一种纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法技术

一种纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法，包括如下步骤：(1)取纯色万代兰无菌试管苗接种到MS繁殖培养基上培养获得无菌丛生芽叶片；(2)用解剖刀在所述无菌丛生芽叶片背面划伤后置于MS繁殖培养基中培养，诱导获得类原球茎。采用本发明专利技术得到的纯色万代兰类原球茎繁殖系数高，类原球茎粗壮，经复壮后获得健壮植株，在短期内提供健壮的纯色万代兰优质种苗，有效解决了纯色万代兰的规模化育苗问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物繁殖方法，特别是。
技术介绍
纯色万代兰(Vanda subconcolor T.Tang et F.T.Wang)为兰科万代兰属附生草本植物，属于热带附生兰，具有较强的抗旱能力，容易栽培，叶片和根都很有特色，叶片呈棒状，生长在直立的茎两旁，花序从叶腋中长出，四季都可以开花；若光照充足，一年可以开2-3次花；花期长，花色艳丽繁多，花姿奔放，是世界级的花卉名品，富有极高的观赏价值。纯色万代兰的种子细小，本身无法储存养分，自然条件下，其种子萌发阶段完全依靠菌根真菌为其提供养分，自然繁殖率低，种子种苗稀缺，资源更新非常困难。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，它能够快速繁殖出大量适合移栽的优良纯色万代兰种苗、满足生产需要。本专利技术通过以下技术方案达到上述目的:，包括以下步骤:(I)无菌叶片的获得:取纯色万代兰无菌试管苗，接种到MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6_8小时/天的条件下培养60天得到无菌丛生芽叶片，其中MS培养基中添加0.2mg/L的6-苄基腺嘌呤6_BA、0.6mg/L的激动素KT、3.0mg/L萘乙酸NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8 ;(2)叶片诱导获得类原球茎:将步骤(I)得到的无菌丛生芽叶片用解剖刀在叶片背面以#字形划伤后平铺在MS繁殖培养基上，在培养温度为23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6-8小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS培养基中添加0.2-0.6mg/L 的 6-苄基腺嘌呤 6_BA、0.2-0.6mg/L 的激动素 KT、3.0-5.0mg/L 萘乙酸 NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8 ;本专利技术的突出优点在于:(I)采用生物技术对纯色万代兰进行组织培养快速繁殖，能够在短时间内培育出大量适合栽培种植的纯色万代兰幼苗，保障纯色万代兰种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。(2)通过幼嫩叶片为外植体诱导分化获得大量的类原球茎，为获得珍稀濒危植物纯色万代兰组培苗提供了新的途径。(31)采用本专利技术得到的纯色万代兰类原球茎的增殖个数达到30-40个，类原球茎粗壮，复壮后获得健壮植株。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术的技术方案进一步说明。实施例1本专利技术所述的纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法的一个实例，包括以下步骤:(I)无菌叶片的获得:取纯色万代兰无菌试管苗，接种到MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6_8小时/天的条件下培养60天得到无菌丛生芽叶片，其中MS培养基中添加0.2mg/L的6-苄基腺嘌呤6_BA、0.6mg/L的激动素KT、3.0mg/L萘乙酸NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8 ;(2)叶片诱导获得类原球茎:将步骤(I)得到的无菌丛生芽叶片，用解剖刀在叶片背面以#字形划伤后平铺在MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6-8小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS培养基中添加0.2mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.4mg/L的激动素KT、3.0mg/L萘乙酸NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，类原球茎增殖个数为37个。实施例2本专利技术所述的纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法的另一个实例，包括以下步骤:(I)无菌叶片的获得:取纯色万代兰无菌试管苗，接种到MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6_8小时/天的条件下培养60天得到无菌丛生芽叶片，其中MS培养基中添加0.2mg/L的6-苄基腺嘌呤6_BA、0.6mg/L的激动素KT、3.0mg/L萘乙酸NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8 ;(2)叶片诱导获得类原球茎:将步骤(I)得到的无菌丛生芽叶片，用解剖刀在叶片背面以#字形划伤后平铺在MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6-8小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS培养基中添加0.2mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的激动素KT、4.0mg/L萘乙酸ΝΑΑ、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，类原球茎增殖个数为28个。实施例3本专利技术所述的纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法的再一个实例，包括以下步骤:(I)无菌叶片的获得:取纯色万代兰无菌试管苗，接种到MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6_8小时/天的条件下培养60天得到无菌丛生芽叶片，其中MS培养基中添加0.2mg/L的6-苄基腺嘌呤6_BA、0.6mg/L的激动素KT、3.0mg/L萘乙酸NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8 ;(2)叶片诱导获得类原球茎:将步骤(I)得到的无菌丛生芽叶片，用解剖刀在叶片背面以#字形划伤后平铺在MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6-8小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS培养基中添加0.6mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的激动素KT、5.0mg/L萘乙酸ΝΑΑ、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，类原球茎增殖个数为30个。实施例4本专利技术所述的纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法的又一个实例，包括以下步骤:(I)无菌叶片的获得:取纯色万代兰无菌试管苗，接种到MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6_8小时/天的条件下培养60天得到无菌丛生芽叶片，其中MS培养基中添加0.2mg/L的6-苄基腺嘌呤6_BA、0.6mg/L的激动素KT、3.0mg/L萘乙酸NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8 ;(2)叶片诱导获得类原球茎:将步骤(I)得到的无菌丛生芽叶片，用解剖刀在叶片背面以#字形划伤后平铺在MS繁殖培养基上，在培养温度23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为6-8小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS培养基中添加0.4mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.6mg/L的激动素KT、4.0mg/L萘乙酸ΝΑΑ、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，类原球茎增殖个数为45个。【主权项】1.，其特征在于:该方法包括以下步骤: (1)无菌叶片的获得:取纯色万代兰无菌试管苗，接种到MS繁殖培养基上，在培养温度.23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：(1)无菌叶片的获得：取纯色万代兰无菌试管苗，接种到MS繁殖培养基上，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为6‑8小时/天的条件下培养60天得到无菌丛生芽叶片，其中MS培养基中添加0.2mg/L的6‑苄基腺嘌呤6‑BA、0.6mg/L的激动素KT、3.0mg/L萘乙酸NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；(2)叶片诱导获得类原球茎：将步骤(1)得到的无菌丛生芽叶片，用解剖刀在叶片背面以#字形划伤后平铺在MS繁殖培养基上，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为6‑8小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS培养基中添加0.2‑0.6mg/L的6‑苄基腺嘌呤6‑BA、0.2‑0.6mg/L的激动素KT、3.0‑5.0mg/L萘乙酸NAA、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：韦坤华，王晓峰，李林轩，黄宝优，肖冬，缪剑华，韦莹，李翠，王一诺，韦范，
申请(专利权)人：广西壮族自治区药用植物园，
类型：发明
国别省市：广西;45