一种治疗肺鳞癌的马尾松树皮提取物及其制备方法与其组合物技术

本发明专利技术公开了一种用于防治肺鳞癌的马尾松树皮提取物及其制备方法与其组合物，所述提取物的制备方法包括下述步骤：1)将马尾松树皮粉碎至200-800目，制得马尾松树皮粉；2)在4～25℃条件下，在马尾松树皮粉中加入水，浸泡1-10h，其中，马尾松树皮粉与水的质量体积比为1：2-1:15；3)超声提取5min-2h，过滤，制得马尾松树皮水提液；4)马尾松树皮水提取液经干燥，即得。本发明专利技术的马尾松树皮提取物有效成分包括多酚、总碱、多糖，其对中晚期肺鳞癌的治疗有效率高达95.75～99.66％，且具有毒副作用小、安全性高等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药提取物
，具体涉及一种用于防治肺鳞癌的马尾松树皮提取物及其制备方法与其组合物。
技术介绍
癌症对人类的威胁日益增大，日渐成为危及人类健康与生命的“头号杀手”。征服癌症已成为全人类面临的一项迫在眉睫的任务，各国都把它作为重要课题，并投入巨资进行攻关。由于癌症的手术治疗、放射治疗、化学药品治疗均存在一定程度的局限性，且化学药品治疗癌症的毒副作用不断出现，国际科学界开始把目光转向更为安全的天然植物提取物，并成为治疗癌症的研究热点。20世纪50年代，法国Masquelier博士首次从法国海松的树皮中提取得到一种黄酮类天然抗氧化剂混合物-原花青素，其抗氧化活性为VE的50倍、Vc的20倍，并能清除体内过多的活性氧自由基，降低机体脂质过氧化程度，具有抗氧化、延缓衰老、增加免疫能力等功效。50年代后期，上述法国海松树皮提取物被注册为Pycnogenol药物，用于提高血管抵抗力，降低毛细血管脆性和通透性，防止血管内皮损伤等用途。1999年Huynh等(Huynhetal，AnticancerRes，1999)发现上述法国海松树皮提取物能抑制癌活性代谢物NNK活化，可防止抽烟诱发的肺癌。但有研究表明烟草致癌原NNK灌注的动物模型中，NNK主要作用于II型肺泡细胞、Clara细胞，使其向腺癌方向发展，其与甲基胆蒽灌注引起的肺鳞癌模型病变过程完全不同。尽管国外存在关于法国海松、新西兰辐射松树皮提取物生物学活性的研究报道，但我国松树生存环境独特，其体内次生代谢物种类、含量和性质与前两者相比存在诸多差异。吴杰等人研究了中国松科中不同品种松树皮中活性成分的差异，结果显示不同品种松树皮活性物质的含量差异显著，其中，马尾松树皮提取物中的总多酚含量、总黄酮含量、原花青素和水溶性多糖含量最高。并且，有关马尾松树皮提取物的研究多集中在由马尾松树皮提取原花青素等活性物质方面，其提取工艺也各有差异。崔映宇等(《食品科学》，2004年)从马尾松树皮中制备获得了马尾松树皮提取物，其提取过程包括将马尾松树皮经筛选、烘干和粉碎后，用纯水加热浸提，浸提液经粗滤、离心分离和微滤后，除去悬浮物和大分子杂质，再用中空纤维膜超滤，得到含有前花青素等生物活性成分的透过液，纳滤浓缩，去除糖类、无机盐等杂质和水后，干燥，即得。但上述提取过程采用热水浸提，提取温度较高，导致松树皮中含有的挥发性物质丢失，影响萃取物活性，且纯化过程中以单一原花青素作为目标物，其过滤浓缩条件以及对糖类等物质的去除，将导致马尾松树皮提取物无法保持其有效成分的完整性。薄采颖等使用超声法从马尾松树皮中提取多酚类物质，包括将马尾松树皮切碎、干燥和粉碎后，得到松树皮粉末，以70％乙醇为溶剂，在30℃条件下，料液比为20:1(ml：g)，超声提取40min，提取液离心过滤，测多酚得率。该方法采用乙醇作为提取溶剂，提取温度略高，与水作为提取溶剂低温提取相比，提取物组分将会有较大差异。CN1923830A通过水溶剂从马尾松树皮中提取原花青素，具体包括以松树皮内皮层为原料，加入5-10倍的水，沸腾回流1-2h，经过300目管道过滤器，放出浸提液，重复一次，合并浸提液；离心，过柱，浓缩，干燥得到粉末。该方法采用沸腾回流收取提取物，将导致有效成分的损失。CN101468121A公开了将紫花苜蓿、覆盆子、小槟榔和马尾松树皮按照1:1:1:1混合，加入3倍重量的净水浸泡48h，在≥100℃下煎煮5h，然后初滤、精滤和微孔阻菌精滤，浓缩后，喷雾干燥，得到粉末。该方法提取原料除马尾松树皮外还包括紫花苜蓿、覆盆子、小槟榔，将导致提取物混合组分与单独马尾松树皮提取物有较大差异，且采用了高温煎煮、喷雾干燥的方法，使得部分有效组分挥发物不能锁定被流失。杜鹃等研究了回流、索氏提取、超声提取等不同的浸提方法及不同提取条件，通过水溶剂从马尾松树皮中提取原花青素的效率，结果表明不同的浸提方法，不同的提取条件都会影响原花青素得率。且在使用超声法提取原花青素时其最佳提取温度为50℃，并给出了低温条件会影响原花青素提取效率的不利教导。CN101701013A公开了用水作为溶剂从松树皮中提取原花青素，以松树皮为原料，水为提取溶剂，进行超声波强化浸提，得到原花青素浸提液；再用微滤除杂、超滤纯化、纳滤浓缩的膜分离技术处理，得到浓缩液；再经真空干燥或冷冻干燥，得到原花青素产品。该方法记载了提取过程在低温条件下操作，但其具体实施方式选择了45℃和50℃进行超声提取，并仍然以提取原花青素作为主要目标物，纯化过程中选择了与原花青素相适应的截留分子量，得到的冻干产品中原花青素的含量可以达到67-68％wt，总酚含量可达到85-87％wt。综上，马尾松树皮提取物含有多种酚类、糖类等多种成分组合而成的复合物，且不同的提取溶剂、提取过程、提取条件、分离纯化操作等，均会导致最终提取物中组分及组分比例的差异。目前，马尾松树皮提取物抗肿瘤活性的研究主要包括：CN104398541A公开通过有机溶剂萃取获得了包括海松酸、松香酸等成分的提取物，该提取物用于制备抵抗鳞状细胞癌和恶性黑色素瘤等皮肤癌的药物制剂。崔映宇等通过热水浸提得到的以原花青素为主的马尾松树皮提取物，对结肠癌、膀胱癌、神经胶质瘤、肺癌、肝癌、骨肉瘤、白血病等癌细胞株具有抑制作用；同时，冯冬茹等也发现该马尾松树皮提取物还能够抑制肺腺癌细胞Glc-82，肝癌细胞Bel-7402。Nian-YunYang等证实马尾松树脂提取物能够抑制人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431和肺腺癌细胞系A549的增殖。上述公开技术所使用的提取物均来自于松树皮或马尾松树皮，但由于提取方法不同，相应提取物以及提取物的活性也有较大变化。肺鳞状细胞癌(spuamouscellcarcinoma)是肺IMl支常见的组织学类型，发生在肺(支气管)的上皮性肿瘤，恶性程度高，镜下多见细胞角化和(或)细胞间桥，多起源于叶支气管、段支气管和亚段支气管，故肺鳞状细胞癌中央型，也有少部分肺鳞状细胞癌属周围型。肺鳞癌生长较腺癌快，但转移比腺癌晚，晚期鳞癌扣发生肺门淋巴结和纵隔淋巴结转移，远处转移少见。中老年男性烟者为高危人群，其发生率与烟龄和每天吸烟量成正比，鳞癌术后5年生存率平均为20％-25％。肺鳞癌与其他鳞状细胞癌如表皮癌的发病机理不同，肺鳞癌主要由支气管粘膜上皮发生鳞状上皮化生，进一步发生不典型增生，最后癌变；而其他鳞状细胞癌多发生在有鳞状上皮覆盖的部位，如皮肤、口腔等处。尽管有些关于马尾松提取物治疗表皮癌和口腔鳞癌的报本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于防治肺鳞癌的马尾松树皮提取物的制备方法，包括下述步骤：1)将马尾松树皮粉碎至200‑800目，制得马尾松树皮粉；2)在4～25℃条件下，在马尾松树皮粉中加入水，浸泡1‑10h，其中，马尾松树皮粉与水的质量体积比为1：2‑1:15；3)超声提取5min‑2h，过滤，制得马尾松树皮水提液；4)马尾松树皮水提取液经干燥，即得。

【技术特征摘要】
2014.09.30 CN 20141052097041.一种用于防治肺鳞癌的马尾松树皮提取物的制备方法，包括下述步骤：1)将马
尾松树皮粉碎至200-800目，制得马尾松树皮粉；2)在4～25℃条件下，在马尾松树
皮粉中加入水，浸泡1-10h，其中，马尾松树皮粉与水的质量体积比为1：2-1:15；3)
超声提取5min-2h，过滤，制得马尾松树皮水提液；4)马尾松树皮水提取液经干燥，
即得。
2.根据权利要求1所述的制备方法，所述马尾松树皮粉碎前经筛选、除杂、烘干
处理，优选所述烘干温度为30～80℃，更优选为40-70℃，最优选为50-60℃。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，所述马尾松树皮粉碎至250-700目，优
选为300-600目，更优选为350-500目。
4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，马尾松树皮粉与提取用水的质量体
积比为1:4-1:12，优选为1:6-1:10。
5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，所述提取物中有效成分包括多酚、
总碱和多糖，优选所述有效成分含有1-2％的多酚，15-20％的总碱和60...

【专利技术属性】
技术研发人员：张映波，王力，
申请(专利权)人：中山未标生物新技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44