一种蓝雪花的组织培养快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种蓝雪花的组织培养快繁方法，即以茎段为外植体建立了蓝雪花离体快繁体系，为实现蓝雪花组织培养工厂化生产提供技术支持。本发明专利技术以茎段为外植体，通过单芽诱导、丛生芽增殖、生根培养以及试管苗驯化移栽等过程实现了蓝雪花的组织培养快速繁殖，本发明专利技术的实施既能丰富花卉品种，又能为工厂化育苗带来经济效益，也可为蓝雪花新品种培育提供研究材料。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，即以茎段为外植体建立了蓝雪花离体快繁体系，为实现蓝雪花组织培养工厂化生产提供技术支持。本专利技术以茎段为外植体，通过单芽诱导、丛生芽增殖、生根培养以及试管苗驯化移栽等过程实现了蓝雪花的组织培养快速繁殖，本专利技术的实施既能丰富花卉品种，又能为工厂化育苗带来经济效益，也可为蓝雪花新品种培育提供研究材料。【专利说明】
本专利技术涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及。
技术介绍
Wm^Plumbago aaricWa)又名蓝花丹、蓝茉莉、蓝雪丹等，为白花科白花丹属多年生常绿灌木，一种观赏价值与药用价值俱佳的新型花卉。蓝雪花富含白花丹素，对风湿关节炎、血瘀经闭、跌打损伤、肿毒恶疮以及疥癣具有良好的治疗效果。 蓝雪花是一种集观赏价值与药用价值于一体的新型花卉，具有优良的市场应用前景。由于蓝雪花结实率低，种子价格昂贵，扩繁系数低，靠种子繁殖已无法满足蓝雪花种苗的需求。另外，由于实验材料的缺乏，目前对蓝雪花的研究严重滞后，关于蓝雪花植物组织培养方面的研究尚未有任何的报道。因此，非常有必要建立系统的蓝雪花离体快繁体系，为今后利用遗传转化技术对蓝雪花进行新品种选育和品质改良奠定基础。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，本专利技术以茎段为外植体，通过单芽诱导、丛生芽增殖、生根培养以及试管苗驯化移栽等过程实现了蓝雪花的组织培养快速繁殖，本专利技术的实施既能丰富花卉品种，又能为工厂化育苗带来经济效益，也可为蓝雪花新品种培育提供研究材料。 本专利技术的，包括以下的工艺步骤:(O单芽诱导:选取长势良好无病害的一年生细嫩枝条，以洗洁精水溶液浸泡10?20min,置于自来水中冲洗30?60min，于超净工作台中以75?80%乙醇溶液浸泡10?30s,无菌水冲洗3?5次,再用0.1?0.5%升萊溶液消毒5?1min,无菌水冲洗3?5次后用无菌滤纸吸干表面的水分，将枝条上的叶片切除后，切成Icm的茎段，并接种于单芽诱导培养基中于每天光照10?11小时，光照强度为1500?25001x，培养温度为25?28V的条件下培养直至生出芽体。 (2)丛生芽诱导:当单芽长至2?3cm时，剪下单芽并接种到增殖培养基上进行丛生芽诱导，接种后先在25?28°C条件下全暗培养3?5天，然后置于每天光照10?16小时，光照强度为2000?30001x，培养温度为25?28°C的条件下培养直至形成丛生芽。 (3)生根培养:将分化出的丛生芽长至3?4cm后接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在25?28°C条件下全暗培养5?7天，然后置于每天光照12?16小时，光照强度为2000?35001x，培养温度为25?28°C的条件下培养直至长出根。 (4)试管苗移栽:将长至8?1cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5?7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由松树皮和火碳泥(1:3)混合成的基质中并定植于大田中。 上述步骤(I)所述的茎段是指以茎节为界，上半部分保留0.4cm，下半部分保留0.6cm的长度为Icm带节莖段。 上述步骤(I)所述的单芽诱导培养基为:MS+0.1?0.8mg/L6 一 BA+2.5%?3.5%蔗糖+0.35%?0.5%琼脂+0.05%?0.1%活性炭，pH值为5.4?5.8。 上述步骤(2)所述的增殖培养基为:MS+0.1?0.5mg/L NAA+1.0?2.0mg/L6-BA+0.1 ?0.5mg/L IAA+1.5% ?3.5% 蔗糖 +0.4% ?0.7% 琼脂 +0.05% ?0.1% 活性炭，pH值为5.4?5.8。 上述步骤(3)所述的生根培养基为:l/2MS+0.1?0.5mg/L NAA+2.0%?2.5%蔗糖+0.4%?0.7%琼脂+0.05%?0.1%活性炭，pH值为5.4?5.8。 目前对蓝雪花的研究严重滞后，关于蓝雪花植物组织培养方面的研究尚未有任何的报道。因此，非常有必要建立系统的蓝雪花离体快繁体系，为今后利用遗传转化技术对蓝雪花进行新品种选育和品质改良奠定基础。 【具体实施方式】 以下实施例是对本专利技术的进一步说明，不是对本专利技术的限制。 实施例1(O单芽诱导:选取长势良好无病害的一年生细嫩枝条，以洗洁精水溶液浸泡lOmin，置于自来水中冲洗30min，于超净工作台中以75%乙醇溶液浸泡10s，无菌水冲洗3次，再用0.1%升汞溶液消毒5min，无菌水冲洗3次后用无菌滤纸吸干表面的水分，将枝条上的叶片切除后，切成Icm的茎段，并接种于单芽诱导培养基中于每天光照10小时，光照强度为1500x,培养温度为25°C的条件下培养32天即可生出芽体。所述的茎段为以茎节为界，上半部分保留0.4cm,下半部分保留0.6cm的长度为Icm带节茎段。所述的单芽诱导培养基为:MS+0.4mg/L6 — BA+2.5% 蔗糖 +0.35% 琼脂 +0.1% 活性炭，pH 值为 5.8，诱导率达 86%。 (2)丛生芽诱导:当单芽长至2?3cm时，剪下单芽并接种到增殖培养基上进行丛生芽诱导，接种后先在25°C条件下全暗培养3天，然后置于每天光照10小时，光照强度为20001x，培养温度为25 V的条件下培养21天即形成丛生芽。所述的增殖培养基为MS+0.lmg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+0.lmg/L IAA+1.5% 蔗糖 +0.4% 琼脂 +0.05% 活性炭，pH 值为 5.8。 (3)生根培养:将分化出的丛生芽长至3?4cm后接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在25°C条件下全暗培养5天，然后置于每天光照16小时，光照强度为20001x，培养温度为25°C的条件下培养18天即可长出根，生根率达93%。所述的生根培养基为1/2MS+0.lmg/L NAA+2.0% 蔗糖 +0.4% 琼脂 +0.05% 活性炭，pH 值为 5.8。 (4)试管苗移栽:将长至8?1cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5?7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由松树皮和火碳泥(1:3)混合成的基质中并定植于大田中，移栽成活率达95%。 实施例2(O单芽诱导:选取长势良好无病害的一年生细嫩枝条，以洗洁精水溶液浸泡20min，置于自来水中冲洗40min，于超净工作台中以78%乙醇溶液浸泡13s，无菌水冲洗5次，再用0.3%升汞溶液消毒7min，无菌水冲洗5次后用无菌滤纸吸干表面的水分，将枝条上的叶片切除后，切成Icm的茎段，并接种于单芽诱导培养基中于每天光照12小时，光照强度为2000x,培养温度为25°C的条件下培养30天即可生出芽体。所述的茎段为以茎节为界，上半部分保留0.4cm,下半部分保留0.6cm的长度为Icm带节茎段。所述的单芽诱导培养基为:MS+0.6mg/L6 — BA+3%蔗糖+0.35%琼脂+0.1%活性炭，pH值为5.8，诱导率达83%。 (2)丛生芽诱导:当单芽长至2?3cm时，剪下单芽并接种到增殖培养基上进行丛生芽诱导，接种后先在25°C条件下全暗培养5天，然后置于每天光照12小时，光照强度为25001x，培养温度为25 V的条件下培养23天即形成丛生芽。所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蓝雪花的组织培养快繁方法，其特征在于包括以下工艺步骤：（1）单芽诱导：选取长势良好无病害的一年生细嫩枝条，以洗洁精水溶液浸泡10～20min，置于自来水中冲洗30～60min,于超净工作台中以75～80%乙醇溶液浸泡10～30s，无菌水冲洗3～5次，再用0.1～0.5%升汞溶液消毒5～10min，无菌水冲洗3～5次后用无菌滤纸吸干表面的水分，将枝条上的叶片切除后，切成1cm的茎段，并接种于单芽诱导培养基中于每天光照10～11小时，光照强度为1500～2500lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至生出芽体；（2）丛生芽诱导：当单芽长至2～3cm时，剪下单芽并接种到增殖培养基上进行丛生芽诱导，接种后先在25～28℃条件下全暗培养3～5天，然后置于每天光照10～16小时，光照强度为2000～3000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至形成丛生芽；（3）生根培养：将分化出的丛生芽长至3～4cm后接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养5～7天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为2000～3500lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至长出根；（4）试管苗移栽：将长至8～10cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由松树皮和火碳泥（1：3）混合成的基质中并定植于大田中。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：梁彩英，
申请(专利权)人：梁彩英，
类型：发明
国别省市：广西;45