一种软体部高黑色素含量长牡蛎的选育方法技术

本发明专利技术公开了一种软体部高黑色素含量长牡蛎（“乌”牡蛎）的选育方法，以及方法有效性的证明方案，它包括以下步骤：观察普通牡蛎的颜色，选择黑色壳的面积占总壳面积的比例为90%以上并且明度值V<0.20的牡蛎、牡蛎壳黑色素的提取、牡蛎软体部黑色素的提取、黑色素含量与软体部黑色素含量之间的相关性分析，申请人在实验过程中，发现长牡蛎贝壳壳色与外套膜中黑色素沉积量有显著正相关的现象，贝壳越黑则其软体部黑色素含量也就越多。本发明专利技术能准确快速的选育出软体部黑色素含量高的牡蛎，可提高牡蛎育种的效率，由于黑色素的保健价值已得到市场认可，故本方法得到的牡蛎新品种可增加养殖的附加值。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种软体部高黑色素含量长牡蛎（“乌”牡蛎）的选育方法，以及方法有效性的证明方案，它包括以下步骤：观察普通牡蛎的颜色，选择黑色壳的面积占总壳面积的比例为90%以上并且明度值V<0.20的牡蛎、牡蛎壳黑色素的提取、牡蛎软体部黑色素的提取、黑色素含量与软体部黑色素含量之间的相关性分析， 申请人:在实验过程中，发现长牡蛎贝壳壳色与外套膜中黑色素沉积量有显著正相关的现象，贝壳越黑则其软体部黑色素含量也就越多。本专利技术能准确快速的选育出软体部黑色素含量高的牡蛎，可提高牡蛎育种的效率，由于黑色素的保健价值已得到市场认可，故本方法得到的牡蛎新品种可增加养殖的附加值。【专利说明】
： 本专利技术涉及一种选育方法，尤其涉及一种软体部高黑色素含量长牡蛎("乌"牡蛎）的选 育方法。
技术介绍
： 黑色素是一种生物多聚体，广泛分布于动植物体中。随着对天然黑色素的不断深入研 究，人们发现，黑色素有广泛的生物活性，包括延缓衰老、调节免疫力、保护光照损伤、抗氧 化，清除自由基、保护心血管功能等，高黑色素含量的天然食品已得到消费者的充分认可， 市场前景广阔。 目前，有学者报道过不同外套膜色长牡蛎的选育，而对于左右壳都是黑色的牡蛎 的选育没有报道，并且对于不同外套膜色长牡蛎的选育是通过肉眼观察外套膜颜色而进行 的，没有报道贝壳颜色与外套膜颜色之间内在的相关性，这种方法需要撬开贝壳，受主观因 素影响较大，费事费力、选育成本高、准确性较差。
技术实现思路
： 本专利技术的目的在于克服上述已有技术的不足而提供一种加速牡蛎的育种进程、提高牡 蛎育种精确性、提高牡蛎的利用价值和经济利益的准确快速的软体部高黑色素含量长牡蛎 的选育方法。 本专利技术的目的可以通过如下措施来达到：一种软体部高黑色素含量长牡蛎的选育 方法，其特征在于其包括以下步骤： (1) 观察挑选左右壳均为黑色的长牡蛎，测量牡蛎左右壳的表面积以及黑色壳部分的 表面积，选出黑色壳的面积占总壳面积的比例为90%以上的长牡蛎； (2) 然后采用ND-2 NCS明度尺测量上述牡蛎壳色的明度值，选取明度值V〈0. 20的长 牡蛎； (3) 将黑色表面积比例为90%以上和壳色明度V〈0. 20的长牡蛎留作种贝，进行正常的 育苗操作。 本专利技术同已有技术相比可产生如下积极效果：本专利技术通过实验证明，长牡蛎壳中 黑色素的含量与其软体部中黑色素的含量有很大的相关性，壳色是评估牡蛎软体黑色素含 量的间接指标。采用以壳色来判断软体部黑色素含量的方法，不但可以高效地选择出符合 育种要求的"乌"牡蛎个体，加速了牡蛎的育种进程，也可以提高牡蛎的利用价值和养殖经 济效益。这种新的指标不仅可以用在长牡蛎选育上，也可以尝试用在其他的海洋经济贝类 动物育种上，将加快特种贝类的育种进展。本选育方法无需开壳从而可避免亲本浪费且省 时省力，另外，使用黑色壳的面积占总壳面积的比例为90%以上和贝壳颜色明度值V〈0. 20 的指标，可使得选育过程标准化，从而提高选育的准确性。 【专利附图】【附图说明】： 图1为ND-2 NCS国际通用明度尺扫描件示意图；黑色方框内是牡蛎壳色选择的明度 临界值； 图2为长牡蛎壳与软体部中黑色素含量的相关性分析示意图，其中，黑色方块表示30 组牡蛎壳与软体部中黑色素含量的配对数据，R2指相关系数。 【具体实施方式】：下面对本专利技术的【具体实施方式】作详细说明： 实施例：一种通过外壳颜色选择软体部含有大量黑色素长牡蛎的选育方法，以及方法 有效性的证明方案，它包括以下步骤： 1. 1选育方法： (1)观察挑选左右壳均为黑色的牡蛎，测量牡蛎左右壳的表面积以及黑色壳部分的表 面积，选出黑色壳的面积占总壳面积的比例为90%以上的牡蛎。 (2)采用ND-2 NCS明度尺（lightness meter)测量牡蛎壳色的明度值，选取明度 值V〈0. 20的牡蛎。（注：ND-2 NCS明度尺是由瑞典出版的国际标准色卡，清楚表现由白色到 黑色共18个标准明度级，即物体颜色越黑明度越低，越白明度越高，能有效的表现出物体 黑色的程度，请见图1)。 (3)将黑色表面积比例和壳色明度均符合要求的长牡蛎留作种贝，进行正常的育 苗操作。 1.2方法有效性的证明： (1)将选取的牡蛎进行壳中黑色素的提取。 (2)将选取的牡蛎进行软体部中黑色素的提取。 (3)将壳中黑色素含量与软体部中黑色素含量进行相关性分析。 具体方法有效性的证明实验例如下： 1.实验材料： 长牡蛎：本实验所用活的长牡蛎，购买于烟台市环海路农贸市场，平均体重l〇〇g，总数 30只。 1.1仪器设备： 循环水真空泵、电子密度天平、电热恒温水浴锅、电热恒温水浴锅、电热恒温鼓风干燥 箱、索氏提取器一套、研钵、烧杯、三角烧瓶、玻璃棒； 1. 2实验试剂： 包括盐酸、乙醚、蒸馏水。盐酸溶液的配制：购买的盐酸为标准浓度12mol/l，本实验 所需要的盐酸浓度为6mol/l。每次实验所需要的盐酸体积为600ml，用量筒量取300ml 12mol/L的盐酸倒入装有300ml蒸馈水的烧杯中配制成6mol/l的盐酸。 2.实验方法： 2. 1牡蛎壳中黑色素的提取： 2. I. 1前期准备：将30只牡蛎全部清洗干净； 2. 1. 2工艺流程； 原料准备一粉碎一水解一水浴一抽滤一去脂一洗涤、过滤一干燥一称量； 2. 1. 3操作要点： (1)原料：选择壳上有黑色斑点的牡蛎作为原料； 〈2)粉末的制备：将牡蛎壳上的杂质洗去，将牡蛎壳粉碎研磨备用； (3〉水解：称量牡蛎壳粉末30g置于IOOOml的三角烧瓶中，先用6 mol/1盐酸溶液200 ml浸泡12 h ; i:T)水浴：将浸泡过壳粉200ml盐酸溶液弃去，将残渣放入500 ml圆底烧瓶中再加6 mol/1 HCl溶液400 ml，装上冷凝管于100 °C的水浴中加热I h ; ?5?抽滤：加热完毕后，将圆底烧瓶内的牡蛎壳用布氏漏斗抽滤，弃去滤液，保留滤渣； ?5?去脂：将滤渣用滤纸包好，置于索氏脂肪提取器中，用乙醚在42 °C左右的水浴中 脱脂，待索氏管中乙醚呈现出澄清状态后，脱脂结束，再将滤纸包取出，在抽滤装置上用蒸 馏水反复洗涤多次； 干燥称重：最后在80°C恒温干燥箱中烘干，取出黑色素，称重； (S1计算：黑色素的含量=黑色素重量（g)/样本重量（g) X 100%。 2. L 4具体实验步骤： ?Τ?原料的处理： 用牡蛎刀将鲜活的牡蛎撬开，把牡蛎肉剥离下来，作为其他实验备用。将牡蛎壳上的杂 质以及牡蛎肉清理干净，清洗干净后晒干，以方便研磨和提取。 ·:'2)粉碎： 先用锤子将牡蛎壳敲成为碎片，再用研钵研磨成精细的粉状，减小与盐酸混合时的损 失和方便提取。 ⑶水解： 称量牡蛎壳粉末30g置于IOOOml的三角烧瓶中，将200ml 6mol/l的盐酸缓慢倒入烧 瓶中，边倒边用玻璃棒搅拌，以防盐酸与碳酸钙发生反应后溶液溢出，减小损失。牡蛎壳中 含有大量的碳酸钙和少量的壳质素，与盐酸发生的化学反应产生大量气体二氧化碳，化学 方程式如下： 2HCl+CaC03=CaCl2+H20+C02, 天然黑色素在体内与蛋白质、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种软体部高黑色素含量长牡蛎的选育方法，其特征在于其包括以下步骤：（1）观察挑选左右壳均为黑色的长牡蛎，测量牡蛎左右壳的表面积以及黑色壳部分的表面积，选出黑色壳的面积占总壳面积的比例为90%以上的长牡蛎；（2） 然后采用ND‑2 NCS明度尺测量上述牡蛎壳色的明度值，选取明度值V<0.20的长牡蛎；（3）将黑色表面积比例为90%以上和壳色明度V<0.20的长牡蛎留作种贝，进行正常的育苗操作。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓通，于文超，赵南南，张子豪，王娇，武长路，
申请(专利权)人：鲁东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37