本发明专利技术提出了一种茶树内调控促生剂的制备与应用方法。它利用茶树内生草螺菌的生物学特点，用其发酵制备茶树内生草螺菌培养液，并按一定配比稀释后喷洒修剪过的茶树枝条。促生剂内的细菌进入茶树枝条内共生并分泌代谢活性物质，促进茶树新生芽的快速生长。处理后的茶树新生芽生长旺盛，叶片深绿，新生芽的长度和重量明显增加。本发明专利技术的技术方法成本低、操作简单、绿色安全、功效多、作用持久。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及的是植物新生芽内调控促生剂，特别是一种应用内生草螺菌促进大田茶树新芽侧芽生长的方法。
技术介绍
茶树是我国重要的经济作物，在我国南方各省都有栽培。茶叶采摘后经过一定的工艺可制作成绿茶、白茶、黄茶、红茶和黑茶，而茶枝可制作茎茶。除作为饮品外，茶叶有效成分还可用于医药、食品、化工等。茶树是以采收幼嫩芽叶为主要对象的多年生经济作物，每年可多次从茶树上采摘新生的绿色营养嫩梢。根据采摘的季节不同，通常有春茶、夏茶和秋茶之分。多次采摘必然要耗费茶树大量的营养。如何维持树体的繁茂和继续扩大再生长，满足茶树健壮生长，使之优质、稳产高产是茶园田间管理面临的一个重要任务。为了提高茶叶产量，除了日常管理外，主要通过合理施肥以满足茶树营养需要。此外，使用赤霉素、三十烷醇、复硝酚钠、6-苄氨基嘌呤、芸苔素内酯、4-碘苯氧基乙酸(增产灵)等植物激素类物质促进茶芽生长以提高茶叶产量。人工合成的植物激素虽具有成本低、促生作用快的优点，但它们功效单一、作用不特久、使用浓度要求严格且具有土壤残留风险、不满足绿色生态环保要求的缺点。另外，人工合成的植物激素大多剌激植物细胞的分裂和伸长。如果茶树营养未跟上，反复多次使用人工合成的植物激素有可能影响新生茶叶细胞内营养成分的积累。茶树内生草螺菌是一种茶树共生专一性强的内生细菌。它通过伤口定殖于茶树体内，调控并促进茶树生长。文献“两株茶树内生草螺菌的微生物学特性”(王婷等，微生物学报2014第4期，2014.04.04，P424-432)详细叙述了茶树内生草螺菌的筛选和微生物学特性，但未涉及茶树内生草螺菌的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提出一种茶树内调控促生剂的制备与应用方法。用该促生剂处理切割后的茶树枝条，能有效促进茶树枝条侧芽生长，提高茶叶采摘量。本专利技术是这样实现的。其步骤为1、茶树内调控促生剂的制备取-800C保存的茶树内生草螺菌菌种，接种5mL营养肉汤培养基(1g胰蛋白胨，3g牛肉粉，5g NaCl，10yg/mL壮观霉素，5yg/mL氨苄青霉素，加水至1000ml)，每分钟150转摇动，37°C培养过夜。将活化后的菌液以1:100比例接入新鲜的LB液体培养基(1g胰蛋白胨，5g酵母提取物，1g NaCl，10yg/mL壮观霉素，5yg/mL氨苄青霉素，加水至1000ml，pH7.2-7.4)中放大培养，培养条件为:摇床转速每分钟200转，温度为28_37°C。待细菌培养6-8小时、OD6。。值为1.0-1.2时收集全部的细菌培养液，加入I %甘油后存放于4°C备用或直接使用。2、工作液的配制使用时，将放大培养好的茶树内生草螺菌菌液按0.5-2:1比例用清水稀释即为工作液。上述稀释后的细菌培养液即为本专利技术茶树内调控促生剂。所述促生剂的应用:1、茶树枝条处理:按常规茶树修剪办法，用电动切割机将大田栽培的茶树顶部修剪切割，使茶树枝条上端产生切口。2、用喷雾器将茶树生长内调控促进剂喷洒在茶树顶部。其用量为50-100ml/平方米。3、喷洒完成后按常规田间管理方法进行管理。本专利技术的作用过程是这样的，茶树内生草螺菌是茶科植物的内生菌，仅通过创口进入茶树体内，细胞外共生。大田茶树剪切后，茶树内生草螺菌在喷洒时可通过茶枝上端切口进入茶树枝条并定殖其中。定殖后，茶树内生草螺菌与茶树共生并提供细菌因子如IAA、NH/等活性物质促进茶树新芽或侧芽的生长。茶树内生草螺菌是天然的茶树内生菌，不侵染其它农作物，无病害作用，通常仅在较老的枝条或叶片中定殖，新生的嫩枝嫩叶中无细菌，符合绿色环保和食品安全要求。本专利技术具有独特的优点:1、充分利用了茶树内生草螺菌的生物学特点。茶树内生草螺菌是山茶属植物专一性强的内生细菌，与茶树互惠共生无公害。它能有效地产生促进植物生长发育的iaa、nh4+、嗜铁载体等活性物质。IAA能剌激茶树细胞生长，MV能为茶树提供氮源，嗜铁载体能为茶树吸附铁离子、提高茶树抗病能力，与IAA、NH4+—起协同促进茶树生长发育。使用茶树内生草螺菌喷洒茶树枝条可实现内生细菌代谢产物的高效利用，成本低廉、操作方便、安全环保。2、克服了植物激素功能单一、作用不持久、不能有效促进新芽后续生长发育的缺点。茶树内生草螺菌进入茶树枝条后定殖在茶枝内，可持续发挥作用，不需多次喷酒。它不仅促进新生芽的快速生长，并有望改善茶树的品质。【附图说明】图1为本专利技术实施例2-4中新生茶枝的平均长度，图2为本专利技术实施例2-4中100株新生茶枝的重量，其中对照组为清水处理。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术进一步说明。实施例1:取-800C保存的茶树内生草螺菌菌种，接种5mL营养肉汤培养基(1g胰蛋白胨，3g牛肉粉，5g NaCl，10yg/mL壮观霉素，5yg/mL氨苄青霉素，加水至1000ml)，每分钟150转摇动，37°C培养过夜。将活化后的菌液以1:100比例接入新鲜的LB液体培养基(1g胰蛋白胨，5g酵母提取物，1g NaCl，10yg/mL壮观霉素，5yg/mL氨苄青霉素，加水至1000ml，pH7.2-7.4)中放大培养，培养条件为:摇床转速每分钟200转，温度为28_37°C。待细菌培养6-8小时、OD6。。值为1.0-1.2时收集全部的细菌培养液，加入I %甘油后，存放于4°C备用或直接使用。使用时，将放大培养好的茶树内生草螺菌菌液按0.5-2:1比例用清水稀释即为促生剂。实施例2:将1:2稀释的3000mL茶树内调控促生剂液喷洒50平方米切割后鄂茶I号茶树，60天后的茶树新芽长势良好、叶片深绿，新生芽平均长度比对照组增加3.6cm, 100新枝重量比对照组增加14.6克。(见图1和2)。实施例3:将1:1稀释的3000mL茶树内调控促生剂液喷洒50平方米切割后鄂茶I号茶树，60天后的茶树新芽长势良好、叶片深绿，新生芽平均长度比对照组增加5.1cm, 100新枝重量比对照组增加19.7克。(见图1和2)。实施例4:将2:1稀释的3000mL茶树内调控促生剂液喷洒50平方米切割后鄂茶I号茶树，60天后的茶树新芽长势良好、叶片深绿，新生芽平均长度比对照组增加5cm，100新枝重量比对照组增加19克。(见图1和2)。【主权项】1.一种茶树内调控促生剂的制备，其特征在于其步骤为: I)、茶树内生草螺菌的培养及促生剂的制备 取-80°C保存的茶树内生草螺菌菌种，接种5mL营养肉汤培养基，每分钟150转摇动，37°C培养过夜，将活化后的菌液以1:100比例接入新鲜的LB液体培养基中放大培养，培养条件为:摇床转速每分钟200转，温度为28-37°C，待细菌培养6-8小时、OD6。。值为1.0-1.2时收集全部的细菌培养液，加入I %甘油后，存放于4 °C备用或直接使用，该茶树内生草螺菌菌液即为茶树内调控促生剂； 上述细菌培养液经稀释后即为本专利技术茶树内调控促生剂； 所述营养肉汤培养基为1g胰蛋白胨，3g牛肉粉，5g NaCl，加水至1000ml，10 μ g/mL壮观霉素，5 μ g/mL氨苄青霉素； 所述LB液体培养基为1g胰蛋白胨，5g酵母提取物，1g NaCl，加水至1000ml，10 μ g/mL壮观霉素，5 μ g/mL氨苄青霉素。2.一种茶树生长内调控促进剂的应用方法，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种茶树内调控促生剂的制备，其特征在于其步骤为：1)、茶树内生草螺菌的培养及促生剂的制备取‑80℃保存的茶树内生草螺菌菌种，接种5mL营养肉汤培养基，每分钟150转摇动，37℃培养过夜，将活化后的菌液以1:100比例接入新鲜的LB液体培养基中放大培养，培养条件为:摇床转速每分钟200转，温度为28‑37℃，待细菌培养6‑8小时、OD600值为1.0‑1.2时收集全部的细菌培养液，加入1％甘油后，存放于4℃备用或直接使用，该茶树内生草螺菌菌液即为茶树内调控促生剂；上述细菌培养液经稀释后即为本专利技术茶树内调控促生剂；所述营养肉汤培养基为10g胰蛋白胨，3g牛肉粉，5g NaCl，加水至1000ml，10μg/mL壮观霉素，5μg/mL氨苄青霉素；所述LB液体培养基为10g胰蛋白胨，5g酵母提取物，10g NaCl，加水至1000ml，10μg/mL壮观霉素，5μg/mL氨苄青霉素。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王行国，占桂婷，李亚东，程伟，丁坤明，饶辉福，
申请(专利权)人：湖北大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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