用于检测赤羽病毒、牛病毒性腹泻病毒和蓝舌病毒的GeXP多重快速检测用引物和检测方法技术

技术编号:13210069 阅读:106 留言:0更新日期:2016-05-12 15:33
本研究拟建立基于GeXP多重基因表达遗传分析系统的多种奶牛疫病检测方法,解决多种奶牛疫病检测时血清学方法灵敏度低,常规PCR只能针对单一病原体检测,基因芯片方法成本较高等问题,构建3种奶牛疫病RNA阳性样本参考品;以参考品RNA的10倍连续稀释参考品为检测对象,灵敏度为检测至100拷贝;与其他奶牛疫病无交叉反应,无假阴性;检测实际样本600份,满足大量奶牛多种疫病的监控筛查要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物技术应用领域,尤其是用于三种进境奶牛病毒病的同时检测与鉴 定。
技术介绍
赤羽病(Akabane Disease,AKA)、牛病毒性腹泻(Bovine Viral Diarrhea,BVD)和 蓝舌病(Bluet〇ngue,BT)是国家规定的进境奶牛需要隔离检疫的3种病毒性疾病。近几年, 随着国民对优质奶制品需求的提升,进境奶牛数量逐年攀升,给奶牛进境口岸动物疫病检 测实验室带来一定的工作压力和经费负担。因此,建立一种可以同时鉴别诊断多种奶牛疫 病的高通量快速检测方法对减轻奶牛进境口岸检测实验室工作负担、降低检测经费及开展 进境奶牛携带疫病的流行病学调查具有重要意义。 目前,针对进境奶牛的多种病毒性疾病,口岸动物检疫实验室普遍应用病毒分离、 血清学方法和分子生物学方法进行检测。病毒分离培养是诊断的金标准,但存在测周期长、 操作繁琐等问题;病毒中和试验需要特异性的标准血清或病毒毒株,在实际应用中具有一 定的局限性;进口的酶联免疫试剂盒普遍价格昂贵;普通PCR、荧光定量PCR等分子生物学方 法皆为针对单一病毒检测,无法满足多种病原混合感染鉴别诊断的检测需求本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时检测赤羽病(Akabane Disease,AKA)、牛病毒性腹泻(Bovine Viral Diarrhea,BVD)、蓝舌病(Bluetongue,BT)的引物组合:其特征在于特异性引物和通用引物序列如SEQ NO:1至8所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王乃福刘洋吴冬雪黄晨陈小金王万骞董志珍赵祥平
申请(专利权)人:天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
类型:发明
国别省市:天津;12

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