一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法技术

本发明专利技术研究了一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法，包括小驳骨无菌花药的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、炼苗移栽等步骤，本发明专利技术方法采用花药离体培养，可以获得大量的再生植株，遗传稳定性强，周期短，操作可控。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术研究了，包括小驳骨无菌花药的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、炼苗移栽等步骤，本专利技术方法采用花药离体培养，可以获得大量的再生植株，遗传稳定性强，周期短，操作可控。【专利说明】
本专利技术涉及小驳骨组织培养的快繁方法，属于植物栽培
。
技术介绍
小驳骨，GendarussavulgarisNees,爵床科,又名接骨木、接骨筒、乌骨黄藤，常绿小灌木，喜欢湿润的气候环境，生于村旁或路边的灌丛中，有栽培。资源分布:分布于台湾、广东、海南、广西、云南等地。叶含β_谷留醇。根含生物碱爵床脂素和挥发油。味辛；苦；性平。祛风湿；散瘀血；续筋骨。主风湿痹痛；月经不调；产后腹痛；跌打肿痛；骨折。目前常用于扦插繁殖，其它繁殖系数尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种小驳骨组织培养的快繁方法，本专利技术方法采用花药离体培养，可以获得大量的再生植株，遗传稳定性强，周期短，操作可控。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的小驳骨花药使用6°Co_y射线5_10Gy处理,接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001x，光期8h，温度24°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.4-0.5mg/L+KT0.4-0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C，将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气。 采用本专利技术制备的小驳骨成活率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 【具体实施方式】 实施例1取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的小驳骨花药使用6°Co_y射线5_10Gy处理,接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001X，光期8h，温度24 °C，诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.4mg/L+KT0.4mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C，将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气，成活率86%。 实施例2取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的小驳骨花药使用6°Co_y射线5_10Gy处理,接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001X，光期8h，温度24 °C，诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.5mg/L+KT0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C，将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气，成活率87%。 实施例3取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的小驳骨花药使用6°Co_y射线5_10Gy处理,接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001X，光期8h，温度24 °C，诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.4mg/L+KT0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C，将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气，成活率88%。【权利要求】1.，包括小驳骨无菌花药的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取小驳骨的花药，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的小驳骨花药使用6tlCo-Y射线5-lOGy处理，接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001x，光期8h，温度24°C ； (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.4-0.5mg/L+KT0.4-0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C ； (4)取步骤(3)分化出来的芽苗进行炼苗移栽。2.按照权利要求1所述的，其特征在于:步骤(O中所述小驳骨花药的获得为，取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min，无菌水冲洗5次。3.按照权利要求1所述的，其特征在于:步骤(4)中小驳骨炼苗移栽的方法为将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气。【文档编号】A01H4/00GK104255512SQ201410540493【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日 【专利技术者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法，包括小驳骨无菌花药的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、炼苗移栽，其主要步骤如下：（1）取小驳骨的花药，对其进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的小驳骨花药使用60Co‑γ射线5‑10Gy处理，接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度400lx，光期8h，温度24℃；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4‑D0.4‑0.5mg/L+KT0.4‑0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照2100lx，温度24℃；（4）取步骤（3）分化出来的芽苗进行炼苗移栽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，杨成东，
申请(专利权)人：南京帝道农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32