FGFR2c胞外段类似物及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术公开一种FGFR2c胞外段类似物及其编码基因与应用。该类似物选自氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型wsFGFR2c；或是与野生型wsFGFR2c的氨基酸序列至少有80％同源性的序列；氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示S252W突变型msFGFR2c；或是与S252W突变型msFGFR2c的氨基酸序列至少有80％同源性的序列。将编码类似物的基因和表达载体重组，得到表达重组载体；将重组载体导入宿主细胞中，得到转基因细胞株。发酵该转基因细胞株，得到FGFR2c胞外段类似物。该FGFR2c胞外段类似物、编码基因、重组载体和转基因细胞株均可用于制备用于抑制EGF信号通路的药物。

【技术实现步骤摘要】
FGFR2c胞外段类似物及其编码基因与应用
本专利技术属于基因工程领域，特别涉及一种FGFR2c胞外段类似物及其编码基因与应用。
技术介绍
FGF信号具有促进细胞增殖，诱导新生血管形成等重要生理作用。肿瘤的发生与发展过程与FGF信号通路也有十分密切的关系。典型的FGF受体由细胞外区、跨膜区和细胞内区组成，它们都为单链的糖蛋白分子。细胞外区为3个免疫球蛋白样结构域(Ⅰ～Ⅲ)，分别命名为D1，D2和D3，在D1和D2之间有一个由4～8个酸性氨基酸组成的酸盒；跨膜区是一个穿膜螺旋；细胞内区是酪氨酸激酶区(PTK)。FGF受体胞外段(如D1-D3区)可用于抑制FGF信号，并用于治疗肿瘤、皮肤炎症等。文献报道的FGFR2c亚型胞外段其序列有采用自第147至第366个氨基酸(JuWang,Xue-tingLiu,HuiHuang,etal.AntitumorActivityofaRecombinantSolubleEctodomainofMutantHumanFibroblastGrowthFactorReceptor-2IIIc.MolCancerTher2011；10:1656-1666.)，也有采用自第151至第377个氨基酸(何颖，汪炬等.FGFR2IIIc胞外段的原核表达及其对前列腺癌细胞增殖的抑制作用.中国生物工程杂志.2009,29(7):7～11.文中指出是150～366aa，实际上通过引物扩增出来的是151～377aa)具有抑制肿瘤细胞增殖作用，但存在着溶解性不太好、较不稳定等问题。EGFR是原癌基因c-erbB1的表达产物，是表皮生长因子受体(HER)家族成员之一。该家族包括HER1(erbB1，EGFR)、HER2(erbB2，NEU)、HER3(erbB3)及HER4(erbB4)。HER家族在细胞生理过程中发挥重要的调节作用。EGFR信号通路对细胞的生长、增殖和分化等生理过程发挥重要的作用。EGFR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其相关信号通路中关键因子的活性或细胞定位异常，均会引起肿瘤、糖尿病、免疫缺陷及心血管疾病的发生。也是肿瘤治疗中重要的分子靶点。对EGF信号的抑制往往导致其他酪氨酸激酶信号的激活，如FGF信号，并产生耐药。因此，有必要寻找能够同时抑制EGF以及FGF信号的分子，对肿瘤的治疗效果更好。
技术实现思路
本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种FGFR2c胞外段类似物，使其蛋白稳定性更好。本专利技术的另一目的在于提供所述的FGFR2c胞外段类似物的编码基因。本专利技术的再一目的在于提供所述的FGFR2c胞外段类似物及其编码基因的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种FGFR2c胞外段类似物(sFGFR2c)，选自如下多肽：(1)野生型wsFGFR2c：氨基酸序列如下所示；或是与野生型wsFGFR2c的氨基酸序列至少有80％同源性的序列；所述的野生型wsFGFR2c的氨基酸序列：NKRAPYWTNTEKMEKRLHAVPAANTVKFRCPAGGNPMPTMRWLKNGKEFKQEHRIGGYKVRNQHWSLIMESVVPSDKGNYTCVVENEYGSINHTYHLDVVERSPHRPILQAGLPANASTVVGGDVEFVCKVYSDAQPHIQWIKHVEKNGSKYGPDGLPYLKVLKAAGVNTTDKEIEVLYIRNVTFEDAGEYTCLAGNSIGISFHSAWLTVL；(2)S252W突变型msFGFR2c：氨基酸序列如下所示；或是与S252W突变型msFGFR2c的氨基酸序列至少有80％同源性的序列；所述的S252W突变型msFGFR2c的氨基酸序列为：NKRAPYWTNTEKMEKRLHAVPAANTVKFRCPAGGNPMPTMRWLKNGKEFKQEHRIGGYKVRNQHWSLIMESVVPSDKGNYTCVVENEYGSINHTYHLDVVERWPHRPILQAGLPANASTVVGGDVEFVCKVYSDAQPHIQWIKHVEKNGSKYGPDGLPYLKVLKAAGVNTTDKEIEVLYIRNVTFEDAGEYTCLAGNSIGISFHSAWLTVL；所述FGFR2c胞外段类似物的编码基因，选自如下核苷酸序列：(1)①编码野生型wsFGFR2c的核苷酸序列，如下所示；或②因遗传密码的简并性而与(1)①的核苷酸序列不同的序列；或③与(1)①或(1)②的核苷酸序列至少有80％同源性的序列；所述的编码野生型wsFGFR2c的核苷酸序列为：AACAAGAGAGCACCATACTGGACCAACACAGAAAAGATGGAAAAGCGGCTCCATGCTGTGCCTGCGGCCAACACTGTCAAGTTTCGCTGCCCAGCCGGGGGGAACCCAATGCCAACCATGCGGTGGCTGAAAAACGGGAAGGAGTTTAAGCAGGAGCATCGCATTGGAGGCTACAAGGTACGAAACCAGCACTGGAGCCTCATTATGGAAAGTGTGGTCCCATCTGACAAGGGAAATTATACCTGTGTGGTGGAGAATGAATACGGGTCCATCAATCACACGTACCACCTGGATGTTGTGGAGCGATCGCCTCACCGGCCCATCCTCCAAGCCGGACTGCCGGCAAATGCCTCCACAGTGGTCGGAGGAGACGTAGAGTTTGTCTGCAAGGTTTACAGTGATGCCCAGCCCCACATCCAGTGGATCAAGCACGTGGAAAAGAACGGCAGTAAATACGGGCCCGACGGGCTGCCCTACCTCAAGGTTCTCAAGGCCGCCGGTGTTAACACCACGGACAAAGAGATTGAGGTTCTCTATATTCGGAATGTAACTTTTGAGGACGCTGGGGAATATACGTGCTTGGCGGGTAATTCTATTGGGATATCCTTTCACTCTGCATGGTTGACAGTTCTG；(2)①编码S252W突变型msFGFR2c的核苷酸序列，如SEQIDNO.4所示；或②因遗传密码的简并性而与(2)①的核苷酸序列不同的序列；或③与(2)①或(2)②的核苷酸序列至少有80％同源性的序列；所述的编码S252W突变型msFGFR2c的核苷酸序列为：AACAAGAGAGCACCATACTGGACCAACACAGAAAAGATGGAAAAGCGGCTCCATGCTGTGCCTGCGGCCAACACTGTCAAGTTTCGCTGCCCAGCCGGGGGGAACCCAATGCCAACCATGCGGTGGCTGAAAAACGGGAAGGAGTTTAAGCAGGAGCATCGCATTGGAGGCTACAAGGTACGAAACCAGCACTGGAGCCTCATTATGGAAAGTGTGGTCCCATCTGACAAGGGAAATTATACCTGTGTGGTGGAGAATGAATACGGGTCCATCAATCACACGTACCACCTGGATGTTGTGGAGCGATGGCCTCACCGGCCCATCCTCCAAGCCGGACTGCCGGCAAAT本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种FGFR2c胞外段类似物，其特征在于选自如下多肽：(1)野生型wsFGFR2c：氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；或是与野生型wsFGFR2c的氨基酸序列至少有80％同源性的序列；(2)S252W突变型msFGFR2c：氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或是与S252W突变型msFGFR2c的氨基酸序列至少有80％同源性的序列。

【技术特征摘要】
1.FGFR2c胞外段类似物在制备抑制EGF信号通路的制剂中的应用，其特征在于所述的FGFR2c胞外段类似物选自如下多肽：(1)野生型wsFGFR2c：氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；(2)S252W突变型msFGFR2c：氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。2.根据权利要求1所述FGFR2c胞外段类似物在制备抑制EGF信号通路的制剂中的应用，其特征在于：所述的FGFR2c胞外段类似物的编码基因选自如下核苷酸序列：(1)①编码野生型wsFGFR2c的核苷酸序列，如SEQIDNO.3所示；或②因遗传密码的简并性而与(1)①的核苷酸序列不同的序列，该序列编码的蛋白氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；(2)①编码S252W突变型msFGFR2c的核苷酸序列，如SEQIDNO.4所示；或②因遗传密码的简并性而与(2)①的核苷酸序列不同的序列，该序列编码的蛋白氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。3.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪炬，陈安安，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东;44