从披针叶黄华地上部分提取金雀花碱的方法技术

本发明专利技术公开了一种从披针叶黄华地上部分提取金雀花碱的方法，采用特定阳离子树脂为主要分离载体提取金雀花碱提取物。本发明专利技术所用原料是花期的披针叶黄华地上部分，经过常规甲醇热回流提取、浓缩得到披针叶黄华地上部分的流浸膏。上述浸膏用无机酸溶解后，过滤，滤液再用氨水等调节pH至8-12左右，经阳离子树脂层析分离，除去部分杂质后，再用氨性乙醇洗脱，含金雀花碱的洗脱液经浓缩干燥，既得金雀花碱提取物，其中含金雀花碱可达到43％以上。本发明专利技术克服了现有提取金雀花碱的方法不适用于以披针叶黄华地上部分为原料的问题，具有操作简便，有机溶剂用量少，成本较低，易于工业化生产等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物有效成分分离提取
，具体涉及从披针叶黄华地上部分提 取金雀花碱的方法。
技术介绍
金雀花碱是一种对α 4 β 2烟碱乙酰胆碱受体具有高亲和力的部分激动剂，也是一 种价格相对较低而效果明显的戒烟成分。 虽然披针叶黄华种子部位是提取分离金雀花碱的传统原料，但由于本种植物为野 生种，种子的产量受气候及自身生长生理条件的影响较大，不适宜作为大量工业生产的原 料，而本种植物为多年生草本，在北方草原为主要的牧场优势物种，资源丰富，同时也是危 害畜牧业的主要有毒植物，在花期包括金雀花碱等的生物碱含量较高，作为提取金雀花碱 的原料既具有较高的经济效益，也具有明显的社会效益。目前，金雀花碱的工业化提取方法主要是披针叶黄华披针叶黄华（T. Ianceolata R. Br.)的种籽为原料，以有机溶剂为主要分离载体，如吴勇等"高纯度金雀花碱的提取 方法研宄"（内蒙古师范大学学报自然科学（汉文）版，2004,33:186-187)和中国专利 ZL200910023485. 5等。根据本专利技术人检测，该植物地上部分只是种子中金雀花碱是含量的 1/2左右，并且杂质生物碱如N-甲酰基金雀花碱、N-甲基金雀花碱等所占比重更大（药物 分析杂志，2014, 34 :1737-1740)，难以进一步分离和纯化金雀花碱。另外，现有工艺需要用 到大量低沸点有机溶剂，如二氯甲烷、或三氯甲烷、或乙酸乙酯等，成本高，因此现有金雀花 碱规模化生产工艺具有较大的局限性。 其他采用披针叶黄华地上部分或全草作为分离金雀花碱的方法，一般以硅胶等作 为主要分离载体，以氯仿-甲醇等混合有机溶剂洗脱，金雀花碱损失严重，辅料难以回收利 用，工艺复杂，导致成本高，难以实现工业化应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种，本专利技术克 服了现有提取金雀花碱的方法不适用于以披针叶黄华地上部分为原料的问题，具有操作简 便，有机溶剂用量少，成本较低，易于工业化生产等特点。 本专利技术方法以来源稳定的披针叶黄华地上部分为原料，以经济性更好的阳离子树 脂为主要分离载体，调节披针叶黄华地上部分提取液的PH值后通过氢型阳离子树脂，用去 离子水洗脱杂质后，再以氨性乙醇洗脱金雀花碱，最后通过浓缩、干燥获得金雀花碱，操作 简便，提取率尚。 一种，具体操作步骤如下： 1、提取：披针叶黄华花期的地上部分干燥后粉碎后，用乙醇或甲醇热回流提取 2-3次，提取液过滤后浓缩回收有机溶剂，得到比重为1. 05-1. 10的披针叶黄华提取液； 2、有机溶剂除杂：将上述提取液用无机酸调节pH至2左右，用等量乙酸乙酯萃取 2次，萃取过的酸性水溶液回收有机溶剂后备用； 3、上样液的制备：将上述酸性水溶液用碱性试剂调节pH至8-12左右，同时控制水 溶液中金雀花碱的含量不高于30mg/mL，既得上样液； 4、阳离子分离：将上样液通过氢型001X7型阳离子交换树脂，用去离子水充分洗 涤树脂至无明显生物碱反应（Dragendorff试剂）为止，再用氨性乙醇混合溶液作为洗脱溶 剂洗脱树脂至无明显生物碱反应（DragendorfT试剂）为止，合并洗脱液，浓缩、干燥，既得 金雀花碱提取物。 其中强酸性阳离子树脂是指以苯乙烯和二乙烯苯聚合物为骨架，以强酸性基团磺 酸基（-SO3H)为交换基团的树脂。 其中吸附过披针叶黄华提取液后的阳离子树脂用氨性乙醇洗脱，优选1.0 N NH40H/90% EtOH 溶液。 本专利技术提供的金雀花碱提取物的制备方法中，优选无机酸为盐酸，碱性试剂为氨 水。 本专利技术提供的金雀花碱提取物的制备方法中，优选上样液pH为12。 本专利技术中披针叶黄华提取液上样的流速为lBV/h，氨性乙醇洗脱流速为2BV/h。 本专利技术克服了现有工艺的不足，采用阳离子树脂对目标进行分离和纯化，可以有 效提高金雀花碱提取物含量、减少低沸点有机溶剂如氯仿等的用量，降低生产成本。 本专利技术的优点： 1、本专利技术的制备方法操作简便、提取率高、成本低、易于工业化生产。 2、本专利技术采用氢型001X7型阳离子交换树脂具有金雀花碱交换量高，原料处理 量大的特点。 3、本专利技术根据金雀花碱的物化性质选择上样液pH为12左右，可以有效去除N-甲 酰基金雀花碱等杂质成分，提高最终产品的纯度。【附图说明】 图1是金雀花碱和N-甲酰基金雀花碱的HPLC图谱。 图2是金雀花碱提取物的HPLC图谱。【具体实施方式】 下面通过附图和实施例对本专利技术方法作进一步详细说明。 实施例1-3 :不同上样液体积对金雀花碱提取效果的比较 取干燥的披针叶黄华地上部分材料100公斤，用80 %甲醇热回流提取3次，合并提 取液，过滤，减压浓缩，用盐酸调节PH至2左右，用等量乙酸乙酯萃取2次，萃取过的酸性水 溶液减压浓缩除去乙酸乙酯，即得披针叶黄华提取液。上述提取液用NaOH水溶液调节pH至 12,其中金雀花碱含量为23. 05mg/mL，得到披针叶黄华上样液，该上样液再分为原体积的 1/KK3/10和3/5,分别以I. 0、1. 5和2. OBV/h的流速通过处理好的不同的氢型001X7型 阳离子交换树脂柱，上样完毕后，以去离子水洗至无生物碱反应为止（Dragendorff试剂）， 用IN氨水/90 %乙醇洗脱，至洗脱液不显生物碱反应（Dragendorff试剂）为止，洗脱液减 压浓缩回收有机溶剂，干燥，既得金雀花碱提取物。结果见下表。 实施例4 :金雀花碱提取物纯度的HPLC分析 色谱条件： 色谱柱：UltisilTM Wel_C8 (5 μ m，4. 6mmX 250mm);流动相：甲醇-〇· 05mol/L 磷酸 二氢钾水溶液（15 :85);体积流量：1.0ml/min ;检测波长：314nm，柱温：25°C。 对照品洛液的制备： 分别精密称取60°C干燥至恒重的金雀花碱和N-甲酰基金雀花碱适量，置50mL量 瓶中，用流动相溶解至刻度，制成每ImL含金雀花碱和N-甲酰基金雀花碱分别为0. 36mg和 0· 22mg的对照品溶液。 线性关系考查 精密吸取0. 10、0. 25、0. 5、1. 25、2. 5mL上述对照品溶液溶液分别置于IOmL量瓶 中，用流动相稀释至刻度，混均，精密吸取上述溶液各10 μ L注入高效液相色谱仪，记录相 关色谱峰面积。以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得金雀花碱标准曲线 方程Y = 2. 941X106X+18946，r = 0. 9995,线性范围0. 036~3. 6yg ;Ν-甲酰基金雀花碱 标准曲线方程Y = 2. 608 X 106Χ+10342,线性范围0. 022~2. 2 μ g。经测定，金雀花碱提取 液中金雀花碱的含量为23. Omg/mL，N-甲酰基金雀花碱为4. 5mg/mL。 金雀花碱对照品及金雀花碱提取物HPLC图分别见附图1和附图2。【主权项】1. 一种，其特征在于所用原料为处于花期 的披针叶黄华地上部分，经常规甲醇热回流提取后，减压浓缩至比重为1. 05-1. 10的含金 雀花碱的披针叶黄华提取液；提取液用无机酸调节PH至2后，过滤，用乙酸乙酯萃取除杂， 萃取过的酸性水溶液用碱性试剂调节pH至8-12,同时控制水溶液中金雀花碱的含量不高 于30mg/mL，既得上本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从披针叶黄华地上部分提取金雀花碱的方法，其特征在于所用原料为处于花期的披针叶黄华地上部分，经常规甲醇热回流提取后，减压浓缩至比重为1.05‑1.10的含金雀花碱的披针叶黄华提取液；提取液用无机酸调节pH至2后，过滤，用乙酸乙酯萃取除杂，萃取过的酸性水溶液用碱性试剂调节pH至8‑12，同时控制水溶液中金雀花碱的含量不高于30mg/mL，既得上样液；上样液通过强酸性阳离子树脂吸附金雀花碱，用去离子水充分洗涤树脂至无明显生物碱反应为止，再用氨性乙醇洗脱，收集含生物碱的洗脱液，再经过浓缩干燥，既得金雀花碱提取物，其中含金雀花碱可达到43％以上。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周军辉，李杨，余刚，卫伟光，刘立成，
申请(专利权)人：陕西省西安植物园，
类型：发明
国别省市：陕西;61