人卵泡刺激素β亚基单克隆抗体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种人卵泡刺激素β亚基单克隆抗体的制备方法，其方法为：①制备免疫原：以人工合成的ＦＳＨβ多肽片段为免疫原，将其滴在硝酸纤维素膜上；②免疫：将硝酸纤维膜埋入待免疫的小鼠脾内，间隔两周后加强免疫，第三次免疫起每次免疫间隔３周至１个月；③筛选：用酶联免疫吸附法筛选免疫鼠血清；④细胞融合、筛选及克隆化；⑤单克隆抗体的提取与纯化；⑥腹水制备；人卵泡刺激素β亚基单克隆抗体的制备方法是一种应用单克隆抗体制备技术，以人工合成的多肽——人卵泡刺激素的一个组成单位，β亚基的氨基酸片段——为免疫原制备得到灵敏性高、特异性强、实用性好的鼠源性抗人卵泡刺激素β亚基单克隆抗体。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术是一种应用单克隆抗体制备技术，以人工合成的多肽——人卵泡刺激素的一个组成单位，β亚基的氨基酸片段——为免疫原，制备得到灵敏性高、特异性强、实用性好的鼠源性抗人卵泡刺激素(FSH)β单克隆抗体。
技术介绍
目前国内尚无商品化的FSHβ单抗，给科研及临床应用带来了一些不便。卵泡刺激素(FSH)是由脑垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素，由α和β两个非共价结合的多肽亚单位组成。FSH与人类的生殖生育功能密切相关，是雌性卵泡发生、雄性精子产生足够活率和活力及支持细胞生长的基础。通过测定FSH的分泌水平可以对下丘脑-垂体-性腺轴的功能做出评价，因此FSH是重要的内分泌及生殖生物标记物之一。FSHβ亚单位的氨基酸序列与其他糖蛋白激素不同，具有独特的生物学和免疫学活性，其所呈现的活性形式是由β亚单位所决定的。三、
技术实现思路
1、技术问题 本专利技术的目的是提供一种节省抗原用量、免疫效果好、针对已知表位特异性强的。2、技术方案 本专利技术的为①制备免疫原以人工合成的FSHβ多肽片段为免疫原，其氨基酸序列51-60，将其滴在硝酸纤维素膜上；②免疫按常规外科操作将硝酸纤维膜埋入待免疫的小鼠脾内，间隔两本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人卵泡刺激素β亚基单克隆抗体的制备方法，其特征在于其方法为：１．１制备免疫原：以人工合成的ＦＳＨβ多肽片段为免疫原，其氨基酸序列５１－６０，将其滴在硝酸纤维素膜上；１．２免疫：按常规外科操作将硝酸纤维膜埋入待免疫的小鼠脾内，间隔 两周后加强免疫，腹腔注射抗原肽与福氏不完全佐剂混合液，第三次免疫起每次免疫间隔３周至１个月；１．３筛选：用酶联免疫吸附法筛选免疫鼠血清；１．４细胞融合、筛选及克隆化：选抗血清效价最高的鼠取脾细胞与骨髓瘤细胞体外融合，经三次亚克隆获得 稳定分泌抗ＦＳＨβ的单克隆抗体细胞株；１．５单克隆抗体的提取与纯化：将以上的细胞株体外扩大培养后，定期收...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：卞倩，管晓虹，宋玲，仇镇宁，王心如，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]