分的工艺方法，其特征在于藿香、蛴螬的水提醇沉的沉淀部位具有抑制EV-71病毒的效果，首先利用水提醇沉，其次利用AB-8（藿香）、D101（蛴螬）型号的大孔树脂分离，在每一步的提取分离之后要进行抗病毒追踪出有效部位的所在，再将有抗病毒作用的部位进行配伍，最后进行抗病毒实验研究，得出最佳的配伍方案。2.根据权利要求1所述的有效部位其特征在于该有效部位为水提醇沉的沉淀部位，经大孔树脂分离后，水部位为藿香与蛴螬抗病毒的有效部位，水部位的最佳配伍比例为2：3。3.根据权利要求1所述提取分离方法，其特征在于藿香水回流提取的料液比为1：10，提取次数两次，提取时间为第一次2小时，第二次1.5小时。4.根据权利要求1所述提取分离方法，其特征在于水提液的浓缩液浓度为1g/ml，醇沉浓度为7...

【专利技术属性】
技术研发人员：周长征，王清，牛文斐，侯宝山，张加泽，
申请(专利权)人：周长征，
类型：发明
国别省市：山东;37