本发明专利技术涉及一种用于提高无活菌素产量的发酵培养基及发酵方法，属于发酵技术领域；所述发酵培养基中树脂含优选量为5-40g/L；所述发酵生产无活菌素的方法包括将链霉菌的种子液接种于前述发酵培养基中进行液体发酵，发酵培养96-168小时后，从发酵液中提取无活菌素。本发明专利技术所述发酵培养基和发酵方法大幅度提高了无活菌素的发酵单位，适用于无活菌素的规模化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及发酵
，具体设及一种用于提高无活菌素产量的发酵培养基及 发酵方法。
技术介绍
无活菌素（Nonactin)是被称作大环四内醋的大环聚酸离子载体抗生素大家族 中结构最简单的成员。运些大环四内醋包括无活菌素、单活菌素（monactin)、二活菌素 (dinactin)、Ξ活菌素（trinactin)和四活菌素（tetranactin)。无活菌素是一种离子载 体，能够结合锭离子、巧离子、钟离子等金属离子，能够转运阳离子通过生物膜和人工膜，因 此可W用于制造锭电极等离子选择性电极、微电极和传感器。此外，无活菌素还具有抗细菌 的活性；抗肿瘤的活性；W及抗肿瘤多药耐药性；并且是有效的抗病毒试剂，可能被有效地 开发成抗艾滋病药。目前，国际上报道的获得无活菌素的途径有：化学全合成：无活菌素的全合成已经可W实现，但因为无活菌素结构的复杂性，使 得合成步骤很多，总收率非常低，因而化学全合成制备无活菌素不现实。 文献IdentificationofantifungalnaturalproductsviaS曰cch曰romyces cerevisiaebioassay:insightsintomacrotetrolidedrugspectrum,potencyandmode ofaction.MedMycol.，2013, 51:280 - 289报道，利用链霉菌发酵获得无活菌素，7. 2L发酵 培养基最后获得2. 7mg无活菌素，收率仅为0. 38mg/L。所用发酵培养基为：酵母膏2g/l，麦 芽汁5g/l，葡萄糖2g/L，抑7. 0 ;发酵条件为250巧m，28°C培养7天。文献Streptokordin，a newcytotoxiccompoundofthemethylpyridineclassfromamarine-derived Str巧tomycessp.KO畑 1-3238.J.Antibiot. ,2006,59:234 - 240 报道，利用链霉菌发酵获 得无活菌素，化发酵培养基最后获得17. 4mg无活菌素，收率仅为2. 18mg/L。所用发酵培养 基为：牛肉膏Ig/l，酵母膏IgA,酸水解酪蛋白2g/l，葡萄糖5g/l，麦芽汁5g/L;发酵条件 为200巧m，27°C培养7天。目前，无活菌素生产成本较高，发酵周期长、收率低，发酵结果不理想，难W实现工 业化。要使发酵水平有所提高必须改变培养基W及发酵方法。
技术实现思路
本专利技术目的是提供，用W解 决现有技术发酵生产无活菌素收率低等技术的问题。实现本专利技术的技术方案如下：一种用于提高无活菌素产量的发酵培养基，所述发酵培养基中含有树脂。 优选地，所述发酵培养基中树脂含量为5-40g/L; 进一步优选地，所述发酵培养基中树脂含量为l〇-30g/L; 更进一步优选地，所述发酵培养基中树脂含量为20g/L; 所述含量W发酵容器（例如发酵罐或摇瓶）实际装液量来计。 优选地，所述树脂为HP-20树脂、XAD-16树脂、XAD-8树脂、D202树脂、XD-5树脂 等中的一种或几种；进一步优选为HP-20树脂、XAD-16树脂。 所述发酵培养基中还含有碳源。 优选地，所述发酵培养基中碳源含量为4. 0-15.Og/L。 进一步优选地，所述发酵培养基中碳源含量为6. 0-10.Og/L。 优选地，所述碳源为燕麦片、甘油、葡萄糖、玉米淀粉、麦芽糊精等中的一种或几 种。 所述发酵培养基中还含有氮源。 优选地，所述发酵培养基中氮源含量为0.2-3. 5g/L。 进一步优选地，所述发酵培养基中氮源含量为0.5-1. 5g/L。 优选地，所述氮源为豆巧粉、棉巧饼粉、玉米浆水解液、酸水解酪蛋白、酵母浸膏/ 粉等中的一种或几种。 作为优选，所述碳源为燕麦片、甘油和葡萄糖；所述氮源为酸水解酪蛋白、酵母浸 膏/粉。 进一步地，所述发酵培养基还包含常规发酵培养基中所使用的无机盐。所述无机盐用量较佳范围为0. 5-2. 5g/L;所述无机盐优选为碳酸巧； 阳0%] 具体地，所述发酵培养基含有：树脂15-25g/l，燕麦片2. 5-7. 5g/l，甘油0. 5-5g/ L葡萄糖0. 1-2. 5g/L，酵母膏0. 1-2. 5g/L，酸水解酪蛋白0. 1-1.Og/L，碳酸巧0. 5-2. 5g/L。 在本专利技术的一个较佳实施例中，所述发酵培养基含有：HP-20树脂10.Og/l， XAD-16树脂10.Og/l，燕麦片5.Og/l，甘油2. 5g/l，葡萄糖0. 5g/l，酵母膏0. 5g/l，酸水解 酪蛋白0. 2g/l，碳酸巧l.Og/L。 在本专利技术的另一较佳的实施例中，所述发酵培养基含有：HP-20树脂25. 0旨/1，燕 麦片7. 5g/l，甘油5g/l，葡萄糖2. 5g/l，酵母膏2. 5g/l，酸水解酪蛋白Ig/l，碳酸巧2. 5g/ L。 在本专利技术的又一较佳的实施例中，所述发酵培养基含有：XAD-16树脂15.Og/l，燕 麦片2. 5g/L甘油0. 5g/L葡萄糖0.Ig/L酵母膏0.Ig/L酸水解酪蛋白0.Ig/L碳酸巧 0.5g/L〇 所述发酵培养基抑6. 8-7. 5，优选抑7. 2。 所述发酵培养基可采用常规方法配制及灭菌；例如12rC灭菌30-60min。 本专利技术还提供一种发酵生产无活菌素的方法，包括将链霉菌的种子液接种于前述 发酵培养基中进行液体发酵，发酵培养后从发酵液中提取无活菌素。 优选地，所述发酵培养时间96-168小时；所述发酵培养溫度为28-32Γ;发酵培养 过程中抑为6. 8-7. 5。 所述链霉菌的种子液的制备可采用常规方法。例如将链霉菌的斜面培养物接种于种子培养基，于28-30°C，转速180-25化pm培 养2-3天，获得种子液。 所述链霉菌的种子培养基可采用本领域常规培养基。 优选地，所述链霉菌种子培养基含有：麦芽汁10.Og/l，酵母膏4.Og/l，葡萄糖 4.Og/L;其抑7. 3 ;-般 12TC灭菌 30min。 所述从发酵液中提取无活菌素的方法可采用常规方法。 优选地，所述从发酵液中提取无活菌素的方法包括： 将所述发酵液过滤，得菌丝和滤液两部分；将所述菌丝冻干（一般5-7天），用甲 醇提取1-3次，乙酸乙醋提取1-3次，正己烧提取1-2次，得菌丝提取液；将所述滤液用等 体积乙酸乙醋萃取1-3次，得滤液提取液；合并所述菌丝提取液和滤液提取液，减压浓缩得 浸膏；将所述浸膏用硅胶（230-400目）进行柱层析，分别用0%、50%、80%、100%乙酸乙 醋-正己烧W及100 %甲醇进行梯度洗脱，收集50 %和80 %乙酸乙醋-正己烧洗脱液，室溫 结晶，W及用丙酬重结晶，即得（无活菌素精品）。 其中，所述链霉菌优选为灰色链霉菌灰色亚种（Str巧tomycesgriseussubsp. Griseus)，保藏编号CGMCC4. 181，可从中国普通微生物菌种保藏管理中屯、（化inaGeneral MicrobiologicalQiltureCollectionCenter,CGMCC)购得。 本专利技术的有益效果在于： 本专利技术解决了无活菌素生产成本较高，发酵水平不理想的不足，提供了一种有利 于灰色链霉菌灰色亚种（S本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于提高无活菌素产量的发酵培养基，其特征在于，所述发酵培养基中含有树脂。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：詹玉莲，董武，郑绍伦，
申请(专利权)人：桂林电子科技大学，詹玉莲，内蒙古民族大学，
类型：发明
国别省市：广西;45
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