本发明专利技术提供一种胡柚提取物在制备降糖功能食品、保健品或降糖药物中的应用。胡柚油胞层、白皮层和囊衣提取物能够在糖尿病C57BL/6小鼠体内（in vivo）显著降低空腹血糖和血清血糖，增加葡萄糖耐量，减少胰岛素抵抗。可作为功能食品、保健品或防治药物用于糖代谢异常相关疾病的防治。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药领域，涉及天然来源的胡柚提取物在制备降糖功能食品、保健品或 防治药物中的应用，尤其涉及胡柚提取物在糖尿病C57BL/6小鼠体内降糖的应用。
技术介绍
糖尿病是以体内高血糖为特征的一种流行病。糖尿病分为两种：1型糖尿病(胰岛 素依赖)和2型糖尿病(非胰岛素依赖)，遗传和环境因素对于两者都有影响。糖尿病的发展 通常伴随其它代谢综合症，例如肥胖、高血脂和炎症等。在过去的几十年间，糖尿病及其并 发症的发生率显著增加，根据世界卫生组织（WHO)的数据，全世界范围内有3. 47亿糖尿病 患者。2型糖尿病占糖尿病的90%，它的发生由于胰岛素抵抗或者胰岛素分泌受损，表现为 高血糖和葡萄糖不耐受。2013年，在中国有9840万糖尿病病例（IDF)。因此，对于糖尿病 及其并发症的预防和控制项目刻不容缓。 胡柚（CY tras CAaflg1S1Aaflefl1Si1S)是柚和酸橙的杂交后代，是浙江省衢州市常山县 特有的杂柑类良种，至今己有上百年的种植历史。其香气独特、浓郁，果实外形美观，呈鲜黄 色，富有光泽，果肉金黄色，汁液丰富，食之酸甜适中，略带苦味，食后使人觉得非常爽口。胡 柚具有清凉祛火，镇咳化痰，润喉醒酒，养颜益寿等诸多药理功效，营养价值很高。然而，关 于胡柚提取物在活体内是否具有降糖活性，未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种胡柚提取物在制备降糖药物中的应用。本专利技术所述的胡 柚提取物包括油胞层、白皮层和囊衣的固相萃取（SPE)粉末。 本专利技术的另一个目的是提供胡柚提取物在制备降糖功能食品、保健品中的应用。 所述胡柚提取物为油胞层、白皮层和囊衣的固相萃取（SPE)粉末。 本专利技术所述的胡柚提取物，通过以下方法制备获得： (1)分别称取胡柚油胞层、白皮层和囊衣冷冻干燥粉末I g，用80%丙酮20 mL (固液比 1:20)超声30 min，频率为60 kHz，功率为30 W，提取液通过减压抽滤得到澄清提取液，如 此重复3次，合并提取液，在旋转蒸发仪上蒸去丙酮，得到胡柚提取物水溶液。 (2)水溶液用固相萃取（SPE)S印-Pak?C18柱进行纯化（12cc/2g，Waters)，纯 化过程包括活化、平衡、上样、淋洗和洗脱五个步骤：Sep-Pak? C18柱首先用20 mL甲醇活 化，再用20 mL去离子水平衡，然后水溶液上样，待充分吸附后，小柱用40-80 mL去离子水 淋洗以洗去果实中的糖酸等极性物质，真空抽干后用足量的甲醇(根据洗脱颜色判断）充分 洗脱，洗脱液用真空干燥仪蒸干，分别得到粉末66. 3 mg、63. 6 mg和42. I mg，得到的粉末即 为胡柚油胞层、白皮层和囊衣SPE粉末。 本专利技术发现在高脂诱导C57BL/6小鼠体内（i/7 w>〇)胡柚提取物可以显著降低糖 尿病C57BL/6小鼠的空腹血糖和血清血糖，增加葡萄糖耐量，减少胰岛素抵抗。 本专利技术强调胡柚提取物这种天然产物在糖尿病防治中的最新发现。 本专利技术提供一种胡柚提取物在制备降糖功能食品、保健品或防治药物中的应用。 胡柚提取物能够在糖尿病C57BL/6小鼠体内（i/? Wra)显著降低空腹血糖和血清血糖，增 加葡萄糖耐量，减少胰岛素抵抗。可作为功能食品、保健品或防治药物用于糖代谢异常相关 疾病的防治。【附图说明】 图1-1是以高脂饮食诱导糖尿病C57BL/6小鼠为饲喂对象，胡柚油胞层、白皮层和 囊衣SPE粉末对其葡萄糖耐量试验（OGTT)的影响。给药16周，第13周测定其葡萄糖耐量。 低脂+清水组为低脂饮食组，高脂+清水组为高脂饮食诱导糖尿病组，3个处理组剂量都为 40 mg/kg Bff, n=5-10〇 图1-2是以高脂饮食诱导糖尿病C57BL/6小鼠为饲喂对象，胡柚油胞层、白皮层和 囊衣SPE粉末对其曲线下面积（AUC)的影响。给药16周，第13周进行OGTT试验，计算其 曲线下面积。低脂+清水组为低脂饮食组，高脂+清水组为高脂饮食诱导糖尿病组，3个处 理组剂量都为40 mg/kg BW，n=5-10。用SPSS软件进行差异显著性分析，进行Duncan多重 比较，不同的上标字母表示具差异显著性（#〇. 05)。 图2是以高脂饮食诱导糖尿病C57BL/6小鼠为饲喂对象，胡柚油胞层、白皮层和囊 衣SPE粉末对其血清血糖的影响。给药16周，试验结束后处死小鼠取血清，测定其血清血 糖。低脂+清水组为低脂饮食组，高脂+清水组为高脂饮食诱导糖尿病组，3个处理组剂量 都为40 mg/kg BW，n=7-9。用SPSS软件进行差异显著性分析，进行Duncan多重比较，不同 的上标字母表示具差异显著性（#〇. 05)。 图3是以高脂饮食诱导糖尿病C57BL/6小鼠为饲喂对象，胡柚油胞层、白皮层和囊 衣SPE粉末对其胰岛素抵抗评价指数（HOM-IR)的影响。给药16周，试验结束后处死小鼠取 血清，测定其血清血糖和血清胰岛素含量，计算胰岛素抵抗评价指数。低脂+清水组为低脂 饮食组，高脂+清水组为高脂饮食诱导糖尿病组，3个处理组剂量都为40 mg/kg BW，n=8-9。 用SPSS软件进行差异显著性分析，进行Duncan多重比较，不同的上标字母表示具差异显著 性（/X0· 05)。【具体实施方式】 本专利技术结合附图和实施例作进一步的说明。 实施例1胡柚提取物的制备 分别称取胡柚油胞层、白皮层和囊衣冷冻干燥粉末I g，用80%丙酮20 mL (固液比 1:20)超声30 min，频率为60 kHz，功率为30 W，提取液通过减压抽滤得到澄清提取液，如 此重复3次，合并提取液，在旋转蒸发仪上蒸去丙酮，得到胡柚提取物水溶液。 水溶液用固相萃取（SPE) S印-Pak? C18柱进行纯化（12 cc/2 g，Waters)，纯化过 程包括活化、平衡、上样、淋洗和洗脱五个步骤：S印-Pak? C18柱首先用20 mL甲醇活化，再 用20 mL去离子水平衡，然后水溶液上样，待充分吸附后，小柱用40-80 mL去离子水淋洗以 洗去果实中的糖酸等极性物质，真空抽干后用足量的甲醇(根据洗脱颜色判断）充分洗脱， 洗脱液用真空干燥仪蒸干，分别得到粉末66. 3 mg、63. 6 mg和42. I mg，得到的粉末即为胡 柚油胞层、白皮层和囊衣SPE粉末。 实施例2胡柚提取物的C57BL/6小鼠试验 C57BL/6小鼠购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，饲喂的低脂饲料(含10%脂肪） 和高脂饲料(含45%脂肪）购自江苏美迪森生物医药有限公司。所有小鼠在恒温恒湿环境 下饲养，提供12 h光照12 h黑暗环境。每组10只小鼠，低脂+清水组为低脂饮食组，高 脂+清水组为高脂饮食诱导糖尿病组，3个处理组剂量都为40 mg/kg BW。所有小鼠可以自 由摄取食物和蒸馏水，处理组通过灌胃针灌胃的方式进行给药，灌胃体积为20 mL/kg BW， 低脂和高脂对照组灌胃蒸馏水。试验为期16周，1周连续给药6天，停药1天。从第11周 开始测定空腹血糖，间隔1周测定1次，测定前小鼠禁食8 h，对小鼠尾静脉剪尾取血，用 强生One Touch Ultra ZSJ 843ETT型血糖仪测定空腹血糖值。数据用平均值土标准误（ ?± SE )表示，使用SPSS软本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种胡柚提取物在制备降糖药物中的应用，所述胡柚提取物为油胞层、白皮层和囊衣的固相萃取粉末。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李鲜，贾胜，孙崇德，陈昆松，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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