一种美容作用的药物制造技术

本发明专利技术属于医药或医疗器械技术领域，本发明专利技术公开了一种美容作用的药物，其特征在于该药物由交联透明质酸钠、生理盐水和pH调节剂制备而成。该凝胶剂中pH调节剂采用透明质酸，稳定性试验研究表明，采用透明质酸作为pH调节剂的凝胶剂具有更好的稳定性。本发明专利技术所述的交联透明质酸钠，采用加水后加入L-天门冬氨酸后，乙醇沉淀后得到纯化的交联透明质酸钠，纯化后的交联透明质酸钠制备成凝胶剂质量更加优秀，该凝胶剂中BDDE含量小于0.5μg/g，其中蛋白质质量百分含量小于0.1％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药或者医药美容
，具体涉及一种含有交联透明质酸钠的药 物。
技术介绍
透明质酸钠是人和动物皮肤、玻璃体、关节润滑液和软骨组织的重要成分，它由 (I-P-4)D-葡糖醛酸和（I-P-3)N-乙酰基-D-氨基葡糖双糖单位重复连接而成，由于透 明质酸直链轴上单糖之间氢键的作用，透明质酸分子在空间上呈刚性的螺旋柱状结构，柱 的内侧由于存在大量的羟基而产生强亲水性，而且透明质酸分子将其结合的水分子锁定在 其双螺旋柱状结构中，使水分不易流失，因此具有特殊的保水作用，保水能力理论上可高达 500ml/g，被誉为理想的天然保湿因子。随着年龄增长，体内HA的减少，口服含有透明质酸 的保健品可补充体内HA，具有延缓衰老和润泽皮肤等功效，在日本、美国等国家已被广泛使 用。透明质酸具有良好的理化性能及生物相容性。然而，它在体内受到透明质酸酶的酶解 作用而迅速降解，存留时间较短，需要重复注射才能达到疗效。交联透明质酸是透明质酸钠 经交联剂交联修饰得到的具有三维立体结构的高分子凝胶，可以弥补透明质酸钠存留时间 短等缺点，同时仍具有良好的生物相容性及效果。 交联透明质酸钠凝胶的常规制备方法是将透明质酸钠与交联剂在碱性溶液中搅 拌混合，通过交联剂使透明质酸高分子链间化学键合来制备。但是所用的交联剂残留在 生物体内容易引发炎症反应。去除凝胶产物中的交联剂目前也是一个大问题，最常用去 除或降低交联剂残留量的方法包括透析法或以水或缓冲溶液清洗，但此类方法都无法有 效的去除或降低交联剂含量，且周期长，不易实现工业生产。另有一种，如果是制备交联 的透明质酸固态物，常用去除交联剂的方法是沉淀法，用有机溶剂清洗使交联透明质酸钠 凝胶沉淀，但此方法仍无法完全除去残留的自由交联剂。国内很多专利（CN101759881、 CN101502677、CN1590444、CN102558600等）都是使用透明质酸钠与交联剂1，4_ 丁二醇二 缩水甘油醚（以下简称BDDE)在碱性溶液中反应制得的凝胶，其中专利CN101759881公开 了BDDE交联HA制备医用交联透明质酸钠凝胶衍生产品，虽然制备的凝胶体内存留时间长、 生物相溶性好，但是去除交联剂的周期长、很难完全去除或降低交联剂的残留量。
技术实现思路
基于上述原因，申请人在通过研究发现：经过BDDE交联制备得到的交联透明质酸 钠，采用加水后加入L-天门冬氨酸后，乙醇沉淀后得到纯化的交联透明质酸钠，纯化后的 交联透明质酸钠制备成凝胶剂质量更加优秀，该凝胶剂中BDDE含量小于0. 5yg/g，其中蛋 白质质量百分含量小于〇. 1%。申请人对交联透明质酸钠凝胶剂进行研究，得到一种新的凝 胶剂，该凝胶剂中PH调节剂采用透明质酸，稳定性试验研究表明，采用透明质酸作为pH调 节剂的凝胶剂具有更好的稳定性。本专利技术通过下述技术方案实现的。 一种美容作用的药物，该药物由交联透明质酸钠、生理盐水和pH调节剂制备而 成。 优选美容作用的药物，其中交联透明质酸钠15-25重量份，生理盐水975-985重量 份。 上述所述的交联透明质酸钠是透明质酸钠经过BDDE交联制备得到的。 上述所述的药物中BDDE含量大于零小于0. 5yg/g。 上述所述的药物中蛋白质质量百分含量小于0. 1%。 上述所述的pH调节剂为透明质酸，交联透明质酸钠与透明质酸的重量比为 3-5 ： 1〇 上述所述药物为凝胶剂。 上述所述的凝胶剂的制备方法为： ⑴交联透明质酸钠纯化 取交联透明质酸钠，加入注射用水，加热至35°C-45°C，加入交联透明质酸钠重量 0. 35-0. 45倍的L-天门冬氨酸，搅拌均匀，加入交联透明质酸钠重量的7. 5-9倍的无水乙 醇，降温至5°C-KTC，保留沉淀，冷冻干燥，得到纯化后的交联透明质酸钠； (2)制剂制备 取纯化后的交联透明质酸钠，加入生理盐水，加入透明质酸混合均匀，过100目筛 网，12rc湿热灭菌30分钟，灌装，即得。 本专利技术所述的交联剂BDDE为：1，4- 丁二醇二缩水甘油醚。 上述所述的透明质酸钠（CAS号：9067-32-7)来自细菌发酵而得；交联透明质酸钠 以透明质酸钠为原料，经过BDDE交联制备得到；透明质酸、透明质酸钠以及交联透明质酸 钠由台湾和康生物科技股份有限公司提供。 或者由下述方法制备：取透明质酸加入0.IN氢氧化钠溶液中（pH= 12. 5)，取交 联剂BDDE(1，4 丁二醇缩水甘油醚）加入95%乙醇溶液，加入透明质酸碱溶液中，在30°C的 环境下进行20小时交联反应，反应后破碎后，以50%乙醇清洗，再用水洗，浓缩，冷冻干燥， 得到交联透明质酸钠。 其他原料由北京美迪康信医药科技有限公司提供。 下述试验是在多次创造性试验基础上，根据本专利技术所保护的技术方案进行的结论 性试验。 一、纯化方法研究 试验方法1 :交联透明质酸钠纯化：取交联透明质酸钠10g，加入注射用水1L，加热 至40°C，加入4g的L-天门冬氨酸，搅拌均勾，加入80g无水乙醇，降温至8°C，保留沉淀，冷 冻干燥，得到纯化后的交联透明质酸钠9. 3g; 取纯化后的交联透明质酸钠2g，加入生理盐水98g，加入0. 5g透明质酸混合均匀， 过100目筛网，121°C湿热灭菌30分钟，灌装，即得100支。 试验方法2 :配制1 %的氢氧化钠水溶液20ml，加入交联剂BDDEO. 2g，混合均匀后， 加入2.Og透明质酸钠，搅拌均匀后，放入4°C冰箱静置48h。然后，再放入40°C水浴锅，加 热2h后，取出切成质量Ig的凝胶，放入PBS缓冲液中，膨胀透析8h，得到交联透明质酸钠凝 胶，浓度为20mg/ml。 试验方法3 :取5.Oml浓度为0. 5M的氢氧化钠水溶液和50yL交联剂1，4- 丁二 醇二缩水甘油醚，两者混合均匀，在磁力搅拌下加入透明质酸钠〇. 9g，搅拌5分钟后置于可 控制温度的恒温水浴箱中50°C反应Ih后，再在20°C下反应3天，反应结束后，所得反应物 中加IOOmLpH为7. 0的0.IM磷酸盐缓冲溶液反复浸泡清洗，以使得到pH< 7. 5和生理上 可接受的渗透压值，沥干水分，收集凝胶，通过150目的筛网，然后灭菌，即可得到交联透明 质酸钠凝胶产物。 试验方法4 :交联透明质酸钠纯化：取交联透明质酸钠10g，加入注射用水1L，加热 至40°C，加入4. 3g的L-谷氨酸，搅拌均匀，加入80g无水乙醇，降温至8°C，保留沉淀，冷冻 干燥，得到纯化后的交联透明质酸钠9. 3g; 取纯化后的交联透明质酸钠2g，加入生理盐水98g，加入0. 5g透明质酸混合均 匀，过100目筛网，121°C湿热灭菌30分钟，灌装，即得100支。 试验方法：取上述不同试验方法凝胶，按照下述方法，检测凝胶中BDDE含量以及 蛋白质含量，试验结果见表1。 检验方法： 蛋白质含量分析： 1原理 福林酚试液能够与溶液中的蛋白质发生有色反应，且其颜色深浅与蛋白质的浓度 成正比。 2设备 分析天平、紫外分光光度计或相当设备、旋涡式混合器或相当设备。 3溶液制备 3. 1试剂A:称取I.Og水合硫酸铜（CuSO4 ? 5H20)，加水溶解并稀释至100mL。 3. 2试剂B:称取2.Og水合酒石酸钾钠（KNa本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种美容作用的药物，其特征在于该药物由交联透明质酸钠、生理盐水和pH调节剂制备而成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：柯冉红，
申请(专利权)人：杭州药享售投资管理有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33