一种卵泡刺激素的长效制剂制造技术

本发明专利技术提供一种卵泡刺激素的长效制剂，所述制剂的组分如下：卵泡刺激素、枸橼酸钠‑枸橼酸缓冲液、肝素以及透明质酸；所述卵泡刺激素为垂体卵泡刺激素，或基因重组卵泡刺激素；所述制剂剂型为注射剂或冻干粉针；所述制剂中肝素与透明质酸的比例为2:1至1:5；所述制剂为注射剂时，制剂的各组分含量如下：每1ml生理盐水或注射用水中加入促卵泡素100～1000IU，枸橼酸钠10～50mg，枸橼酸0.1～1.0mg，肝素1～10mg，透明质酸5～50mg。本发明专利技术可应用于畜牧业的超数排卵和诱导发情。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种卵泡刺激素的长效制剂，属于药物学、分子医学和疾病防治领域。
技术介绍
卵泡刺激素(Follicle-stimulatinghormone,FSH)是一种由动物脑垂体前叶分泌的糖蛋白类促性腺激素。具有调节机体的生长、性成熟和繁殖等作用。FSH在雌性动物可促进子宫内膜生长、排卵、刺激多卵泡发育等。靶细胞上存在着FSH的特异性受体,FSH与细胞膜上的卵泡刺激素受体结合后,通过G蛋白偶联机制激活腺苷酸环化酶,使细胞内cAMP增加或引起钙离子内流,从而对细胞的代谢或功能活动产生影响。FSH与受体结合后产生两种作用。一方面活化芳香化酶,另一方面诱导LH受体形成。内膜细胞在LH的作用下提供19碳底物-雄烯二酮或睾酮这些底物通过基底膜进入颗粒细胞,活化的芳香化酶把它们转变为17-β雌二醇(E2),而卵泡内膜本身只能产生很少量的雌激素。雌激素协同FSH使颗粒细胞增生,内膜细胞分化,卵泡液形成卵泡腔扩大,从而使卵泡生长和发育。繁殖是影响畜牧业整体效益的一个关键因素。如何提高动物繁殖率一直都是畜牧领域攻关的一个重点。在现代农业中，种畜的人工授精已经非常普遍，特别是在奶牛(所有受精类型的75％)及猪(所有受精类型的85％)上的应用。胚胎移植技术是家畜繁殖领域中的一次重大革命，它能够提高优秀种畜的繁殖率，充分利用优质遗传基因，对家畜的育种、保种、引种及经济效益的提高都具有非常重要的意义。然而，通过各种手段进行家畜扩繁的前提条件是动物的适时发情和大量优质卵子来源。给种畜注射适量的动物激素则可以满足这些前提条件：目前国际上通用的同类产品有Ovagen(卵泡刺激素源于羊垂体提取物，新西兰产)和Folltropin-V(卵泡刺激素源于猪垂体提取物，加拿大产)，可用于超数排卵(即增加成熟卵泡数目，每次排卵数目可达10个以上)和配合同期发情(人工授精、胚胎移植之前的关键技术)。为了能够达到超数排卵，Ovagen和Folltropin-V均需注射八次。国内近年由浙江宁波第二激素厂生产以及杭州动物药品厂生产的注射用垂体卵泡刺激素，每疗程注射2-5次，能促进卵巢卵泡生长发育和雌激素的分泌，引起动物正常发情，但尚不推荐用于超数排卵。目前的各种同类产品，均需多次注射，不仅人工成本高，更因多次惊扰动物而影响效果。多年来，行业内纷纷研究长效卵泡刺激素，包括基因重组、长效制剂、改变给药途径等不同方法，试图减少注射次数。曾有报道以聚乙烯吡咯烷酮(JReprodDev，59(2):214-218,2013)溶解Folltropin-V后，泰国牛仅注射一次的超数排卵效果，与每日肌肉注射2次，连续3天的效果相同。将Folltropin-V溶解于20mg/ml的透明质酸溶液中，奶牛注射一次的效果，与4天内连续注射8次的效果相同(AnimReprodSci，129:7-13，2011)。由于透明质酸浓度过大，注射时难以将药液完全排出，动物疗效个体差异较大。将透明质酸溶液浓度降低为5mg/ml后，改善了给药容易度，但必须每隔一天给药，即2次给药，其效果才与4天内连续注射8次相同。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题，在于提供一种卵泡刺激素的长效制剂，可应用于畜牧业的超数排卵和诱导发情。本专利技术是这样实现的：一种卵泡刺激素的长效制剂，所述制剂的组分如下：卵泡刺激素、枸橼酸钠-枸橼酸缓冲液、肝素以及透明质酸。进一步地，所述卵泡刺激素为垂体卵泡刺激素，或基因重组卵泡刺激素。进一步地，所述制剂剂型为注射剂或冻干粉针。进一步地，所述制剂中肝素与透明质酸的比例为2:1至1:5。进一步地，所述制剂为注射剂时，制剂的各组分含量如下：每1ml生理盐水或注射用水中加入促卵泡素100～1000IU，枸橼酸钠10～50mg，枸橼酸0.1～1.0mg，肝素1～10mg，透明质酸5～50mg。进一步地，所述透明质酸为2～8mg。进一步地，所述肝素的终浓度为4mg/ml，透明质酸的终浓度为5mg/ml。进一步地，所述制剂的冻干粉针处方中各组分含量如下：每1ml生理盐水或注射用水中加入促卵泡素100～1000IU，枸橼酸钠10～50mg，枸橼酸0.1～1.0mg，甘露醇50～500mg，肝素4～40mg，透明质酸5～50mg。进一步地，所述透明质酸为2～8mg。本专利技术具有如下优点：本专利技术筛选并优化的卵泡刺激素长效制剂，处方中含有具有缓控释作用的肝素和透明质酸，通过调整肝素和透明质酸比例，可以调节药物释放速率。本专利技术药物可应用于畜牧业的超数排卵和诱导发情。【附图说明】下面参照附图结合实施例对本专利技术作进一步的说明。图1是本专利技术实施例垂体卵泡刺激素长效注射剂A1-3的体外溶出实验结果曲线图。图2是本专利技术实施例垂体卵泡刺激素长效注射剂B1-3的体外溶出实验结果曲线图。图3是本专利技术实施例垂体卵泡刺激素长效注射剂D1-3的体外溶出实验结果曲线图。【具体实施方式】请参阅图1～3所示，对本专利技术的实施例进行详细的说明。本专利技术所涉及的一种卵泡刺激素的长效制剂，所述制剂的组分如下：卵泡刺激素、枸橼酸钠-枸橼酸缓冲液、肝素以及透明质酸；所述卵泡刺激素为垂体卵泡刺激素，或基因重组卵泡刺激素；所述制剂剂型为注射剂或冻干粉针；所述制剂中肝素与透明质酸的比例为2:1至1:5。所述制剂为注射剂时，制剂的各组分含量如下：每1ml生理盐水或注射用水中加入促卵泡素100～1000IU，枸橼酸钠10～50mg，枸橼酸0.1～1.0mg，肝素1～10mg，透明质酸5～50mg。较优的，所述透明质酸为2～8mg。较优的，所述肝素的终浓度为4mg/ml，透明质酸的终浓度为5mg/ml。所述制剂的冻干粉针处方中各组分含量如下：每1ml生理盐水或注射用水中加入促卵泡素100～1000IU，枸橼酸钠10～50mg，枸橼酸0.1～1.0mg，甘露醇50～500mg，肝素4～40mg，透明质酸5～50mg。较优的，所述透明质酸为2～8mg。实施例1基因重组卵泡刺激素的制备将稳定高表达FSH的CHO细胞接入摇瓶，逐步扩增，至密度1×106/ml，记为培养第1天。连续14天后，取细胞培养液，用于纯化表达产物。将CHO细胞培养液离心，转速9000g，4℃低温离心20min，收集培养上清。采用截留分子量为10kDa膜超滤，收集超滤浓缩液。用ProteinA亲和层析柱，对浓缩液纯化，得本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卵泡刺激素的长效制剂，其特征在于：所述制剂的组分如下：卵泡刺激素、枸橼酸钠‑枸橼酸缓冲液、肝素以及透明质酸。

【技术特征摘要】
1.一种卵泡刺激素的长效制剂，其特征在于：所述制剂的组分如下：
卵泡刺激素、枸橼酸钠-枸橼酸缓冲液、肝素以及透明质酸。
2.根据权利要求1所述的一种卵泡刺激素的长效制剂，其特征在于：所
述卵泡刺激素为垂体卵泡刺激素，或基因重组卵泡刺激素。
3.根据权利要求1所述的一种卵泡刺激素的长效制剂，其特征在于：
所述制剂剂型为注射剂或冻干粉针。
4.根据权利要求3所述的一种卵泡刺激素的长效制剂，其特征在于：
所述制剂中肝素与透明质酸的比例为2:1至1:5。
5.根据权利要求4所述的一种卵泡刺激素的长效制剂，其特征在于：
所述制剂为注射剂时，制剂的各组分含量如下：每1ml生理盐水或注射用水
中加入促卵泡素100～1000IU，枸橼酸钠10～50mg，枸橼酸0.1～1.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：刁勇，
申请(专利权)人：华侨大学，
类型：发明
国别省市：福建;35