一株可降解苯酚且具有产电特性的蜡样芽孢杆菌制造技术

一株可降解苯酚且具有产电特性的蜡样芽孢杆菌，涉及一株蜡样芽孢杆菌及其应用。本发明专利技术提供一株蜡样芽孢杆菌，可降解苯酚，且具有产电特性，为利用微生物处理苯酚奠定了基础。本发明专利技术可降解苯酚的蜡样芽孢杆菌为蜡样芽孢杆菌WL027，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2015年7月10日，保藏编号为CCTCC No：M 2015439。本发明专利技术蜡样芽孢杆菌WL027能够降解苯酚，且具有产电特性，对青霉素、氯霉素和四环素有良好的耐受性，具有耐盐性，可利用苯胺为底物。该蜡样芽孢杆菌可应用于微生物燃料电池。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及一株蜡样芽抱杆菌及其应用。
技术介绍
苯酪是芳香化合物的一种，是染料、造纸、农药、医药等行业的生产原料和中间体。 随着我国工业迅速发展，对苯酪需求量越来越大，同时含酪废水的排放量也在不断增加，对 环境的污染日趋严重，被我国列为"水中优先控制污染物黑名单"。苯酪属于原生质物质，对 于一切生物个体具有毒害作用，且具有致效应"。未经处理的苯酪废水，不但会污染环 境，还会使蛋白质凝结，从而危害人类健康。 目前，含酪废水的处理方法有物理处理方法（吸附法、溶剂萃取法和液膜法）、化 学处理法（氧化法、沉淀法和光催化法）和生物处理法（活性污泥法、酶处理法和固定化微 生物技术）。物理处理法和化学处理法虽然苯酪的回收率可达90%W上，但是处理后排出 的物质依旧会对环境产生污染。采用微生物处理法不但不会产生二次污染，还具有节约成 本和创造经济效益的特点。因此，利用微生物处理苯酪具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术提供一株蜡样芽抱杆菌度acilluscereus)，可降解苯酪，且具有产电特 性，为利用微生物处理苯酪奠定了基础。 本专利技术可降解苯酪的蜡样芽抱杆菌为蜡样芽抱杆菌度acilluscereus)WL027,保 藏在中国典型培养物保藏中屯、（CCTCC)，保藏地址是武汉市武汉大学，保藏日期为2015年7 月10日，保藏编号为CCTCCNo:M2015439。 本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027为革兰氏染色阳性，杆状，菌体大小为（1. 0ym~ 1. 2ym)X(3. 0ym~5. 0ym)，产芽抱，有鞭毛，可运动。在MYP培养基上可生长，菌落直径 达8~10mm，质地软，挑起呈丝状，培养4化菌落表面呈毛玻璃状，并产生红色色素。 本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027的接触酶试验呈阳性，氧化酶试验呈阳性，淀粉水解 试验呈阳性。蜡样芽抱杆菌WL027的生长实验结果如表1所示： 表1本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027可W氯化锭、碳酸锭、硝酸锭和硝酸钢为氮源，其中最 佳氮源为硝酸锭，可W乙酸钢、薦糖、乳糖、葡萄糖和果糖为碳源，其中最佳碳源为薦糖。 [001引本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027可在肉汤培养基和无机盐培养基中生长，最适生长抑 为6,最适生长溫度为30°C，最适装液量为150血/250血，最适的接种量为2%。[001引本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027通过16SrDNA序列比对分析，与芽抱杆菌属 度acillus)内各种之间有极高的同源性，同源性为95%W上。通过结合菌体形态特征、生 长条件、生理生化鉴定结果确定蜡样芽抱杆菌WL027属于芽抱杆菌科度acillaceae)芽抱 杆菌属度acillus)蜡样芽抱杆菌度acilluscereus)。本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027能够降解苯酪，且具有产电特性，可应用于微生物燃 料电池。对青霉素、氯霉素和四环素有良好的耐受性，具有耐盐性，可利用苯胺为底物。既 可耐受一定浓度的重金属离子，且可在相应重金属W较高浓度存在时保持较高的苯酪降解 能力。 本专利技术蜡样芽抱杆菌度acilluscereus)WL027,属于芽抱杆菌属度acillus)，保 藏在中国典型培养物保藏中屯、（CCTCC)，保藏地址是武汉市武汉大学，保藏日期为2015年7 月10日，保藏编号为CCTCCNo:M2015439。【附图说明】 图1为本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027与GenBank中收录的相近菌株的16SrDNA序 列进行同源性比对所构建的系统发育树；图2为本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027的生长曲线； 图3为本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027的苯酪降解曲线；图4为本专利技术蜡样芽抱杆菌WL027的 循环伏安曲线；图5为不同盐度条件对菌体生长的影响曲线；图6为不同盐度条件对苯酪 降解情况的影响曲线；图7为四种重金属离子化2\仿 2\化2+和化2+对蜡样芽抱杆菌WL027 的生长影响曲线；图8为四种重金属离子化2\Co2\Pb2+和化2+对蜡样芽抱杆菌WL027的苯 酪降解率影响曲线。【具体实施方式】 本专利技术技术方案不局限于W下所列举【具体实施方式】，还包括各【具体实施方式】间的 任意组合。【具体实施方式】 一：本实施方式可降解苯酪的蜡样芽抱杆菌为蜡样芽抱杆菌 度acilluscereus)WL027,保藏在中国典型培养物保藏中屯、（CCTCC)，保藏地址是武汉市武 汉大学，保藏日期为2015年7月10日，保藏编号为CCTCCNo:M2015439。 本实施方式蜡样芽抱杆菌WL027为革兰氏染色阳性，杆状，菌体大小为（1. 0Jim~ 1. 2ym)X(3. 0ym~5. 0ym)，产芽抱，有鞭毛，可运动。在MYP培养基上可生长，菌落直径 达8~10mm，质地软，挑起呈丝状，培养4化菌落表面呈毛玻璃状，并产生红色色素。 本实施方式蜡样芽抱杆菌WL027的接触酶试验呈阳性，氧化酶试验呈阳性，淀粉 水解试验呈阳性。 本实施方式蜡样芽抱杆菌WL027可W氯化锭、碳酸锭、硝酸锭和硝酸钢为氮源，其 中最佳氮源为硝酸锭，可W乙酸钢、薦糖、乳糖、葡萄糖和果糖为碳源，其中最佳碳源为薦 糖。 本实施方式蜡样芽抱杆菌WL027可在肉汤培养基和无机盐培养基中生长，最适生 长抑为6,最适生长溫度为30°C，最适装液量为150血/250血，最适的接种量为2%。 肉汤培养基配方：由3g/L牛肉膏、lOg/L蛋白腺、5g/LNaCl和蒸馈水组成。无机盐培养基配方：由 3g/LKH2PO4、6g/LNa2HP〇4、0.5g/LNaCl、0.2g/L酵母膏、 lg/LNH4Cl、0.Ollg/LCaCl2、〇. 〇25g/LFeS〇4、0. 24g/LMgS〇4、2. 75g/L化2册〇4、4. 22g/L NaH2P〇4、200mg/LKMn〇4和蒸馈水组成。本实施方式蜡样芽抱杆菌WL027是由微生物燃料电池中分离得到的，分离方法按W下步骤进行： 微生物燃料电池（MFC)采用盐桥连接阴阳两极，是双室微生物燃料电池。电池阳 极和阴极的有效容积均是550mU阳极反应器上端中部设有取样口，两端分别设有进水口和 出水口。阳极由经氯化铁改性的碳拉巧cmX5cm，有效面积12. 56cm2)，阴极的电极采用的是 碳刷，导线用铜丝链接，露出的部分用环氧树脂黏住。阴极室和阳极室之间用盐桥连接，接 口处均做绝缘处理。电路中设有外接变阻箱（0~9999Q)，外电路电阻采用1000Q。实验 过程中所产生的电压通过双通道电压采集系统（PIS0813)直接记录，电压采集系统通过导 线与台式电脑相连，每60s测定一次数据。电池启动前，阳极室通入20min的，保证阳极室 的厌氧环境。阳极室接种菌源为文昌污水处理厂厌氧段和好氧段污水1:1混合接入到阳极 室，同时加入lOOOmg/L的葡萄糖和500mg/L苯酪。阴极室加入的是含有KMn〇4的阴极缓冲 溶液。将整个电池阳极装置放在溫度为30°C恒溫磁力揽拌器上运行，揽拌W便维持阳极溶 液的均匀。待外界电压升高到稳定后，再经过10天的电池运行，测得电压为0. 15V。将阳极 室中的碳拉取出，放入到无菌生理盐水中，振荡，使粘在上面的菌体进入到生理盐水中。然 后采用肉汤培养基于30°C，160r/min对菌种进行富集培养2地。将富集后的菌液用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株可降解苯酚且具有产电特性的蜡样芽孢杆菌，其特征在于该菌株为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)WL027，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址是武汉市武汉大学，保藏日期为2015年7月10日，保藏编号为CCTCC No：M 2015439。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：燕红，王丽丽，杜霞，
申请(专利权)人：哈尔滨理工大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23