一种利用内源CRISPR-Cas系统进行原核生物基因组编辑的方法技术方案

本发明专利技术一种利用内源CRISPR-Cas系统进行原核生物基因组编辑的方法。在对含有内源CRISPR-Cas系统的原核生物进行基因组编辑时，只需构建一个同时携带人工CRISPR簇和供体DNA的编辑质粒，在内源CRISPR系统对基因组发生DNA干涉后通过同源重组达到对基因组的编辑。其最大的优点在于：应用宿主范围广，所有含有内源CRISPR-Cas系统的细菌和古菌均可操作；可用于多种编辑方式，缺失、插入和点突变等均可操作；更高的编辑效率，筛选阳性率高，背景低；流程简单，时间周期短，大大减轻原核生物基因组编辑的工作量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因组学及基因工程和生物
，具体设及到一种利用内源 CRISPR-Cas系统进行原核生物基因组编辑的方法。
技术介绍
CRISPR-Cas系统作为一种原核生物抵御病毒等外源入侵核酸的获得性免疫系统， 广泛存在于大约90%的古菌和40%细菌中（VanderOostJetal.,2014;BarrangouR etal.，2014)。CRISPR-Cas系统被划分为Ξ个主要类型：I型，II型和III型；它们分别有 一个标志性蛋白：Cas3,Cas9 和Casio(MakarovaKSetal.，2011)。II型CRISPR系统仅 需要化s9 -个蛋白与一条crRNA和trans-actingRNA行使DNA干设活性值eltchevaE etal.，2011;GasiunasGetal.，2012)。简单的II型CRISPR系统因此被开发成真核生 物基因组编辑工具（JinekΜetal.,2012;WangΗet曰1.,2013)，并广泛应用于不同的真 核生物和细菌值OU化aJAetal. , 2014;SanderJDetal. , 2014;HsuP本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有CRISPR‑Cas系统的原核生物在内源编辑原核生物基因组中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：佘群新，梁运祥，李英俊，潘赛夫，任敏，冯明霞，彭楠，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42