本发明专利技术公开了一种寡雄腐霉发酵菌质在抗肿瘤方面的应用，所述的寡雄腐霉发酵菌质的制备，包括：寡雄腐霉菌种的分离保存：采集含有寡雄腐霉菌种的土壤，4℃保存，取0.1～1mg土粒置于9cm的培养皿中，再缓慢倾入腐霉选择培养基，25℃暗培养，待长出菌落后挑取边缘菌丝转移新的腐霉选择培养基上，进行纯化并保存菌种；寡雄腐霉发酵菌质的制备：用灭菌打孔器打取活化的带培养基的寡雄腐霉菌块，将其放入装有PDA 液体培养的三角瓶中，25℃、130r/min下培养至菌团球长满三角瓶，即得。该寡雄腐霉发酵菌质具有抗肿瘤活性，尤其是特定浓度的寡雄腐霉发酵菌质具有明显引起肿瘤细胞凋亡的作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学
，具体是一种。
技术介绍
目前，在抗肿瘤研究中，诱导癌细胞的凋亡是一个重要的途径，促进肿瘤细胞凋亡 可达到肿瘤缩小，癌症消退的目的，如传统的抗肿瘤药物顺铂、美法仑等均能刺激细胞线粒 体凋亡途径，引发凋亡。此种方式比采用杀伤肿瘤细胞的治疗方式有明显的优越性，因为抗 肿瘤药物若能大量的诱发肿瘤细胞的凋亡，激活其自身的程序性死亡过程，将会避免因大 量细胞坏死而释放细胞内物质引起的各种副作用，减轻化疗对正常细胞的损伤，延长患者 的生存期。然而，至今尚未筛选出能诱发肿瘤细胞大量凋亡的抗肿瘤药。 寡雄腐霉Pythium olgiandurm Dreehsler是藻物界（Chromista)卵菌纲 (Oomycetes)霜霉目（Peronosporates)腐霉科（Pythiaceae)腐霉属（pythium)中的一种寄 生为主兼性腐生真菌，在自然界中广泛分布。寡雄腐霉不伤害作物组织，但是经常从植物根 部表面分离获得(Mohamed et al.，2007)。迄今为止，未见寡雄腐霉引起作物病害的报道， 而且已经确认对6科12种重要农作物无致病作用(Brozova，et al. ,2002)。寡雄腐霉能有效 防治真菌性病害，它能拮抗或寄生16个属中的20多种真菌和其他卵菌(楼兵干等，2005)。所 以在农业上作为生防菌广泛应用。但是有关肿瘤抑制的研究还没有报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种高效低毒的。 为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案： ，所述的寡雄腐霉发酵菌质的制备，包括 以下步骤： (1)寡雄腐霉菌种的分离保存 采集含有寡雄腐霉菌种的土壤，4°C保存备用；取0.1~lmg土粒置于9cm的培养皿 中，再缓慢倾入腐霉选择培养基，25°C暗培养，待长出菌落后挑取边缘菌丝转移新的腐霉选 择培养基上，进行纯化并保存菌种； (2)寡雄腐霉发酵菌质的制备 用灭菌打孔器打取活化的带培养基的寡雄腐霉菌块，将其放入装有pda液体培养 的三角瓶中，25°c、130r/min下培养至菌团球长满三角瓶，即得寡雄腐霉发酵菌质。 作为本专利技术进一步的方案:所述步骤(2)中，还包括将寡雄腐霉发酵菌质浓缩成浸 霄，4 C冰箱中备用。 作为本专利技术进一步的方案:所述的肿瘤为H22荷瘤。 作为本专利技术进一步的方案：所述的寡雄腐霉发酵菌质的干物质用量为750~ 1000mg/kg。 作为本专利技术进一步的方案:所述的寡雄腐霉发酵菌质的干物质用量为750mg/kg。 作为本专利技术进一步的方案:所述的寡雄腐霉发酵菌质的干物质用量为1000mg/kg。 与现有技术相比，本专利技术的有益效果是： 本专利技术通过科学实验发现了一种具有抗肿瘤作用的寡雄腐霉发酵菌质，其具有抗 肿瘤活性，尤其是特定浓度的寡雄腐霉发酵菌质具有明显引起肿瘤细胞凋亡的作用。本发 明为科学廉价地寻找高效低毒的诱导肿瘤细胞凋亡的药物开辟了新的思路，极具科研意 义。【附图说明】 图1是寡雄腐霉的形态特征图；其中A、B:孢子囊;C:藏卵器;D:蠕虫形雄器侧面与 藏卵器接触;E:亚球状雄器异丝生雄器顶端与藏卵器接触;F:卵孢子充满藏卵器； 图2是药物高剂量组小鼠的肿瘤切片图； 图3是药物中剂量组小鼠的肿瘤切片图。【具体实施方式】 下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述， 显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的 实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都 属于本专利技术保护的范围。本专利技术实施例中，，从以下几个方面进行 研究： 一、寡雄腐霉发酵菌质的制备： 菌种:寡雄腐霉来源：内蒙古通辽市罕山国家自然保护区土壤 1.寡雄腐霉菌种的分离保存 1.1寡雄腐霉菌种的保存本课题组在2014年8月份从罕山国家自然保护区随机采集了土壤样品4°C保存备 用。取0.1~lmg土粒置于9cm的培养皿中，再缓慢倾入腐霉选择培养基，25°C暗培养。待长出 菌落后挑取边缘菌丝转移新的腐霉选择培养基上进行了纯化并保存菌种（菌种编号为 HS63-4)。 1.2寡雄腐霉菌种的鉴定 请参阅图1，将所保存的菌种采用草叶诱导方法(Waterhouse，1967)诱导产生孢子 囊、藏卵器、雄器等进行了观察并采集图像，采集到的图像如图1所示，其中A、B:孢子囊;C: 藏卵器;D:蠕虫形雄器侧面与藏卵器接触;E:亚球状雄器异丝生雄器顶端与藏卵器接触;F: 卵孢子充满藏卵器。 依据其形态学特征分析结果，该菌株和van der Plaats_Niterink(1981)和余永 年（1998)所描述的寡雄腐霉Pythium olgiandurm Dreehsler相符合。因此，鉴定该菌株为 寡雄腐霉Pythium olgiandurm Dreehsler。 2.寡雄腐霉发酵菌质的制备用灭菌打孔器打取活化的带培养基的寡雄腐霉菌块(直径6mm)，将其放入装有TOA 液体培养的三角瓶中，25°C、130r/min下培养至菌团球长满三角瓶即得寡雄腐霉发酵菌质。 然后浓缩成浸膏后，4°C冰箱中备用。二、寡雄腐霉发酵菌质的抗肿瘤试验 1、材料与仪器 1 · 1材料 SD小鼠55只，体重18_20g，购于吉林农业大学实验动物中心； 瘤株:H22荷瘤；阳性药:环磷酰胺。[00当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
寡雄腐霉发酵菌质在抗肿瘤方面的应用，其特征在于，所述的寡雄腐霉发酵菌质的制备，包括以下步骤：（1）寡雄腐霉菌种的分离保存采集含有寡雄腐霉菌种的土壤，4℃保存备用；取0.1～1mg土粒置于9cm的培养皿中，再缓慢倾入腐霉选择培养基，25℃暗培养，待长出菌落后挑取边缘菌丝转移新的腐霉选择培养基上，进行纯化并保存菌种；（2）寡雄腐霉发酵菌质的制备用灭菌打孔器打取活化的带培养基的寡雄腐霉菌块，将其放入装有PDA 液体培养的三角瓶中，25℃、130r/ min下培养至菌团球长满三角瓶，即得寡雄腐霉发酵菌质。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：银玲，王思珍，田迅，李依韦，赵汝，冀照君，
申请(专利权)人：内蒙古民族大学，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15
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