一种高产脂湿地松的离体快繁技术制造技术

本发明专利技术公开了一种高产脂湿地松的离体快繁技术，涉及湿地松（Pinus elliottii）通过植物组织培养的方法快速繁育“材脂两用”高产湿地松种苗。本发明专利技术以美国北卡罗莱纳州高产脂湿地松成熟种胚为外植体，经过外植体选择及消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程从而实现了高产脂湿地松离体快繁，为湿地松的组培快繁和工厂化育苗提供技术支持。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种高产脂湿地松的离体快繁技术，其特征在于包括以下步骤： （1）外植体的消毒：选取完整、饱满、无一的湿地松种子，自来水搓洗干净，去掉种翅杂物，用0.1%～0.2%KMNO4溶液浸泡10～20min，无菌水冲洗3～5次后用2%～4%NaClO溶液消毒10～30min，无菌水冲洗干净后于无菌水中浸泡过夜,次日在超净工作台中将种子剥去种壳后以70%～80%乙醇浸泡5～10s，0.1%升汞溶液消毒3～10min，再用无菌水清洗3～5次，无菌滤纸擦干后备用;（2）不定芽诱导：经步骤（1）处理后的种胚用无菌的手术器械小心使种胚与胚乳分离后，将种胚横置于芽诱导培养中进行不定芽诱导培养,接种后先在25～28℃条件下全暗培养直至萌生一个不定芽，然后置于每天光照12～15小时，光照强度为1000～1500lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至各不定芽伸长到1～2cm;（3）增殖培养：将步骤（2）成功诱导出的不定芽分离，以单个不定芽为单位转接到增殖培养基中进行继代培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～4天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为3000～5000lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养多次反复切割进行继代培养，以得到更多的丛生芽;（4）生根培养：将步骤（1）或步骤（2）培养得到的高度约为2～3cm的不定芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养3～7天，然后置于每天光照10～12小时，光照强度为2000～2500lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根;（5）炼苗移栽：将步骤（4）获得的高约5～7cm的生长良好且健壮的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由营养土：珍珠岩＝3:1混合成的基质,置于光照培养箱内培养，每天以1/2MS大量元素营养液给幼苗浇水，保持湿度,待幼苗成活后再移栽大田。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨惠才，
申请(专利权)人：杨惠才，
类型：发明
国别省市：广西;45