玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法，以玉叶金花苷G为对照，以乙腈:水\0.01％磷酸＝25～40:60～75为流动相进行高效液相色谱测定。该法完善了玉叶金花药材的质量检测标准，为玉叶金花药材质量标准的建立奠定了基础。本发明专利技术选择玉叶金花药材中玉叶金花苷G为指标进行含量测定，精密度高、重现性好、稳定性好、回收率高、测定结果准确，可有效控制玉叶金花药材的质量，从而实现确保其临床用药的安全、有效。

【技术实现步骤摘要】
玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法
本专利技术属于药材质量控制
，涉及玉叶金花苷G，尤其是一种玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法。
技术介绍
玉叶金花为茜草科植物玉叶金花(MussaendapubescensAit.f.)的干燥茎、根，具有清热解暑，凉血解毒的功效，在岭南地区广泛使用，主要用于治疗感冒、中暑、肾炎水肿、咽喉肿痛、支气管炎等病症，国内清火消炎类药的知名品牌玉叶解毒颗粒、玉叶清火片中玉叶金花均作为君药使用。文献报道玉叶金花药材主要含有萜类、三萜皂苷类等成分。玉叶金花收载于《广西壮族自治区壮药质量标准》第一卷，标准中只有理化鉴别，其他成药中也仅见薄层鉴别，尚未见关于其含量测定的相关报道。为了保障其临床用药的安全、有效、稳定，必须建立质量控制方法，以保证药材质量。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种精密度高、重现性好、稳定性好、回收率高、测定结果准确的玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法，从而实现有效控制玉叶金花药材的质量，确保其临床用药的安全、有效。为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法，以玉叶金花苷G为对照，以乙腈:水\0.01％磷酸＝25～40:60～75为流动相进行高效液相色谱测定。上述玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法，按照《中国药典》2010版一部附录VID高效液相色谱法测定操作，包括以下步骤：<1>色谱条件与系统适用性实验以C18键合硅胶为填充剂；以乙腈:水\0.01％磷酸＝25～40:60～75为流动相；流速为0.5～2ml·min-1；柱温为25～40℃；检测波长为260～270nm；理论板数应不低于3000；<2>对照品溶液的制备精密称取玉叶金花苷G对照品适量，用甲醇制成0.06～0.60mg·ml-1溶液；<3>供试品溶液的制备取玉叶金花药材粉末(过40目)2.0～5.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇30～40ml，超声30～50min，放冷，用甲醇补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得；<4>测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10～20μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。上述玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法，按照《中国药典》2010版一部附录VID高效液相色谱法测定操作，包括以下步骤：<1>色谱条件与系统适用性实验以C18键合硅胶为填充剂；以乙腈:水＝38:62为流动相；流速为1ml·min-1；柱温为25℃；检测波长为265nm；理论板数应不低于3000；<2>对照品溶液的制备精密称取玉叶金花苷G对照品适量，用甲醇制成0.60mg·ml-1溶液；<3>供试品溶液的制备取玉叶金花药材粉末(过40目)3.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇30ml，超声40min，放冷，用甲醇补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得；<4>测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。针对目前玉叶金花药材仅有定性而无定量检测的问题，专利技术人通过对玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量进行定量研究，建立了一种玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法，以玉叶金花苷G为对照，以乙腈:水\0.01％磷酸＝25～40:60～75为流动相进行高效液相色谱测定。该法完善了玉叶金花药材的质量检测标准，为玉叶金花药材质量标准的建立奠定了基础。本专利技术选择玉叶金花药材中玉叶金花苷G为指标进行含量测定，精密度高、重现性好、稳定性好、回收率高、测定结果准确，可有效控制玉叶金花药材的质量，从而实现确保其临床用药的安全、有效。附图说明图1是应用本专利技术含量测定方法的玉叶金花苷G对照品的高效液相色谱图。图2是应用本专利技术含量测定方法的玉叶金花对照药材的高效液相色谱图。图3是应用本专利技术含量测定方法的玉叶金花药材的高效液相色谱图。具体实施方式玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法试验研究1.仪器与试药1200系列高效液相色谱仪(美国Agilent)，TechmateC18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，BS110S型1/10万电子分析天平(梅特勒公司)。DFY-500粉碎机(浙江省温岭市林大机械有限公司)，9200S超声波清洗器(上海)。玉叶金花药材(采自十个不同产地)；玉叶金花对照药材购自中检所(121404-200401)；玉叶金花苷G对照品(自制)，纯度98.0％，13CNMR、1HNMR、MS谱图数据与文献一致；甲醇、乙腈均为色谱纯，其他试剂为分析纯。2.色谱条件的选择专利技术人在进行玉叶金花苷G色谱条件的选择时，尤其对检测波长及流动相系统进行了选择。确定玉叶金花苷G的色谱条件为：TechmateC18(4.6＊250mm，5μm)色谱柱；乙腈-水(38:62)为流动相；流速为1ml·min-1；柱温为25℃；检测波长为265nm。(1)检测波长的选择对玉叶金花苷G进行全波长扫描，结果显示其在265nm有最大吸收，故选择265nm为检测波长。(2)流动相的选择考察了不同比例乙腈-水，乙腈-磷酸水，甲醇-水为流动相对分离效果的影响。结果表明，乙腈-水(38:62)较合适，可使样品中目标峰与杂质峰达到分离，峰型较好，故选为流动相。3.供试品提取条件的选择(1)提取溶剂的选择考察了甲醇、60％乙醇及95％乙醇作为提取溶剂，结果表明甲醇的提取效率较高。(2)提取方法的选择对超声提取40min，热回流提取1h，索氏提取4h，三种提取方法提取率进行比较，提取率基本一致，考虑超声提取方法操作简便、省时，故选择超声提取。(3)提取时间的选择超声提取30min，40min，60min，对三者的提取率进行比较，发现30min提取率稍低，40min与60min提取率基本一致，故最终选择供试品提取方法为加入甲醇，超声提取40min。4.线性关系考察分别精密吸取玉叶金花苷G对照品溶液0，1.0ml，2.5ml，5.0ml，7.5ml于10ml量瓶中，加甲醇溶液至刻度。分别进样20μl，按上述色谱条件测定峰面积。分别重复进样3次；以对应的对照品浓度为横坐标，其峰面积平均值为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程Y＝878.44X+127.79(r＝0.9999)，线性范围0.06～0.60mg/ml。5.精密度试验精密吸取上述玉叶金花苷G照品溶液各20μl，连续进样6次，峰面积的RSD为1.82％。6.重复性试验精密称取同玉叶金花样品共6份，按本专利技术所述含量测定方法中的供试品的制备方法制备，测定得玉叶金花苷G含量的RSD分别为2.84％。7.稳定性试验精密吸取同一供试品溶液分别于0，2，4，6，8，12h进样，测定玉叶金花苷G含量的RSD分别为0.15％。表明供试液在12h内稳定。8.加样回收率试验采用加样回收法，取已知含量的样品，精密称定，分别精密加入一定量的玉叶金花苷G，按照本专利技术技术方案中所述的供试品的制备方法来制备供试液，按照上述测定方法进行测定，计算回收率，结果见表1。表1加样回收率测定结果9.样品测定按本专利技术所述的方法制备供试品和对照品溶液，分别进样，记录色谱图，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法，其特征在于：以玉叶金花苷G为对照，以乙腈:水\0.01％磷酸＝25～40:60～75为流动相进行高效液相色谱测定。

【技术特征摘要】
1.一种玉叶金花药材中玉叶金花苷G的含量测定方法，其特征在于按照《中国药典》2010版一部附录VID高效液相色谱法测定操作，包括以下步骤：<1>色谱条件与系统适用性实验以C18键合硅胶为填充剂；以乙腈:水\0.01％磷酸＝25～40:60～75为流动相；流速为0.5～2ml·min-1；柱温为25～40℃；检测波长为260～270nm；理论板数应不低于3000；<2>对照品溶液的制备精密称取玉叶金花苷G对照品适量，用甲醇制成0.06～0.60mg·ml-1溶液；<3>供试品溶液的制备取过40目玉叶金花药材粉末2.0～5.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇30～40ml，超声30～50min，放冷，用甲醇补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得；<4>测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10～20μ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张赟赟，李嘉，张颖，陈锋，杨海船，何春欢，李红，姜平川，
申请(专利权)人：广西壮族自治区中医药研究院，
类型：发明
国别省市：广西;45