【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物种苗生产方法,具体涉及一种利用浅层培养生产藏红花微球茎方法,属于生物
技术介绍
藏红花(Crocus sativus L.)别名番红花、西红花,是一种鸢尾科番红花属的多年生花卉,也是一种常见的香料。是西南亚原生种,最早由希腊人人工栽培。主要分布在欧洲、地中海及中亚等地,明朝时传入中国,《本草纲目》将它列入药物之类,中国浙江等地有种植。是一种名贵的中药材,具有强大的生理活性,其柱头在亚洲和欧洲作为药用,有镇静、祛痰、解痉作用,用于胃病、调经、麻疹、发热、黄胆、肝脾肿大等的治疗。由于藏红花不能进行有性生殖,只能通过球茎进行无性繁殖,且栽培条件下其球茎退化现象严重,导致种质资源严重缺乏。我国自引种以来,栽培藏红花产量一直较低,远远不能满足人们的需要。近年来组织培养技术应用在藏红花种苗的生产上,为藏红花种球短缺与退化提供了一种解决方法,但是植株组织培养是一个劳动密集型产业,生产成本居高不下,种苗的生产也只停留在实验阶段。本专利技术利用浅层培养技术生产藏红花微球茎,由于采用液体培养模式,更易实现产业化和自动化,将是解决藏红花种球短缺的一个有效方法。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种生长周期短、移栽存活率高、成本低、操作简单且适宜大规模生产的利用浅层培养生产藏红花微球茎方法。为解决上述技术问题,本专利技术采用的技术方案是:该利用浅层培养生产藏红花微球茎方法,包 ...
【技术保护点】
一种利用浅层培养生产藏红花微球茎的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)培养容器灭菌:将培养基放入培养容器中,并在高温高压湿热消毒灭菌后待用;(2)外植体的获得及灭菌处理:将藏红花球茎放入含有消毒液的水中培养待其长出叶片,取下叶片,清水冲洗20~40分钟;在超净台中将上述藏红花叶片进行表面消毒灭菌处理;(3)浅层培养的外植体的制备:将步骤(2)中已消毒灭菌的叶片在无菌环境下切成0.5~1.0cm的小段,并接种到已灭菌的诱导藏红花愈伤组织的固体培养基中,获得藏红花愈伤组织;所述藏红花愈伤组织即为浅层培养的外植体;(4)浅层培养:(A)丛生芽诱导:将步骤(3)中获得的愈伤组织切成0.1~0.3cm3小块接种到液体浅层丛生芽诱导培养基中培养,培养时间为15~25d;(B)微球茎形成:丛生芽诱导结束后,不移动组培苗及培养基,直接向组培瓶中添加诱导微球茎形成的培养基,培养时间为30~45d;即获得藏红花丛生微球茎。
【技术特征摘要】
1.一种利用浅层培养生产藏红花微球茎的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)培养容器灭菌:将培养基放入培养容器中,并在高温高压湿热消毒灭菌后
待用;
(2)外植体的获得及灭菌处理:将藏红花球茎放入含有消毒液的水中培养待其
长出叶片,取下叶片,清水冲洗20~40分钟;在超净台中将上述藏红花叶片进行
表面消毒灭菌处理;
(3)浅层培养的外植体的制备:将步骤(2)中已消毒灭菌的叶片在无菌环境下
切成0.5~1.0cm的小段,并接种到已灭菌的诱导藏红花愈伤组织的固体培养基中,
获得藏红花愈伤组织;所述藏红花愈伤组织即为浅层培养的外植体;
(4)浅层培养:
(A)丛生芽诱导:将步骤(3)中获得的愈伤组织切成0.1~0.3cm3小块接种到
液体浅层丛生芽诱导培养基中培养,培养时间为15~25d;
(B)微球茎形成:丛生芽诱导结束后,不移动组培苗及培养基,直接向组培瓶
中添加诱导微球茎形成的培养基,培养时间为30~45d;即获得藏红花丛生微球
茎。
2.根据权利要求1所述的利用浅层培养生产藏红花微球茎方法,其特征在于,
所述步骤(2)中的灭菌处理的具体步骤为:首先在75%无水乙醇中浸泡15~30s,
再用无菌水清洗2~4次,然后放入摩尔浓度为0.1%的升汞中浸泡3~5min,再用
无菌水清洗5~8次。
3.根据权利要求2所述的利用浅层培养生产藏红花微球茎方法,其特征在于,
所述步骤(3)中的诱导藏红花愈伤组织的固体培养基的配方为:MS+0.5~1.5mg/L
6-BA+0.05~0.2mg/L NAA+藏红花汁液0.1~0.3g/L+蔗糖25g/L+琼脂5.5g/L,pH
为5.6~6.0,培养时间为25~30d。
4.根据权利要求2所述的利用浅层培养生产藏红花微球茎方法,其特征在于,
所述步骤(4)中的(A)步骤中的液体培养基的配方为:MS+1.5~2...
【专利技术属性】
技术研发人员:周志疆,陈明亮,张丽丽,韩婷,
申请(专利权)人:江苏丰收大地种业发展有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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