包含包封的antagomir的组合物制造技术

本发明专利技术涉及包含有效量的涉及血管生成的miRNA或其前体的至少一种抑制剂的组合物，其中将所述抑制剂微包封成聚合物生物可降解且生物相容的微球。本发明专利技术还涉及所述组合物用于预防或治疗心脏疾病，包括由缺血引起的心脏疾病的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术设及旨在预防或治疗屯、脏疾病，包括屯、脏缺血性疾病的药物制剂的领域。
技术介绍
急性屯、肌梗死（AMI)，也称为屯、肌梗死并通常被称为屯、脏病发作，代表世界上大多 数工业化国家的一个主要健康风险，并且仍然是世界范围内发病率和死亡率的主要原因。 通常，AMI是由突然且持续缺乏流向屯、脏组织的血液造成，运一般是冠状动脉狭窄 或闭塞的结果。没有充分的血液供给，所述组织变得缺血，造成屯、肌细胞（屯、脏肌肉细胞） 和血管结构的死亡。 近几十年来在治疗AMI中有很多进展，主要设及与药物疗法相结合的冠状动脉再 灌注。再灌注疗法已经通过减少梗死面积和改善短期和长期的发病率和死亡率而成功改变 AMI的自然进展。然而，使用目前可获得的两种再灌注策略有实质性的限制：纤维蛋白溶解 导致低程度的冠状动脉通透性，在AMI进化的开始几小时期间不能频繁应用初期血管成形 术。此外，在一些插管的患者中，除了正常的屯、外膜血流，出现"无复流"现象或缺乏微血管 再灌注，导致不良功能性结果。运意味着再灌注疗法不能预防屯、肌的有害重构（胶原蛋白 瘤痕形成的复杂的内在修复过程，导致屯、室扩张、收缩功能障碍和随后的屯、脏衰竭）的发 生。它在大约30%AMI中的发生主要与仍知之甚少的较大的梗死面积、微血管阻塞及不良 修复反应有关。 因为修复性纤维化和缺血组织的功能恢复依赖于建立供应氧合血的网络，已经做 出努力W通过在愈合区域诱导新血管形成来改善血管床，从而在原位实现将损伤区域直接 转变为功能性组织。 血管生成的治疗性诱导可W减轻运种现象的发生。尽管如此，若干年静脉促血管 生成因子的临床试验结果并不令人满意。不被理论束缚，认为造成运种失败的原因之一是 静脉途径不能够在严重受损的屯、脏条件下到达并在祀组织中维持有效的药物浓度，从而促 进并维持功能性的血管网络。 为了解决运个问题并预防AMI后的屯、功能不全，在过去十年内开始了再生屯、肌和 血管可能性的研究。施用多能祖细胞和灌注血管生长因子的初始研究显示有前途的结果， 但转到临床设置则显示运些治疗不能W足够恢复被破坏的屯、肌的方式再生新血管。 今天，血管生成和用细胞治疗的受损屯、脏的再增殖W及特定的药物和再同步化治 疗能够减缓运种现象的进展，但预防它的发生对于屯、脏医学仍然是有疑问的挑战。因此，需 要预防有害的左屯、室重构的新的治疗策略。 发巧简沐 本专利技术设及通过施用通过调节microRNA的活性或表达来逆转或预防屯、室重构 的组合物治疗屯、脏疾病，优选缺血性疾病。更具体地，本专利技术提供包含设及血管生成的 microRNA的抑制剂的组合物，所述抑制剂优选包含于能够将所述抑制剂局部释放至缺血祀 组织的新的递送介质中。此外，本专利技术提供逆转或预防屯、室重构的方法和用于所述方法的 试剂盒。 本专利技术设及一种组合物，其包含有效量的至少一种设及血管生成的miRNA或其前 体的抑制剂，其中将所述抑制剂微包封成聚合的生物可降解且生物相容的微球。在上述组合物的一些实施方案中，所述miRNA选自包含miR-92 (包括miR-92a-l、 miR-92a-2 和miR-92b)、miR-17、miR-503、miR-16(包括miR-16-l和miR-16-2)、 miR-374 (包括miR-374a、miR-374b和miR-374c)、miR-24 (包括miR-24-l和miR-24-2)、 miR-483、miR-：M(包括miR-：Ma、miR-34b和miR-：Mc)、miR-20 (包括miR-20a和miR-20b)、 miR-15 (包括miR-15a和miR-15b)的家族。 在上述组合物的一些实施方案中，所述miRNA的抑制剂是长度为8-49个核巧酸的 具有祀向所述miRNA或其前体的序列的寡核巧酸。在某些实施方案中，所述寡核巧酸是与 所述祀miRNA或其前体至少部分互补的反义寡核巧酸。所述反义寡核巧酸选自核糖核巧 酸、脱氧核糖核巧酸、小RNA、antagomir、LNA、CDNA、PNA、吗嘟代寡核巧酸或它们的组合。 在上述组合物的一些实施方案中，所述miRNA的抑制剂由antagomir组成，优选由 包含核巧酸序列的antagomir组成，所述核巧酸序列包含至少16个与选自本文所述的SEQ ID NO :1-58的序列的核巧酸互补的连续核巧酸。[001引在上述组合物的一些实施方案中，所述miRNA的抑制剂由包含序列SEQIDNO:59 或60和其除碱基替换之外的修饰，及其片段的antagomir组成，所述片段由SEQIDNO:59 或60的至少8个连续核巧酸的子序列组成。 在上述组合物的一些实施方案中，所述微球的直径不超过25ym，包括直径为 5-20ym，优选5-15ym的微球。 在上述组合物的一些实施方案中，所述微球由聚-d，l-丙交醋（PLA)组成的聚合 物制成，所述聚合物任选地与一种或多种其他聚合物混合。 本专利技术还设及逆转或预防需要其的受试者屯、室重构的方法，包括向所述受试者施 用有效量的上述组合物。 本专利技术还设及生物可降解且生物相容的微球群体用于治疗或预防屯、肌梗死的用 途，其中所述微球： -平均直径为 5-20Jim，优选 5-15Jim;-由聚-d，^丙交醋-乙交醋共聚物（PLGA);聚-d，1-丙交醋（PLA)或它们的混 合物制成；[002引-包含1% -15%w/w的能够预防屯、室重构的治疗剂； 其中所述治疗剂由选自W下的miRNA或其前体的抑制剂组成：miR-92 (包 括miR-92a-l、miR-92a-2 和miR-92b)、miR-17、miR-503、miR-16(包括miR-16-l和 miR-16-2)、miR-374 (包括miR-374a、miR-374b和miR-374c)、miR-24 (包括miR-24-1 和 miR-24-2)、miR-483、miR-：M(包括miR-：Ma、miR-34b和miR-：Mc)、miR-20 (包括miR-20a 和miR-20b)、miR-15 (包括miR-15a和miR-15b)，优选miR-92a。【附图说明】图I显示通过扫描电镜测定的antagomi;r-92a-PLGA微球的形态。图2显示通过激光散射测定的antagomi;r-92a-PLGA微球的尺寸分布。 图3显示通过重复注射微球直到120mg对血液动力学和左屯、室收缩性的作用。 图4显示通过重复注射微球直到240mg对血液动力学和左屯、室收缩性的作用。 图5显示单次冠状动脉内注射根据本专利技术的微球的分子作用的研究方案。 图6显示本专利技术的微球对miR-92a的抑制特异性。 图7显示包封的antagomi;r-92a诱导梗死组织中的血管生成。通过将血管总数除 W总的梗死面积计算梗死区的血管密度。N= 20.冲<0. 01。[003。图8 :间接测量。AMI后一个月，在用包封的antagomir-92a、安慰剂或盐水处理的小猪的梗死相关动脉中测量基础和最小的微血管阻力指数。（a)用血压（mmHg)乘W冠脉流 量（ml/min)来计算基础微血管阻力指数（MRI)，所述血压用位于顶端LAD(Pd)的压力线测 量，和所述冠脉流本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组合物，包含有效量的涉及血管生成的miRNA或其前体的至少一种抑制剂，其中将所述抑制剂微包封成聚合物生物可降解且生物相容的微球。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：MA·阿莘，E·费雷特，A·佩雷兹，N·B·戈塔尔达，A·罗德里奎兹西诺瓦斯，I·B·瓦尔特，A·D·加西亚多拉多加西亚，
申请(专利权)人：皮埃尔法伯制药股份有限公司，瓦尔德西布伦大学基金会医院德雷塞卡研究所，
类型：发明
国别省市：法国;FR