7’-乙基-8’-氯-3-羟基苯并[c]吡啶并[4,3,2-mn]吖啶-8-酮在血管生成抑制药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了7’-乙基-8’-氯-3-羟基苯并[c]吡啶并[4,3,2-mn]吖啶-8-酮在血管生成抑制药物中的应用，所述化合物的结构如式(1)所示；；该应用在治疗糖尿病引起的视网膜神经损伤、类风湿性关节炎以及动脉粥样硬化上具有意想不到的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抑制血管生成的应用。更具体地说，本专利技术涉及7’-乙基-8’-氯-3-羟基苯并[c]吡啶并[4,3,2-mn]吖啶-8-酮在血管生成抑制药物中的应用。
技术介绍
视网膜病变、风湿性关节炎、动脉粥样硬化等疾病的发生与血管生成有密切关系。(1)肿瘤新生血管生成是指在肿瘤组织中，血管内皮细胞在相关刺激血管生成信号的作用下由相对静止转为快速生长，在已存在的血管组织中产生新生血管的过程，是肿瘤生长的重要前提。肿瘤新生血管的生成满足了肿瘤组织进一步生长代谢的需要，使肿瘤细胞不断分裂增殖，并成为肿瘤细胞浸润侵袭、远处转移的重要路径。Folkman教授于1971年首次提出了肿瘤的生长需要新生血管形成。血管生成抑制剂是通过抑制促血管生成的生长因子、生长因子受体及下游信号通路等抑制新生血管生成，从而抑制肿瘤的生长和转移的发生。抗肿瘤新生血管生成治疗已成为恶性肿瘤综合治疗中的重要方法之一。针对肿瘤新生血管形成或血管生成的治疗手段在癌症治疗中占有重要地位，贝伐单抗等针对血管内皮生长因子(VEGF)的单克隆抗体生物制剂在临床上已被广泛运用。(2)在视网膜血管性疾病的病理改变过程中，血管内皮生长因子(VEGF)呈高表达状态；抗VEGF治疗的临床试验证实，治疗可使脉络膜新生血管膜缩小、液体渗漏减少，在新生血管性年龄相关性黄斑变性、各种病因的脉络膜新生血管膜、糖尿病和静脉阻塞导致的黄斑水肿、早产儿视网膜病变及新生血管性青光眼的治疗中，抗VEGF治疗显示出一定程度的有效性。(3)血管生成是类风湿性关节炎(RA)早期滑膜病理改变的特征之一，也是产生和维持RA血管翳的主要因素，新血管生成被认为形成和维持RA血管翳的重要因素，抑制血管生成的药物可以有效缓解RA的病情。(4)动脉粥样硬化引起血管阻塞的同时也涉及到动脉新血管生成。新血管从动脉外膜的营养血管开始生长并延伸入粥样斑块下内膜层，这些新生毛细血管可以起到促进粥样斑块生长的作用。因此抑制血管生成的药物对于抗动脉粥硬化治疗有着重要意义。实验已经建立体内外的各类血管生成模型，应用于抗血管生成药物筛选。近年来新兴的模式生物斑马鱼(Daniorerio)已成为一个较为理想的血管生成模型，并用于抗血管生成药物的筛选。研究表明，以斑马鱼为材料，成功地构建了新血管生成的药理模型，并用血管生成抑制药物(Su5416，TNP470)和vEGF进行验证，结果与对哺乳动物的作用效果一致，用实验证明利用该模型可预测药物对人的作用效果，即以斑马鱼作为血管生成模型筛选小分子药物是可行的。对于本专利技术涉及的7’-乙基-8’-氯-3-羟基苯并[c]吡啶并[4,3,2-mn]吖啶-8-酮在治疗糖尿病引起的视网膜神经损伤、类风湿性关节炎以及抗动脉粥样硬化中的用途属于首次公开，由于其对于上述疾病的治疗强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于抑制血管生成显然具有显著的进步。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，提供了7’-乙基-8’-氯-3-羟基苯并[c]吡啶并[4,3,2-mn]吖啶-8-酮在血管生成抑制药物中的应用，所述化合物的结构如式(1)所示；优选地，所述应用包括治疗糖尿病引起的视网膜神经损伤。优选地，所述应用包括治疗类风湿性关节炎。优选地，所述应用包括治疗动脉粥样硬化。本专利技术至少包括以下有益效果：通过实验证明，7’-乙基-8’-氯-3-羟基苯并[c]吡啶并[4,3,2-mn]吖啶-8-酮可以有效地降低糖尿病引起的视网膜病变神经损伤，治疗类风湿性关节炎以及动脉粥样硬化。本专利技术的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本专利技术的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。实施例11.1实验动物选择出生1-3d的标准普通级SD大鼠，由广西中医药大学提供，符合国家医用动物使用标准，标准号为清洁级。1.2SD大鼠视网膜神经细胞的原代培养及高糖模型的建立1.2.1配制以下主要试剂含10％胎牛血清培养液、葡萄糖、5-溴-2’脱氧尿苷、4％多聚甲醛、PBS磷酸盐缓冲液。1.2.2多聚赖氨酸处理细胞培养瓶或培养板为促进所培养的视网膜神经细胞的贴壁，于接种前预先用多聚赖氨酸处理细胞培养瓶或培养板。方法：于实验前一天，25mm2培养瓶加入100μg/ml多聚赖氨酸2.0ml，均匀覆盖瓶底，于37℃培养箱内过夜，吸除培养瓶内多聚赖氨酸，PBS洗三遍，放于37℃培养箱内干燥备用。拟行免疫荧光鉴定的细胞接种于6孔板，培养板中预先放置27mm×29mm的盖玻片，并如上所述方法用多聚赖氨酸提前处理。1.2.3原代视网膜神经细胞悬液的制备将出生1-3d的SD大鼠浸泡至75％酒精中进行消毒5min，超净工作台内无菌取眼球，于冰浴PBS(含青霉素100U/ml青霉素及100μg/ml链霉素)洗3遍，显微镜下自角巩膜缘后约1mm处作环形切口，去除眼前节组织及玻璃体，钝性分离出视网膜神经上皮层，冰浴PBS漂洗2遍。显微眼科剪将取出的视网膜神经上皮层剪成约1mm2大小的组织块，收集于离心管内。加入约10倍体积的0.125％胰蛋白酶，37℃消化10-15min。含10％胎牛血清的DMEM/F12培养液终止消化，吸管轻轻反复吹打成单细胞悬液后400目不锈钢滤网过滤，1000r/min离心5min，收集细胞沉淀，含10％胎牛血清的DMEM/F12培养液重悬细胞。细胞计数板进行细胞计数，调整细胞密度为1×106个/ml。1.2.4原代视网膜神经细胞的接种培养细胞悬液制备好后将其接种于事先置有包被了多聚赖氨酸盖玻片的6孔板或者多聚赖氨酸包被过的培养瓶中，置于37℃、5％的CO2培养箱培养。当培养24h时加入终浓度为20μg/ml的5-溴-2’脱氧尿苷以抑制非神经细胞的生长，48h时换液，此后每2-3d换液一次。1.2.5高糖模型的建立将细胞悬液接种于24孔板中，细胞培养3d时，选择30mmol/L葡萄糖继续培养48h，观察细胞形态。1.3实验分组及方法①正常细胞培养组；②高糖损伤组；③7’-乙基本文档来自技高网...

【技术保护点】
7’‑乙基‑8’‑氯‑3‑羟基苯并[c]吡啶并[4,3,2‑mn]吖啶‑8‑酮在血管生成抑制药物中的应用，所述化合物的结构如式(1)所示；。

【技术特征摘要】
1.7’-乙基-8’-氯-3-羟基苯并[c]吡啶并[4,3,2-mn]吖啶-8-酮在血管生成抑制药物中的应用，所述化合物的结构如式(1)所示；
。
2.一种如权利要求1所述的血管生成抑制药物中的应用，其特征在于，治...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨洋，
申请(专利权)人：杨洋，
类型：发明
国别省市：广西;45