本发明专利技术涉及灰飞虱的一种产卵装置，用于检测RNA干扰试验中灰飞虱的繁殖力。具体组成为：两端开口的玻璃管、80目尼龙纱、橡皮筋、无菌牙签、润湿的无菌脱脂棉和封口膜(Parafilm膜)。使用时用80目尼龙纱封住玻璃管的一端；然后取1根润湿的无菌脱脂棉缠绕的牙签，用封口膜将脱脂棉封闭，模仿稻苗；放入待产卵灰飞虱成虫，用一层封口膜将玻璃管的另一端封闭；在膜中央加入人工饲料，然后再用一层封口膜封闭饲料；完成后，在封口膜方向用加湿器喷雾保湿。本装置可以解决饲喂法RNAi研究中，灰飞虱无产卵场所的问题，为基因功能研究的顺利开展提供保障。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及灰飞虱的一种产卵装置，用于检测RNA干扰试验中灰飞虱的繁殖力。具体组成为：两端开口的玻璃管、80目尼龙纱、橡皮筋、无菌牙签、润湿的无菌脱脂棉和封口膜(Parafilm膜)。使用时用80目尼龙纱封住玻璃管的一端；然后取1根润湿的无菌脱脂棉缠绕的牙签，用封口膜将脱脂棉封闭，模仿稻苗；放入待产卵灰飞虱成虫，用一层封口膜将玻璃管的另一端封闭；在膜中央加入人工饲料，然后再用一层封口膜封闭饲料；完成后，在封口膜方向用加湿器喷雾保湿。本装置可以解决饲喂法RNAi研究中，灰飞虱无产卵场所的问题，为基因功能研究的顺利开展提供保障。【专利说明】 一、
本专利技术涉及灰飞虱的一种产卵装置，用于RNA干扰法研宄灰飞虱基因功能时，其繁殖力的检测。 二、
技术介绍
灰飞虱Laodelphax striatellus FallSn是我国重要水稻害虫之一，在所有稻区均有发生。除受温度、杀虫剂等胁迫因素影响外，繁殖力是影响其种群数量的决定性因素。探讨繁殖相关基因的功能可以进一步阐明灰飞虱繁殖力变化的分子基础，为利用生物学技术防治灰飞虱提供靶标资源。 RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，因此该技术被广泛用于基因功能的研宄。昆虫RNAi主要有注射法和饲喂法，在灰飞虱的研宄中常采取饲喂法。通过饲喂含dsRNA的饲料后灰飞虱表型的变化来确定基因的功能。对于大多数表型如死亡率、体色、酶活等生化变化而言，在饲喂含dsRNA的饲料后可直接观察其表型或者提取酶液，然后测定其活性。但是对繁殖力而言，需要检查试虫羽化至死亡整个成虫期的产卵量，这就导致一个矛盾。因为灰飞虱正常是在稻茎中产卵，如果在RNAi中置入稻茎，灰飞虱将选择取食稻茎，而不是饲料，这样就无法摄入dsRNA，导致RNAi失败；而如果不置入稻茎，灰飞虱又将面临无处产卵的境遇。因此，我们需要设计一个产卵装置，使灰飞虱只能取食人工饲料，同时也有产卵的场所。 三、
技术实现思路
针对上述需求，本专利技术提供一种产卵装置，可为取食含dsRNA饲料的灰飞虱提供产卵场所，保证饲喂法研宄基因功能的实验得以顺利进行。 本专利技术的技术方案是: 一种灰飞虱产卵装置及使用方法，由两端开口的玻璃管、80目尼龙纱、橡皮筋、无菌牙签、润湿的无菌脱脂棉和封口膜(Parafilm膜)组成。具体方案为:用80目尼龙纱封住玻璃管的一端；然后取I根无菌牙签，用润湿的无菌脱脂棉缠绕，再用封口膜将脱脂棉封闭；放入待产卵灰飞虱成虫，先用一层封口膜将玻璃管的另一端封闭，在膜中央加入人工饲料，然后再用一层封口膜封闭饲料；完成后，在封口膜端用加湿器喷雾保湿。 本专利技术专利技术的有益效果是，可以解决饲喂法RNAi研宄中，灰飞虱无产卵场所的问题，为相关基因繁殖功能的研宄提供保障。 四、【专利附图】【附图说明】 图1 一端用80目尼龙纱封闭的玻璃管。 图2封口膜封闭的湿润脱脂棉缠绕的牙签示意图。 图3不同尺寸的封口膜 图4灰飞产卵装置五、 【具体实施方式】 将8X2.5cm的封口膜(图3)在纵向方向上尽量拉薄，然后将缠绕脱脂棉的牙签置于封口膜中央，横向折叠，获得封口膜封闭的湿润脱脂棉缠绕的牙签(图2)。用2.5X2.5cm的封口膜(图3)封闭玻璃管另一端，在封口膜中央滴入50微升含dsRNA的人工饲料，再用3X3cm封口膜(图3)封闭。然后将玻璃管平放，取下尼龙纱，置入图2所示封口膜封闭的缠绕湿润脱脂棉的牙签，重新用尼龙纱封闭开口，即获得灰飞虱产卵装置(图4)。RNAi实验时，取下尼龙纱，将待实验成虫转移到玻璃管中，再重新用尼龙纱封闭开口，将封口膜一端面向加湿器，保持一定的湿度，每5天更换一次封口膜封闭的湿润脱脂棉缠绕的牙签(图2)，统计更换下来的所有封口膜上卵的数量，即可获得实验成虫的产卵量。【权利要求】1.。该装置包括一根12cmX3cm的玻璃管，该管在纵向两端均开口 ；在管的一端用80目尼龙纱封口，另一端用双层封口膜(Parafilm膜)封口，并且在这两层封口膜之间包入人工饲料；再用润湿的无菌脱脂棉缠绕牙签，并用封口膜将脱脂棉封闭；放入待产卵灰飞虱成虫；上述准备完成后，在封口膜方向用加湿器喷雾保湿，防止封口膜因干燥而皲裂。该装置主要用于基于RNAi方法研宄灰飞虱相关基因功能时繁殖力的测定。【文档编号】A01K67/033GK104509493SQ201410763567【公开日】2015年4月15日 申请日期:2014年12月9日 优先权日:2014年12月9日 【专利技术者】王利华, 罗光华, 单丹, 姚静, 张月亮, 方继朝 申请人:江苏省农业科学院本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种灰飞虱产卵装置及其使用方法。该装置包括一根12cm×3cm的玻璃管，该管在纵向两端均开口；在管的一端用80目尼龙纱封口，另一端用双层封口膜(Parafilm膜)封口，并且在这两层封口膜之间包入人工饲料；再用润湿的无菌脱脂棉缠绕牙签，并用封口膜将脱脂棉封闭；放入待产卵灰飞虱成虫；上述准备完成后，在封口膜方向用加湿器喷雾保湿，防止封口膜因干燥而皲裂。该装置主要用于基于RNAi方法研究灰飞虱相关基因功能时繁殖力的测定。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王利华，罗光华，单丹，姚静，张月亮，方继朝，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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