一种微生物菌肥、其制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种微生物菌肥、其制备方法及其应用，所述微生物菌肥包含真菌菌种LP-20和有机肥料，所述有机肥料包含腐殖酸、草炭土和腐熟鸡粪。本发明专利技术通过对真菌菌种LP-20进行培养，得到菌悬液；将获得的菌悬液进行浓缩得到菌体浓缩物，将菌体浓缩物与腐殖酸、草炭土和腐熟鸡粪混匀；制粒、烘干后即得微生物菌肥。本发明专利技术通过真菌菌种LP-20和有机肥料的配合制成微生物菌肥，可用于土壤重金属污染的治理，能够有效地富集土壤中游离态的镉离子和锌离子，具有充当增产保肥的肥料和治理土壤重金属污染的天然改良剂的双重效果，是一种环境友好型、生态协调性的土壤重金属污染治理用微生物菌肥。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物
，涉及一种微生物菌肥、其制备方法及其应用。
技术介绍
最近几十年来，各种环境问题越来越严重的威胁人类的发展，各种工业废气、废水、化肥、农药等污染物都进入其最终宿体土壤中，因此造成土壤环境质量日益下降，尤其是土壤重金属污染，已然成为当下政府及社会共同关注的热点。由于重金属污染土壤结构较差，养分缺乏，重金属以毒性较强的形态存在，从而影响植物生长，并且重金属离子对土壤酶活性产生抑制或激活作用，进而影响土壤养分释放以及作物对养分的吸收。镉是相对稀有的重金属元素，是典型的分散元素，主要以硫化物的形式存在于铜、铅、锌等有色金属矿藏中。人类活动可以各种途径将镉带入土壤中，且其不能或者不易被生物分解转化后排出体外，只能沿食物链逐级传递，在生物体内浓缩放大，当积累到较高含量时就会对生物体产生毒性效应，从而危害健康。有关镉污染及其生物有效性问题得以引起全世界关注，20世纪60年代在日本富士县神通川流域出现的“骨痛病”的主要原因就是镉污染。因此，土壤中镉污染来源、形态、生物有效性以及相应的治理手段的研究十分有必要。为治理土壤重金属污染，通常要加入各种改良剂以改善土壤的理化性质，从而降低土壤中镉的活性。除了必要的N、P、K肥料外，常用改良剂包括腐殖酸、石灰、磷矿物、铁锰氧化物、粉煤灰、活性污泥和堆肥等。这些改良剂本身可降低重金属在土壤中的活性，在植物稳定中起着重要作用，但是，也存在一些缺陷，如治理面积小、生产效率低，并且在制备过程中易造成二次污染。近来，国内外开展了大量利用能够富集重金属的生物来清除土壤重金属污染的研究。该方法具有高效、经济、生态协调性等优点，成为环境研究中的热点。CN 102553904 A公开了一种重金属污染土壤的生物修复方法，此专利技术利用蚯蚓来修复轻度、中度铜、镉、铅复合污染土壤，但是此专利技术对于蚯蚓的养殖以及植物的培养周期较长，过程复杂。CN 103880486 A公开了微生物菌肥及其制备方法和治理重金属污染土壤的方法，此专利技术利用蚯蚓粪制成的微生物菌肥治理土壤重金属污染。CN 1490280A公开了一种微生物多抗菌肥及其制备方法和应用，利用不同功效细菌、真菌制成的微生物多抗菌肥是一种具有营养、生物防治作用的微生物肥料，但是不针对于重金属污染的治理。因此，在本领域需要开发一种能够有效治理土壤重金属污染的微生物菌肥。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种微生物菌肥、其制备方法及其应用。为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：在第一个方面，本专利技术提供了一种微生物菌肥，所述微生物菌肥包含真菌菌种LP-20和有机肥料，其中所述真菌菌种LP-20(Trichoderma spirale)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，100101，保藏日期为2013年8月16日，保藏编号为CGMCC No.8038。在本专利技术的微生物菌肥中，所述有机肥料包含腐殖酸、草炭土和腐熟鸡粪。在第二个方面，本专利技术提供了一种本专利技术所述微生物菌肥的制备方法，包括以下步骤：(1)对真菌菌种LP-20进行培养，得到菌悬液；(2)将步骤(1)获得的菌悬液进行浓缩得到菌体浓缩物，将所述菌体浓缩物与腐殖酸、草炭土和腐熟鸡粪混匀；(3)制粒、烘干后即得微生物菌肥。在本专利技术所述微生物菌肥的制备方法中，步骤(1)所述真菌菌种LP-20的培养包括以下步骤：(a)培养皿培养：将真菌菌种LP-20在无菌条件下接种于固体培养基上，在20-30℃、优选25℃下，培养4-6天、优选5天；(b)一级种子培养：将步骤(a)培养的菌种在无菌条件下接种于液体培养基，在20-30℃、优选25℃下，培养3-7天、优选5天，制得一级种子；(c)二级种子培养：按液体培养基的体积比为5-15％、优选8-12％、更优选10％的接种量，将所述一级种子接种到发酵罐中，曝气，培养5-7天、优选5.5-6.5天、进一步优选6天，制得二级种子；(d)混合发酵培养：按液体培养基的体积比为5-20％、优选5-12％、更优选10％的接种量，将二级种子接种到发酵罐中，进行高密度发酵培养，获得该菌种的菌悬液。在真菌菌种LP-20的培养中，步骤(a)所述固体培养基包括如下组分：酵母提取物1-3g/L、优选1.5g/L，醋酸钠1.5-4g/L、优选2.5g/L，琼脂13-18g/L、优选15g/L，氯霉素0.25mg/L。在真菌菌种LP-20的培养中，步骤(b)所述液体培养基包括如下组分：蛋白胨8-12g/L、优选10g/L，葡萄糖15-25g/L、优选20g/L，氯霉素0.25mg/L。在培养皿培养中，培养温度可以为20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃或30℃；培养时间可以是4天、100小时、4.5天、120小时、5天、130小时、5.5天、140小时或6天；所用固体培养基中酵母提取物可以为1g/L、1.1g/L、1.2g/L、1.3g/L、1.4g/L、1.5g/L、1.6g/L、1.7g/L、1.8g/L、1.9g/L、2.0g/L、2.2g/L、2.4g/L、2.6g/L、2.8g/L或3.0g/L，醋酸钠可以为1.5g/L、1.6g/L、1.7g/L、1.8g/L、2.0g/L、2.2g/L、2.3g/L、2.4g/L、2.5g/L、2.7g/L、2.8g/L、3.0g/L、3.2g/L、3.4g/L、3.6g/L、3.8g/L、3.9g/L或4g/L，琼脂可以为13g/L、14g/L、15g/L、16g/L、17g/L或18g/L。在一级种子培养中，培养温度可以为20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃或30℃；培养时间可以是3天、80小时、3.5天、90小时、4天、4.5天、110小时、5天、5.5天、140小时、6天、6.5天或7天；所用液体培养基中蛋白胨可以为8g/L、9g/L、10g/L、11g/L或12g/L，葡萄糖可以为15g/L、16g/L、17g/L、18g/L、19g/L、20g/L、21g/L、22g/L、23g/L、24g/L或25g/L。在二级种子培养中，接种量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微生物菌肥，其特征在于，所述微生物菌肥包含真菌菌种LP‑20和有机肥料，其中所述真菌菌种LP‑20(Trichoderma spirale)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2013年8月16日，保藏编号为CGMCC No.8038。

【技术特征摘要】
1.一种微生物菌肥，其特征在于，所述微生物菌肥包含真菌菌种LP-20
和有机肥料，其中所述真菌菌种LP-20(Trichoderma spirale)，保藏于中国微
生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2013年8
月16日，保藏编号为CGMCC No.8038。
2.根据权利要求1所述的微生物菌肥，其特征在于，所述有机肥料包含
腐殖酸、草炭土和腐熟鸡粪。
3.根据权利要求1或2所述的微生物菌肥的制备方法，其特征在于，包括
以下步骤：
(1)对真菌菌种LP-20进行培养，得到菌悬液；
(2)将步骤(1)获得的菌悬液进行浓缩得到菌体浓缩物，将所述菌体浓
缩物与腐殖酸、草炭土和腐熟鸡粪混匀；
(3)制粒、烘干后即得微生物菌肥。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述真菌菌
种LP-20的培养包括以下步骤：
(a)培养皿培养：将真菌菌种LP-20在无菌条件下接种于固体培养基上，
在20-30℃、优选25℃下，培养4-6天、优选5天；
(b)一级种子培养：将步骤(a)培养的菌种在无菌条件下接种于液体培
养基，在20-30℃、优选25℃下，培养3-7天、优选5天，制得一级种子；
(c)二级种子培养：按液体培养基的体积比为5-15％、优选8-12％、更优
选10％的接种量，将所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张梅华，孙璐，丛海扬，黄惠，于松，潘利祥，刘明辉，
申请(专利权)人：中节能六合天融环保科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11